摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
第一篇 文献综述 | 第10-30页 |
第一章 马链球菌兽疫亚种的研究进展 | 第10-18页 |
1 病原学 | 第10-11页 |
2 流行病学 | 第11页 |
3 毒力因子 | 第11-15页 |
·类M蛋白 | 第11-13页 |
·金属结合脂蛋白 | 第13页 |
·链激酶 | 第13页 |
·IgG结合蛋白 | 第13-14页 |
·纤维结合素结合蛋白 | 第14-15页 |
4 疫苗预防 | 第15页 |
参考文献 | 第15-18页 |
第二章 蛋白组学的概念和方法 | 第18-30页 |
1 蛋白质组学的概念 | 第18-20页 |
2 蛋白组学的研究方法 | 第20-22页 |
·双向电泳 | 第20-21页 |
·用于蛋白质定量和比较研究的质谱相关技术 | 第21-22页 |
·SELDI蛋白质芯片技术 | 第22页 |
3 蛋白质组学在微生物研究中的应用 | 第22-26页 |
·免疫蛋白组学 | 第23-25页 |
·差异蛋白组学 | 第25-26页 |
4 局限和展望 | 第26-28页 |
·蛋白样品制备效率偏低 | 第26页 |
·极酸性或极碱性蛋白质的分离 | 第26-27页 |
·分子量极大(>200 kDa)或分子量极小(<10 kDa)的蛋白质的分离 | 第27页 |
·难溶性蛋白质及其疏水性蛋白质的检测 | 第27页 |
·展望 | 第27-28页 |
参考文献 | 第28-30页 |
第二篇 试验研究 | 第30-77页 |
第一章 马链球菌兽疫亚种ATCC35246株胞外蛋白 #21免疫蛋白组学研究 | 第30-44页 |
1. 材料与方法 | 第31-34页 |
·菌株与培养条件 | 第31页 |
·TCA-丙酮法提取胞外蛋白 | 第31页 |
·康复血清的准备 | 第31-32页 |
·二维电泳 | 第32-33页 |
·免疫印迹 | 第33-34页 |
·免疫原性蛋的鉴定以及MALDI-TOF/TOF-MS分析 | 第34页 |
·生物信息学分析 | 第34页 |
2. 结果 | 第34-35页 |
·ATCC352436株的胞外蛋白电泳图谱 | 第34页 |
·免疫原性蛋白的质谱分析以及生物信息学分析 | 第34-35页 |
3. 讨论 | 第35-40页 |
参考文献 | 第40-44页 |
第二章 马链球菌兽疫亚种ATCC35246株膜相关蛋白的免疫蛋白组学研究 | 第44-58页 |
1. 材料与方法 | 第44-47页 |
·菌株及培养条件 | 第44-45页 |
·Triton X-114法制备ATCC35246的膜相关蛋白 | 第45页 |
·免疫血清的制备 | 第45页 |
·二维电泳 | 第45-46页 |
·Western blotting | 第46页 |
· | 第46页 |
·生物信息学分析 | 第46-47页 |
2. 结果 | 第47页 |
·ATCC35246膜相关蛋白的二维电泳图谱 | 第47页 |
·免疫原性蛋白的鉴定以及PMF分析 | 第47页 |
·生物信息学分析 | 第47页 |
3. 讨论 | 第47-53页 |
·毒力相关蛋白 | 第47-49页 |
·功能未知的蛋白 | 第49-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
第三章 马链球菌兽疫亚种ATCC35246胞壁相关蛋白的免疫蛋白组学研究 | 第58-68页 |
1. 材料与方法 | 第59-61页 |
·菌株及培养条件 | 第59页 |
·变溶菌素法制备ATCC35246的胞壁相关蛋白 | 第59页 |
·免疫血清的制备 | 第59页 |
·二维电泳 | 第59-60页 |
·Western blotting | 第60页 |
·免疫原性蛋的鉴定以及肽指纹图谱(PMF)分析 | 第60-61页 |
·生物信息学分析 | 第61页 |
2. 结果 | 第61页 |
·二维电泳图谱 | 第61页 |
·免疫原性蛋白的鉴定以及PMF分析 | 第61页 |
·生物信息学分析 | 第61页 |
3. 讨论 | 第61-66页 |
参考文献 | 第66-68页 |
第四章 马链球菌兽疫亚种部分新鉴定免疫原在猪源链球菌中的分布特征 | 第68-77页 |
1 材料与方法 | 第68-70页 |
·菌株 | 第68页 |
·主要试剂 | 第68-69页 |
·DNA模板制备 | 第69页 |
·PCR检测蛋白对应基因在菌株中的分布 | 第69-70页 |
2 结果 | 第70-73页 |
·梯度PCR优化引物退火温度 | 第70-72页 |
·PCR结果 | 第72-73页 |
3 讨论 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-77页 |
全文总结 | 第77-78页 |
附录1:部分质谱分析图谱 | 第78-81页 |
附录2:溶液的配制 | 第81-84页 |
致谢 | 第84-86页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第86页 |