动物源胰激肽释放酶的纯化
| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-28页 |
| ·前言 | 第10页 |
| ·生化分离的特点以及要求 | 第10-12页 |
| ·胰酶简介 | 第12-13页 |
| ·激肽释放酶简介 | 第13-14页 |
| ·激肽释放酶的发现以及研究进展 | 第13页 |
| ·激肽释放酶的分类 | 第13-14页 |
| ·激肽释放酶的生理功能以及临床应用 | 第14-17页 |
| ·生理功能 | 第14-16页 |
| ·临床应用 | 第16-17页 |
| ·在癌症中作用 | 第16页 |
| ·在中枢神经系统中的作用 | 第16-17页 |
| ·在心血管中的作用 | 第17页 |
| ·对平滑肌的影响 | 第17页 |
| ·其它 | 第17页 |
| ·激肽释放酶的结构和性质 | 第17-20页 |
| ·氨基酸结构和糖类组成 | 第18-19页 |
| ·激肽释放酶的性质 | 第19-20页 |
| ·激肽释放酶的测定方法 | 第20-22页 |
| ·生物检定法 | 第20-21页 |
| ·化学检定法 | 第21页 |
| ·254nm吸光度增值法 | 第21页 |
| ·pH滴定法 | 第21页 |
| ·醇脱氢酶法 | 第21页 |
| ·物理检定法 | 第21-22页 |
| ·激肽释放酶的纯化方法 | 第22-25页 |
| ·离子交换法 | 第22页 |
| ·疏水层析法 | 第22-23页 |
| ·亲和层析法 | 第23页 |
| ·反胶束萃取 | 第23-24页 |
| ·凝胶过滤 | 第24页 |
| ·其它纯化方法 | 第24-25页 |
| ·激肽释放酶联产工艺 | 第25-26页 |
| ·本文的研究方向以及研究意义 | 第26-28页 |
| 第二章 激肽释放酶检测方法 | 第28-34页 |
| ·材料 | 第28-29页 |
| ·蛋白电泳(SDS-PAGE)实验用溶液 | 第28页 |
| ·蛋白质浓度测定(Bradford法)溶液 | 第28-29页 |
| ·激肽释放酶活性测定溶液 | 第29页 |
| ·检测方法以及标准品检测结果 | 第29-34页 |
| ·蛋白质电泳(SDS-PAGE)检测 | 第29-30页 |
| ·蛋白质浓度测定—Bradford法 | 第30-32页 |
| ·激肽释放酶活性检测 | 第32-34页 |
| 第三章 猪胰激肽释放酶的纯化 | 第34-49页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·猪胰酶丙酮粗粉的制备 | 第35-36页 |
| ·盐析 | 第36-38页 |
| ·原理 | 第36页 |
| ·沉淀浓度范围的确定 | 第36-37页 |
| ·硫酸铵沉淀 | 第37-38页 |
| ·Sephadex G-75凝胶渗透色谱 | 第38-39页 |
| ·原理 | 第38页 |
| ·层析操作与结果 | 第38-39页 |
| ·疏水层析 | 第39-44页 |
| ·原理 | 第39-40页 |
| ·层析前准备 | 第40-41页 |
| ·层析操作 | 第41-43页 |
| ·Octyl-Sepharose CL-4B | 第41-42页 |
| ·Butyl-Sepharose 4FF疏水介质 | 第42-43页 |
| ·结论 | 第43-44页 |
| ·离子交换层析 | 第44-49页 |
| ·原理 | 第44页 |
| ·DEAE-Sepharose FF | 第44-47页 |
| ·透析浓缩 | 第44-45页 |
| ·层析操作与结果 | 第45-47页 |
| ·QAE-Sephadex | 第47-48页 |
| ·结论 | 第48-49页 |
| 第四章 牛胰激肽释放酶的纯化 | 第49-66页 |
| ·材料 | 第49-50页 |
| ·粗粉溶解液的制备及其效价检测 | 第50页 |
| ·凝胶渗透色谱法 | 第50-51页 |
| ·疏水层析 | 第51-55页 |
| ·Butyl-Sepharose 4FF | 第51-53页 |
| ·Octyi-Sepharose CL-4B | 第53-54页 |
| ·结论 | 第54-55页 |
| ·离了交换层析 | 第55-63页 |
| ·DEAE-Sepharose FF阴离子层析 | 第55-60页 |
| ·层析前准备 | 第55页 |
| ·透析 | 第55-56页 |
| ·层析操作以及结果 | 第56-57页 |
| ·穿透峰电泳检测结果 | 第57页 |
| ·pH值优化 | 第57-60页 |
| ·CM-Sepharose CL-6B阳离子层析 | 第60-63页 |
| ·层析前准备 | 第60页 |
| ·操作以及结果 | 第60-62页 |
| ·结论 | 第62-63页 |
| ·阳离子交换层析与疏水层析相结合 | 第63-66页 |
| ·层系操作及结果 | 第63-65页 |
| ·结论 | 第65-66页 |
| 第五章 总结与建议 | 第66-70页 |
| ·总结 | 第66-69页 |
| ·猪胰激肽释放酶纯化结果 | 第66-67页 |
| ·牛胰激肽释放酶纯化结果 | 第67-68页 |
| ·猪胰激肽释放酶以及牛胰激肽释放酶纯化电泳检测图 | 第68-69页 |
| ·建议 | 第69-70页 |
| 参考文献: | 第70-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
