| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-11页 |
| 引言 | 第11-14页 |
| 第一部分 冬凌草甲素激活细胞内Nrf2通路的研究 | 第14-40页 |
| ·前言 | 第14-15页 |
| ·材料 | 第15-22页 |
| ·菌株和表达载体 | 第15-16页 |
| ·质粒提取扩增主要试剂 | 第16-17页 |
| ·细胞系及细胞培养的试剂 | 第17-18页 |
| ·转染真核细胞所需试剂 | 第18-19页 |
| ·荧光素酶报告基因检测试剂盒 | 第19页 |
| ·SDS-PAGE | 第19-20页 |
| ·蛋白质免疫印迹 | 第20-21页 |
| ·活性氧检测试剂盒 | 第21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| ·方法 | 第22-31页 |
| ·pGL4.22-ARE-TATA-luciferrase的扩增 | 第22页 |
| ·制备DH5a宿主菌感受态细胞 | 第22页 |
| ·细胞的转化 | 第22-23页 |
| ·质粒扩增和提取 | 第23-24页 |
| ·细胞培养 | 第24页 |
| ·真核细胞转染 | 第24-25页 |
| ·荧光素酶报告基因检测 | 第25页 |
| ·免疫印迹 | 第25-28页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第28-29页 |
| ·逆转录cDNA | 第29-30页 |
| ·Real Time PCR | 第30页 |
| ·流式细胞仪检测细胞内活性氧 | 第30-31页 |
| ·荧光显微镜检测 | 第31页 |
| ·结果 | 第31-35页 |
| ·ARE荧光素酶报告基因检测结果 | 第31-32页 |
| ·免疫印迹检测Nrf2表达结果 | 第32-33页 |
| ·Real Time PCR检测Nrf2下游基因转录水平结果 | 第33-34页 |
| ·流式检测细胞内活性氧水平结果 | 第34页 |
| ·荧光显微镜检测细胞内活性氧结果 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-38页 |
| 参考文献 | 第38-40页 |
| 第二部分 冬凌草甲素抗氧化损伤的Nrf2的依赖性研究 | 第40-55页 |
| ·前言 | 第40-41页 |
| ·材料 | 第41-44页 |
| ·菌株和表达载体 | 第41页 |
| ·质粒提取扩增增主要试剂 | 第41-42页 |
| ·细胞系及细胞培养的试剂 | 第42-43页 |
| ·稳定细胞系建立所需试剂 | 第43页 |
| ·SDS-PAGE | 第43页 |
| ·蛋白质免疫印迹 | 第43页 |
| ·活性氧检测试剂盒(Reactive Oxygen Species Assay Kit) | 第43页 |
| ·主要仪器 | 第43-44页 |
| ·方法 | 第44-46页 |
| ·pRS-shRNA-Nrf2(725、726、727)与pRS-origene(724)的扩增 | 第44页 |
| ·制备DH5a宿主菌感受态细胞 | 第44页 |
| ·细胞的转化 | 第44页 |
| ·质粒扩增和提取 | 第44页 |
| ·细胞培养 | 第44页 |
| ·稳定细胞系的建立 | 第44-45页 |
| ·免疫印迹检测(Immunoblotting) | 第45-46页 |
| ·流式细胞仪检测细胞内活性氧 | 第46页 |
| ·细胞上清AST水平的检测 | 第46页 |
| ·结果 | 第46-51页 |
| ·沉默细胞株鉴定结果 | 第46-48页 |
| ·流式细胞仪检测Nrf2沉默及表正常细胞株氧自由基水平结果 | 第48-49页 |
| ·细胞培养上清中AST水平检测结果 | 第49-51页 |
| ·讨论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 综述 | 第56-66页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| 附录 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 在读期间发表的学术论文与研究成果 | 第68页 |
