内容提要 | 第1-8页 |
第一章 前言 | 第8-16页 |
一. 背景知识 | 第8-14页 |
·LM-1 蛋白质的概况 | 第8-10页 |
·LM-1 蛋白质的构象变化和亲和力调控 | 第10页 |
·噬菌体展示技术 | 第10-12页 |
·单克隆抗体药物的研究进展 | 第12-14页 |
二. 论文的研究目的和设计思路 | 第14-16页 |
·论文的研究目的 | 第14-15页 |
·论文设计思路 | 第15-16页 |
第二章 实验材料和方法 | 第16-26页 |
一. 主要试剂 | 第16-17页 |
二. 主要仪器 | 第17-18页 |
三. 实验方法 | 第18-26页 |
·宿主菌TG1Tr 的扩增 | 第18页 |
·辅助噬菌体KM13 的扩增 | 第18-19页 |
·辅助噬菌体KM13 滴度的测定 | 第19页 |
·制备对照克隆TG1-antiubi 和13CG2 的噬菌体 | 第19-20页 |
·对照克隆TG1-antiubi 和13CG2 的噬菌体滴度的测定 | 第20页 |
·阳性噬菌体筛选 | 第20页 |
·ELISA 检测 | 第20-21页 |
·细胞培养 | 第21-22页 |
·细胞转染 | 第22页 |
·稳定表达细胞系的建立 | 第22页 |
·LM-1 纯化 | 第22-23页 |
·FACS 功能鉴定 | 第23-24页 |
·Flow Chamber 功能鉴定 | 第24页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第24页 |
·scFV 的纯化 | 第24-26页 |
第三章 结果和讨论 | 第26-37页 |
一. 抗原的制备 | 第26-30页 |
·表达质粒的构建 | 第26-27页 |
·稳定细胞系的建立 | 第27-28页 |
·单克隆细胞株的挑选、扩增及保存 | 第27页 |
·单克隆细胞株表达量的鉴定 | 第27-28页 |
·抗原的纯化 | 第28-30页 |
·讨论 | 第30页 |
二. 阳性噬菌体的筛选 | 第30-32页 |
·多克隆阳性噬菌体的富集 | 第30-31页 |
·单克隆阳性噬菌体的筛选 | 第31页 |
·讨论 | 第31-32页 |
三.scFV 的表达、纯化及功能鉴定 | 第32-37页 |
·scFV 的表达、纯化 | 第32-34页 |
·His-tag 亲和纯化 | 第33-34页 |
·分子筛纯化 | 第34页 |
·scFV 功能的鉴定 | 第34-36页 |
·FACS 鉴定 | 第34-35页 |
·Flow chamber 鉴定 | 第35-36页 |
·讨论 | 第36-37页 |
第四章 结论 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-42页 |
攻读硕士学位期间发表论文 | 第42-43页 |
致谢 | 第43-44页 |
中文摘要 | 第44-47页 |
Abstract | 第47-50页 |
作者简历 | 第50页 |