| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 引言 | 第9-11页 |
| 2 材料和方法 | 第11-24页 |
| ·试验材料 | 第11-13页 |
| ·菌株、质粒和玉米品种 | 第11页 |
| ·主要试剂 | 第11页 |
| ·供试培养基及试剂配制 | 第11-12页 |
| ·主要仪器 | 第12页 |
| ·引物序列 | 第12-13页 |
| ·基因组DNA 及总RNA 的获得 | 第13-15页 |
| ·玉米大斑病菌基因组DNA 的提取 | 第13-14页 |
| ·玉米大斑病菌总RNA 提取 | 第14页 |
| ·反转录体系及第一链cDNA 的合成 | 第14-15页 |
| ·玉米大斑病菌STPKS 基因的克隆 | 第15-19页 |
| ·模板DNA 的制备和引物的设计 | 第15页 |
| ·Genome walking PCR 扩增 | 第15-16页 |
| ·基因的拼接 | 第16页 |
| ·StPKS 基因DNA 和cDNA 全长的获得 | 第16页 |
| ·DNA 片段的纯化 | 第16-17页 |
| ·PCR 产物与pMD18-T 载体的连接 | 第17页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第17页 |
| ·连接产物转化感受态细胞 | 第17-18页 |
| ·PCR 验证阳性克隆 | 第18页 |
| ·碱裂解法小量提取质粒 | 第18页 |
| ·质粒样本测序分析 | 第18-19页 |
| ·基因的拷贝数分析 | 第19-20页 |
| ·探针制备 | 第19页 |
| ·酶切 | 第19页 |
| ·转膜 | 第19页 |
| ·杂交 | 第19-20页 |
| ·免疫检测 | 第20页 |
| ·STPKS 基因的功能分析 | 第20页 |
| ·生物信息学方法分析、预测StPKS 基因的结构和功能 | 第20页 |
| ·玉米大斑病菌对潮霉素敏感性实验 | 第20页 |
| ·STPKS 基因的同源重组 | 第20-24页 |
| ·StPKS 同源重组载体的构建 | 第20-22页 |
| ·StPKS 同源重组载体转化玉米大斑病菌原生质体 | 第22-23页 |
| ·转化子验证及分析 | 第23-24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-47页 |
| ·基因组DNA 的提取 | 第24页 |
| ·STPKS 基因的获得 | 第24-27页 |
| ·StPKS 基因上游片段的获得 | 第24页 |
| ·基因全序列的获得 | 第24-27页 |
| ·玉米大斑病菌StPKS 基因全长DNA 和cDNA 扩增 | 第27-28页 |
| ·StPKS 基因生物信息学分析 | 第28-39页 |
| ·产物的纯化、克隆、测序和生物信息学分析 | 第28-30页 |
| ·StPKS 基因的结构分析 | 第30-37页 |
| ·StPKS 基因启动子区分析 | 第37页 |
| ·StPKS 基因的信号肽预测 | 第37-38页 |
| ·StPKS 基因跨膜结构域的预测 | 第38-39页 |
| ·StPKS 的三级结构分析 | 第39页 |
| ·STPKS 基因拷贝数分析 | 第39-41页 |
| ·StPKS 基因探针的制备 | 第39-40页 |
| ·Southern 杂交 | 第40页 |
| ·玉米大斑病菌对潮霉素敏感性试验 | 第40-41页 |
| ·STPKS 的同源重组 | 第41-47页 |
| ·StPKS 基因同源重组载体构建 | 第41-43页 |
| ·StPKS 基因同源重组载体转化 | 第43-44页 |
| ·StPKS 基因同源重组转化子筛选 | 第44页 |
| ·Southern 杂交鉴定 | 第44-45页 |
| ·突变体性状观察 | 第45-46页 |
| ·突变体显微观察 | 第46页 |
| ·突变体致病力检测 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-49页 |
| ·获得基因侧翼序列的技术 | 第47页 |
| ·STPKS 的结构域及功能预测 | 第47-48页 |
| ·STPKS 基因功能的研究 | 第48-49页 |
| 5 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第55-56页 |
| 作者简历 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
