中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
1 前言 | 第6-18页 |
2 实验材料 | 第18-21页 |
2.1 主要仪器 | 第18页 |
2.2 主要试剂 | 第18-21页 |
3 实验方法 | 第21-28页 |
3.1 研究对象 | 第21页 |
3.2 实验操作流程图 | 第21页 |
3.3 人基因组DNA的提取 | 第21-22页 |
3.4 LPL基因目标片段PCR扩增 | 第22-23页 |
3.5 PCR产物的SSCP分析 | 第23-24页 |
3.6 分子克隆 | 第24-27页 |
3.7 样品DNA测序 | 第27页 |
3.8 LPL mRNA前体二级结构预测 | 第27-28页 |
4 实验结果 | 第28-36页 |
4.1 人白细胞DNA提取 | 第28页 |
4.2 目的基因PCR扩增及PCR产物琼脂糖凝胶电泳鉴定 | 第28页 |
4.3 限制性内切酶切割鉴定PCR产物 | 第28-29页 |
4.4 SSCP实验条件的建立 | 第29-30页 |
4.5 SSCP-PAGE电泳结果分析 | 第30页 |
4.6 重组转化菌落蓝白斑筛选 | 第30-31页 |
4.7 重组质粒的抽提结果 | 第31页 |
4.8 重组质粒双酶切电泳鉴定结果 | 第31-32页 |
4.9 重组质粒中目的片段的PCR扩增及电泳鉴定结果 | 第32页 |
4.10 分离的目的基因SSCP分析 | 第32-34页 |
4.11 目的基因的单克隆产物DNA序列测定结果 | 第34页 |
4.12 LPL mRNA前体二级结构预测结果 | 第34-36页 |
5 讨论 | 第36-42页 |
5.1 PCR反应体系及条件优化 | 第36页 |
5.2 Lis-SSCP分析技术及结果分析 | 第36-37页 |
5.3 Pwo DNA聚合酶在SSCP条件优化中的作用 | 第37页 |
5.4 分子克隆策略 | 第37-39页 |
5.5 突变实验结果的分析 | 第39-42页 |
6 结论 | 第42-43页 |
7 英文缩略词 | 第43-44页 |
8 附图表 | 第44-47页 |
9 参考文献 | 第47-55页 |
10 致谢 | 第55页 |