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抗活化状态LM-1蛋白质单克隆抗体的制备及功能鉴定

内容提要第1-8页
第一章 前言第8-16页
 一. 背景知识第8-14页
   ·LM-1 蛋白质的概况第8-10页
   ·LM-1 蛋白质的构象变化和亲和力调控第10页
   ·噬菌体展示技术第10-12页
   ·单克隆抗体药物的研究进展第12-14页
 二. 论文的研究目的和设计思路第14-16页
   ·论文的研究目的第14-15页
   ·论文设计思路第15-16页
第二章 实验材料和方法第16-26页
 一. 主要试剂第16-17页
 二. 主要仪器第17-18页
 三. 实验方法第18-26页
   ·宿主菌TG1Tr 的扩增第18页
   ·辅助噬菌体KM13 的扩增第18-19页
   ·辅助噬菌体KM13 滴度的测定第19页
   ·制备对照克隆TG1-antiubi 和13CG2 的噬菌体第19-20页
   ·对照克隆TG1-antiubi 和13CG2 的噬菌体滴度的测定第20页
   ·阳性噬菌体筛选第20页
   ·ELISA 检测第20-21页
   ·细胞培养第21-22页
   ·细胞转染第22页
   ·稳定表达细胞系的建立第22页
   ·LM-1 纯化第22-23页
   ·FACS 功能鉴定第23-24页
   ·Flow Chamber 功能鉴定第24页
   ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第24页
   ·scFV 的纯化第24-26页
第三章 结果和讨论第26-37页
 一. 抗原的制备第26-30页
   ·表达质粒的构建第26-27页
   ·稳定细胞系的建立第27-28页
     ·单克隆细胞株的挑选、扩增及保存第27页
     ·单克隆细胞株表达量的鉴定第27-28页
   ·抗原的纯化第28-30页
   ·讨论第30页
 二. 阳性噬菌体的筛选第30-32页
   ·多克隆阳性噬菌体的富集第30-31页
   ·单克隆阳性噬菌体的筛选第31页
   ·讨论第31-32页
 三.scFV 的表达、纯化及功能鉴定第32-37页
   ·scFV 的表达、纯化第32-34页
     ·His-tag 亲和纯化第33-34页
     ·分子筛纯化第34页
   ·scFV 功能的鉴定第34-36页
     ·FACS 鉴定第34-35页
     ·Flow chamber 鉴定第35-36页
   ·讨论第36-37页
第四章 结论第37-38页
参考文献第38-42页
攻读硕士学位期间发表论文第42-43页
致谢第43-44页
中文摘要第44-47页
Abstract第47-50页
作者简历第50页

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