致谢 | 第1-6页 |
英文缩写词 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
ABSTRACT | 第8-13页 |
第一章 前言 | 第13-25页 |
·MEF2基因家族 | 第13-21页 |
·MEF2基因家族简介 | 第13-15页 |
·MEF2基因与肌肉发生 | 第15-16页 |
·MEF2基因家族研究进展 | 第16-21页 |
·MEF2基因的表达调控 | 第16页 |
·MEF2基因的活性调控 | 第16-19页 |
·钙调素-钙调磷酸酶通路 | 第17页 |
·TGF-β-Smad通路 | 第17-18页 |
·MEF2的结合蛋白 | 第18-19页 |
·MEF2的靶基因 | 第19-21页 |
·猪基因定位的研究进展 | 第21-24页 |
·体细胞杂交法 | 第21页 |
·原位杂交法 | 第21-22页 |
·遗传连锁分析法 | 第22页 |
·染色体重组定位法 | 第22页 |
·荧光原位杂交 | 第22-23页 |
·放射杂交体法(radiation hybrid,RH) | 第23页 |
·重叠群拼接(contig assembly)和染色体步移(chromosome walking) | 第23-24页 |
·基因定位克隆(positional cloning) | 第24页 |
·本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
第二章 猪MEF2C和MEF2D基因的染色体定位 | 第25-38页 |
·试验材料 | 第25-28页 |
·实验动物 | 第25页 |
·试验试剂 | 第25-26页 |
·基因组DNA提取试剂 | 第25页 |
·PCR试剂 | 第25-26页 |
·溶液的配制 | 第26页 |
·琼脂糖凝胶的制备 | 第26-27页 |
·定位引物 | 第27页 |
·试验仪器 | 第27-28页 |
·试验方法 | 第28-31页 |
·基因组DNA的抽提 | 第28-29页 |
·基因组DNA的检测 | 第29页 |
·琼脂糖凝胶的制备 | 第29页 |
·PCR引物设计 | 第29-30页 |
·引物溶解、稀释 | 第30页 |
·PCR反应条件优化 | 第30页 |
·PCR反应体系 | 第30-31页 |
·琼脂糖电泳检测分析 | 第31页 |
·试验结果 | 第31-35页 |
·利用RH panel对MEF2C在染色体上定位 | 第31-33页 |
·利用RH panel对MEF2D在染色体上定位 | 第33-35页 |
·讨论 | 第35-38页 |
第三章 MEF2C基因在猪心脏和骨骼肌发育中的表达差异 | 第38-66页 |
·实验材料 | 第38页 |
·动物材料 | 第38页 |
·试剂 | 第38页 |
·实验方法 | 第38-42页 |
·RNA的提取 | 第38-39页 |
·反转录 | 第39页 |
·PCR引物设计 | 第39页 |
·退火温度(Tm)的确定 | 第39-40页 |
·循环数的确定 | 第40-41页 |
·最佳Mg~(2+)浓度的确定 | 第41页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第41-42页 |
·半定量RT-PCR分析 | 第42页 |
·试验结果 | 第42-59页 |
·RNA提取检测 | 第42-43页 |
·T_m对MEF2C基因扩增的影响 | 第43-46页 |
·Tm对MEF2C基因在心脏中扩增的影响 | 第43-45页 |
·Tm对MEF2C基因在背最长肌中扩增的影响 | 第45-46页 |
·循环数对MEF2C基因扩增的影响 | 第46-49页 |
·循环数对MEF2C基因在心脏中扩增的影响 | 第47-48页 |
·循环数对MEF2C基因在背最长肌中扩增的影响 | 第48-49页 |
·Mg~(2+)浓度对MEF2C基因扩增的影响 | 第49-52页 |
·Mg~(2+)浓度对MEF2C基因在心脏中扩增的影响 | 第50-51页 |
·Mg~(2+)浓度对MEF2C基因在背最长肌中扩增的影响 | 第51-52页 |
·MEF2C在猪心脏和背最长肌不同发育阶段中的表达差异 | 第52-59页 |
·MEF2C不同转录本在猪心脏不同发育阶段中的表达差异 | 第53-54页 |
·MEF2C不同转录本在猪背最长肌不同发育阶段中的表达差异 | 第54-55页 |
·去势对MEF2C在猪心脏不同发育阶段中表达的影响 | 第55-56页 |
·去势对MEF2C在猪背最长肌不同发育阶段中表达的影响 | 第56-59页 |
·讨论 | 第59-66页 |
·RT-PCR方法的构建 | 第59-60页 |
·试验动物的选取 | 第60-61页 |
·MEF2C在不同日龄猪心脏中表达的差异 | 第61-63页 |
·MEF2C在不同日龄猪背最长肌中表达的差异 | 第63页 |
·去势处理对MEF2C在猪心脏不同发育阶段中表达的影响 | 第63-65页 |
·去势对MEF2C在猪背最长肌不同发育阶段中表达的影响 | 第65-66页 |
第四章 小结 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-71页 |