| 中文摘要 | 第1-14页 |
| 英文摘要 | 第14-17页 |
| 第一章 绪论 | 第17-41页 |
| ·发酵工程进展 | 第17-18页 |
| ·基因工程药物 | 第18-22页 |
| ·肿瘤坏死因子(TNF) | 第20-22页 |
| ·肿瘤坏死因子的性质和结构 | 第20页 |
| ·肿瘤坏死因子的生物学效应和抗肿瘤特性 | 第20-22页 |
| ·基因工程肿瘤坏死因子多肽药物 | 第22页 |
| ·重组工程菌的发酵 | 第22-28页 |
| ·重组工程菌基因表达的调控 | 第23-24页 |
| ·质粒拷贝数 | 第24-26页 |
| ·质粒稳定性 | 第26页 |
| ·质粒DNA复制的调控 | 第26-28页 |
| ·藻类基因工程 | 第28-33页 |
| ·藻类质粒与载体的构建 | 第28-30页 |
| ·蓝藻质粒与载体的构建 | 第29-30页 |
| ·蓝藻的基因转移系统 | 第30-32页 |
| ·藻类基因工程药物 | 第32-33页 |
| ·鱼腥藻 | 第33-36页 |
| ·鱼腥藻的特征 | 第33页 |
| ·鱼腥藻细胞构造及其化学成分 | 第33-35页 |
| ·鱼腥藻7120 | 第35-36页 |
| ·本研究的意义和主要内容 | 第36-38页 |
| 参考文献 | 第38-41页 |
| 第二章 材料与方法 | 第41-53页 |
| ·实验材料 | 第41-44页 |
| ·藻种及细胞株 | 第41页 |
| ·培养基及其有关试剂的配制 | 第41-43页 |
| ·用于培养鱼腥藻7120的培养基 | 第41-42页 |
| ·用于培养小鼠成纤维母细胞株L929的培养基 | 第42-43页 |
| ·与电泳有关的溶液的配制 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43-44页 |
| ·主要仪器材料 | 第44-45页 |
| ·实验方法 | 第45-50页 |
| ·藻种和细胞株的培养方法和条件 | 第45页 |
| ·鱼腥藻7120的培养 | 第45页 |
| ·小鼠成纤维母细胞株L929的培养 | 第45页 |
| ·小鼠成纤维母细胞株L929的冻存和复苏 | 第45页 |
| ·分析方法 | 第45-50页 |
| ·鱼腥藻7120生物量测定 | 第46页 |
| ·鱼腥藻7120蛋白含量测定 | 第46-47页 |
| ·质粒缺失率的检测 | 第47页 |
| ·转基因鱼腥藻7120 TNF表达量的测定 | 第47-48页 |
| ·TNF-α生物活性的测定 | 第48-49页 |
| ·转基因鱼腥藻7120质粒的提取纯化和定量 | 第49页 |
| ·数据分析处理方法 | 第49-50页 |
| ·技术路线 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-53页 |
| 第三章 鱼腥藻7120藻种的保藏 | 第53-58页 |
| 参考文献 | 第57-58页 |
| 第四章 转基因鱼腥藻7120质粒稳定性的研究 | 第58-79页 |
| ·转基因型与野生型鱼腥藻7120的生长曲线比较 | 第61-63页 |
| ·转基因鱼腥藻7120的生长与TNF表达曲线 | 第63-64页 |
| ·新霉素对转基因鱼腥藻7120生长的影响 | 第64-65页 |
| ·野生型鱼腥藻7120对选择压力新霉素的敏感动力学 | 第65-67页 |
| ·转基因鱼腥藻7120的质粒分裂稳定性研究 | 第67-70页 |
| ·转基因鱼腥藻7120质粒丢失率检测 | 第67-70页 |
| ·转基因鱼腥藻7120的质粒结构稳定性研究 | 第70-72页 |
| ·转基因鱼腥藻7120的质粒拷贝数 | 第72-75页 |
| ·总结 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-79页 |
| 第五章 光异养培养对转基因鱼腥藻7120生长及表达的影响 | 第79-105页 |
| ·碳源 | 第79-90页 |
| ·不同碳源对转基因鱼腥藻7120生长的影响 | 第79-80页 |
| ·不同光照强度下外源碳水化合物对转基因鱼腥藻7120生长的影响 | 第80-83页 |
| ·连续的光异养条件对转基因鱼腥藻7120生长的影响 | 第83-85页 |
| ·最佳生长碳源浓度 | 第85-86页 |
| ·不同碳源对转基因鱼腥藻7120 TNF表达的影响 | 第86-88页 |
| ·转基因藻TNF的存在部位及连续的光异养条件对TNF表达的影响 | 第88-89页 |
| ·不同碳源浓度对转基因鱼腥藻7120 TNF表达的影响 | 第89-90页 |
| ·氮源 | 第90-96页 |
| ·无机氮源的作用 | 第91页 |
| ·有机氮源的作用 | 第91-93页 |
| ·蛋白胨对生长的作用 | 第91-92页 |
| ·L-精氨酸对生长的影响 | 第92-93页 |
| ·其它氨基酸对生长的作用 | 第93页 |
| ·蛋白胨对转基因鱼腥藻7120 TNF表达的影响 | 第93-95页 |
| ·氨基酸对转基因鱼腥藻7120 TNF表达的影响 | 第95-96页 |
| ·外源添加剂对转基因鱼腥藻7120生长的影响 | 第96-100页 |
| ·生长激素对生长的影响 | 第96-98页 |
| ·生长激素对转基因鱼腥藻7120 TNF表达的影响 | 第98-100页 |
| ·光异养培养条件下转基因鱼腥藻7120的生长特点 | 第100-103页 |
| 参考文献 | 第103-105页 |
| 第六章 环境因子对转基因鱼腥藻7120生长及表达的影响 | 第105-122页 |
| ·接种量的影响 | 第105-107页 |
| ·不同规格培养瓶的影响 | 第107-108页 |
| ·不同规格培养瓶培养对转基因鱼腥藻7120生长量的影响 | 第107-108页 |
| ·不同规格培养瓶培养对转基因鱼腥藻7120 TNF表达的影响 | 第108页 |
| ·装液量的影响 | 第108-110页 |
| ·装液量对转基因鱼腥藻7120生长的影响 | 第108-109页 |
| ·装液量对转基因鱼腥藻7120 TNF表达的影响 | 第109-110页 |
| ·温度的影响 | 第110-113页 |
| ·温度对转基因鱼腥藻7120生长的影响 | 第110-111页 |
| ·温度对转基因鱼腥藻7120 TNF表达的影响 | 第111-113页 |
| ·光的影响 | 第113-116页 |
| ·不同光照时间对生长的影响 | 第113-114页 |
| ·不同光质对生长的影响 | 第114-115页 |
| ·不同光质对转基因鱼腥藻7120 TNF表达的影响 | 第115-116页 |
| ·优化后转基因鱼腥藻7120的发酵过程曲线 | 第116-121页 |
| ·评价细胞生长的几个参量 | 第116-117页 |
| ·优化过程总结 | 第117-118页 |
| ·发酵过程曲线 | 第118-121页 |
| 参考文献 | 第121-122页 |
| 结论与展望 | 第122-125页 |
| 结论 | 第122-124页 |
| 展望 | 第124-125页 |
| 在读期间发表论文及所受奖励 | 第125-126页 |
| 致谢 | 第126页 |
