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何首乌毛状根培养及其活性成分的产生

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-9页
第一章 绪论第9-13页
 1.1 利用毛状根培养技术进行次生代谢产物生产的研究概况第9-12页
 1.2 何首乌组织培养研究概况第12页
 1.3 立题依据第12-13页
第二章 何首乌毛状根的诱导及筛选第13-24页
 2.1 诱导材料的选择与培养第13-14页
 2.2 菌种的保藏与活化培养第14-15页
  2.2.1 培养基组成第14页
  2.2.2 菌种的活化培养第14-15页
 2.3 毛状根的诱导第15-16页
  2.3.1 无菌苗直接感染法第15页
  2.3.2 接种感染法第15-16页
 2.4 影响毛状根诱导率的四种因素第16-20页
  2.4.1 不同诱导方法对毛状根诱导率的影响第16-17页
  2.4.2 无菌苗不同部位对毛状根的诱导率的影响第17-18页
  2.4.3 不同外源生长素对毛状根诱导率的影响第18-19页
  2.4.4 不同菌株对毛状很诱导率的影响第19-20页
 2.5 毛状根的除菌第20-24页
  2.5.1 抗生素除菌第21-22页
  2.5.2 温度除菌第22-24页
第三章 何首乌毛状根的鉴定第24-39页
 3.1 实验材料第25-27页
 3.2 实验方法第27-34页
  3.2.1 高压纸电泳第27-28页
  3.2.2 PCR扩增分析第28-31页
   3.2.2.1 植物DNA和毛状根DNA的提取第28-29页
   3.2.2.2 质粒DNA的提取第29-30页
   3.2.2.3 引物的选择第30页
   3.2.2.4 扩增反应步骤第30-31页
  3.2.3 Southern印迹杂交第31-34页
   3.2.3.1 原植物、毛状根及质粒DNA的提取第31页
   3.2.3.2 DNA的限制性内切酶酶解第31页
   3.2.3.3 琼脂糖凝胶电泳及DNA向尼龙膜的转移第31-32页
   3.2.3.4 PCR产物的探针标记第32-33页
   3.2.3.5 杂交、洗膜、显影及探针的去除第33-34页
 3.3 实验结果第34-37页
 3.4 实验结论第37-39页
第四章 毛状根中蒽醌类化合物的检测第39-47页
 4.1 蒽醌类化合物的提取第39-40页
 4.2 蒽醌类化合物的薄层层析定性鉴别第40-41页
 4.3 蒽醌类化合物的高效液相定量分析第41-47页
  4.3.1 实验仪器与试剂第41-42页
  4.3.2 HPLC色谱条件第42页
  4.3.3 样品溶液的制备第42页
  4.3.4 标准曲线的制备第42-43页
  4.3.5 实验结果第43-47页
第五章 毛状根液体培养条件的优化及生长动力学考察第47-58页
 5.1 毛状根液体培养基的选择第47-49页
 5.2 毛状根液体培养的生长动力学考察第49-57页
  5.2.1 主要仪器与药品、试剂第49页
  5.2.2 实验方法第49-53页
   5.2.2.1 毛状根的液体培养及收获第49-50页
   5.2.2.2 培养基中残存蔗糖的测定第50-51页
   5.2.2.3 培养基中NH_4~+的测定第51-52页
   5.2.2.4 培养基中NO_3~-的测定第52页
   5.2.2.5 培养基中PO_4~(3-)的测定第52-53页
  5.2.3 结果与讨论第53-57页
   5.2.3.1 生长量的累积曲线第53-54页
   5.2.3.2 蔗糖的消耗代谢曲线第54-55页
   5.2.3.3 PO_4~(3-)的消耗代谢曲线和pH的变化曲线第55-56页
   5.2.3.4 NH_4~-和NO_3~-的消耗代谢曲线第56-57页
 5.3 实验结论第57-58页
第六章 结论与讨论第58-64页
 6.1 结论第58-59页
 6.2 讨论第59-64页
参考文献第64-71页
附录第71-73页
致谢第73页

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