致谢 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
1 文献综述 | 第11-23页 |
·植物病原原核生物分类系统以及分类现状 | 第11-13页 |
·植物病原原核生物分类系统的发展 | 第11页 |
·植物病原细菌的现行分类系统 | 第11-12页 |
·植物病原细菌的分类依据的发展变化 | 第12-13页 |
·植物病原假单胞菌的分布以及分类研究 | 第13-14页 |
·植物病原假单胞菌的分布 | 第13页 |
·植物病原假单胞菌的分类研究 | 第13-14页 |
·植物病原丁香假单胞菌Pseudomonas syringae的主要成员及其分组 | 第14-18页 |
·植物病原丁香假单胞菌Pseudomonas syringae的主要成员 | 第14-17页 |
·植物病原丁香假单胞菌Pseudomonas syringae的分组 | 第17-18页 |
·植物病原细菌鉴定方法 | 第18-23页 |
·常规鉴定方法 | 第18-20页 |
·表型分析鉴定 | 第18-19页 |
·细菌学测定 | 第19页 |
·依据烟草过敏性反应鉴定致病性 | 第19-20页 |
·基于不同代谢产物的理化鉴定 | 第20页 |
·分子生物学鉴定方法 | 第20-23页 |
·基于细菌基因组序列的分子鉴定方法 | 第20-21页 |
·基于保守基因序列的分子鉴定方法 | 第21-22页 |
·基于特定致病基因以及致病相关基因的PCR鉴定技术 | 第22-23页 |
2 引言 | 第23-24页 |
3 材料与方法 | 第24-33页 |
·丁香假单胞菌致病变种的分子鉴定 | 第24-29页 |
·材料 | 第24-25页 |
·试验所用的培养基及试剂 | 第24页 |
·供试菌株 | 第24-25页 |
·酶、主要试剂以及主要实验仪器设备 | 第25页 |
·试验方法 | 第25-29页 |
·模板DNA的制备 | 第25页 |
·基于16S rDNA基因的分子鉴定 | 第25-27页 |
·基于16S rDNA-23S rDNA转录间隔区(ITS)序列的分子鉴定 | 第27-28页 |
·基于hrpZ基因的分子鉴定 | 第28-29页 |
·基于tabA基因的分子鉴定 | 第29页 |
·基于hrpZ基因的PCR灵敏性测定 | 第29页 |
·丁香假单胞菌致病变种的生理生化鉴定 | 第29-32页 |
·材料 | 第30页 |
·培养基 | 第30页 |
·供试菌株 | 第30页 |
·试验方法 | 第30-32页 |
·细菌的形态及培养性状 | 第30页 |
·革兰氏测定 | 第30页 |
·致病性测定 | 第30页 |
·LOPAT试验 | 第30-31页 |
·GATTa试验 | 第31-32页 |
·丁香假单胞菌致病变种的分子鉴定技术的应用——豫西烟草细菌性叶斑病的分离与鉴定 | 第32-33页 |
·病原物的分离 | 第32页 |
·组织分离法 | 第32页 |
·研磨稀释分离法 | 第32页 |
·PBS摇菌分离法 | 第32页 |
·细菌的形态及培养性状 | 第32页 |
·革兰氏反应 | 第32页 |
·病原物的致病性测定 | 第32页 |
·基于hrpZ的分子鉴定 | 第32页 |
·基于tabA基因的分子鉴定 | 第32页 |
·常规生理生化鉴定验证 | 第32-33页 |
·LOPAT试验 | 第32页 |
·GATTa试验 | 第32-33页 |
4 结果与分析 | 第33-48页 |
·丁香假单胞菌致病变种的分子鉴定结果 | 第33-44页 |
·基于16S rDNA基因的分子鉴定结果 | 第33-37页 |
·16S rDNA基因的PCR扩增结果 | 第33页 |
·重组质粒DNA的检测以及插入片段的PCR验证 | 第33-35页 |
·测序与序列分析结果 | 第35-37页 |
·基于16S rDNA-23S rDNA转录间隔区ITS序列的分子鉴定 | 第37-39页 |
·ITS序列的PCR扩增结果 | 第37页 |
·ITS序列的PCR-RFLP结果 | 第37-39页 |
·基于hrpZ基因的分子鉴定结果 | 第39-44页 |
·引物对HrpABF/HrpABD分子鉴定结果 | 第39页 |
·引物对HrpZ08F/HrpZ08R1分子鉴定结果 | 第39-40页 |
·引物对HrpZ09UP/HrpZ09DW分子鉴定结果 | 第40-41页 |
·引物对HrpZ359/HrpZ1115分子鉴定结果 | 第41页 |
·4对HrpZ基因引物的鉴定结果分析 | 第41-42页 |
·基于tabA基因的分子鉴定结果 | 第42-43页 |
·基于hrpZ基因的PCR灵敏性鉴定 | 第43-44页 |
·丁香假单胞菌致病变种的生理生化鉴定结果 | 第44-45页 |
·细菌的形态及培养性状结果 | 第44-45页 |
·革兰氏测定结果 | 第45页 |
·致病性测定结果 | 第45页 |
·LOPAT试验结果 | 第45页 |
·GATTa试验结果 | 第45页 |
·丁香假单胞菌致病变种分子鉴定以及生理生化鉴定结果的分析 | 第45页 |
·丁香假单胞菌致病变种分子鉴定技术的应用——豫西烟草细菌性叶斑病的分离与鉴定结果 | 第45-47页 |
·细菌的形态及培养性状结果 | 第45-46页 |
·革兰氏反应 | 第46页 |
·致病性测定 | 第46页 |
·基于hrpZ基因的鉴定结果 | 第46-47页 |
·基于tabA基因的分子鉴定结果 | 第47页 |
·常规生理生化鉴定验证结果 | 第47页 |
·LOPAT试验结果 | 第47页 |
·-GATTa试验结果 | 第47页 |
·豫西烟草细菌性叶斑病的分离与鉴定结果 | 第47-48页 |
5 结论与讨论 | 第48-51页 |
·结论 | 第48-49页 |
·序列高度保守的16S rDNA及16-23S rDNA ITS不适于致病变种的分子鉴定 | 第48页 |
·hrpZ基因因其致病变种间的序列多态性及致病变种内的高度保守性而成为致病变种分子鉴定的理想指标 | 第48-49页 |
·分子鉴定体结果与常规细菌学鉴定不相矛盾 | 第49页 |
·毒素编码基因也是鉴别致病变种的重要分子指标之一 | 第49页 |
·讨论 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
ABSTRACT | 第58-60页 |