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猪MEF2C和MEF2D基因定位及MEF2C基因的表达研究

致谢第1-6页
英文缩写词第6-7页
摘要第7-8页
ABSTRACT第8-13页
第一章 前言第13-25页
   ·MEF2基因家族第13-21页
     ·MEF2基因家族简介第13-15页
     ·MEF2基因与肌肉发生第15-16页
     ·MEF2基因家族研究进展第16-21页
       ·MEF2基因的表达调控第16页
       ·MEF2基因的活性调控第16-19页
         ·钙调素-钙调磷酸酶通路第17页
         ·TGF-β-Smad通路第17-18页
         ·MEF2的结合蛋白第18-19页
       ·MEF2的靶基因第19-21页
   ·猪基因定位的研究进展第21-24页
     ·体细胞杂交法第21页
     ·原位杂交法第21-22页
     ·遗传连锁分析法第22页
     ·染色体重组定位法第22页
     ·荧光原位杂交第22-23页
     ·放射杂交体法(radiation hybrid,RH)第23页
     ·重叠群拼接(contig assembly)和染色体步移(chromosome walking)第23-24页
     ·基因定位克隆(positional cloning)第24页
   ·本研究的目的和意义第24-25页
第二章 猪MEF2C和MEF2D基因的染色体定位第25-38页
   ·试验材料第25-28页
     ·实验动物第25页
     ·试验试剂第25-26页
       ·基因组DNA提取试剂第25页
       ·PCR试剂第25-26页
     ·溶液的配制第26页
     ·琼脂糖凝胶的制备第26-27页
     ·定位引物第27页
     ·试验仪器第27-28页
   ·试验方法第28-31页
     ·基因组DNA的抽提第28-29页
     ·基因组DNA的检测第29页
     ·琼脂糖凝胶的制备第29页
     ·PCR引物设计第29-30页
     ·引物溶解、稀释第30页
     ·PCR反应条件优化第30页
     ·PCR反应体系第30-31页
     ·琼脂糖电泳检测分析第31页
   ·试验结果第31-35页
     ·利用RH panel对MEF2C在染色体上定位第31-33页
     ·利用RH panel对MEF2D在染色体上定位第33-35页
   ·讨论第35-38页
第三章 MEF2C基因在猪心脏和骨骼肌发育中的表达差异第38-66页
   ·实验材料第38页
     ·动物材料第38页
     ·试剂第38页
   ·实验方法第38-42页
     ·RNA的提取第38-39页
     ·反转录第39页
     ·PCR引物设计第39页
     ·退火温度(Tm)的确定第39-40页
     ·循环数的确定第40-41页
     ·最佳Mg~(2+)浓度的确定第41页
     ·琼脂糖凝胶电泳第41-42页
     ·半定量RT-PCR分析第42页
   ·试验结果第42-59页
     ·RNA提取检测第42-43页
     ·T_m对MEF2C基因扩增的影响第43-46页
       ·Tm对MEF2C基因在心脏中扩增的影响第43-45页
       ·Tm对MEF2C基因在背最长肌中扩增的影响第45-46页
     ·循环数对MEF2C基因扩增的影响第46-49页
       ·循环数对MEF2C基因在心脏中扩增的影响第47-48页
       ·循环数对MEF2C基因在背最长肌中扩增的影响第48-49页
     ·Mg~(2+)浓度对MEF2C基因扩增的影响第49-52页
       ·Mg~(2+)浓度对MEF2C基因在心脏中扩增的影响第50-51页
       ·Mg~(2+)浓度对MEF2C基因在背最长肌中扩增的影响第51-52页
     ·MEF2C在猪心脏和背最长肌不同发育阶段中的表达差异第52-59页
       ·MEF2C不同转录本在猪心脏不同发育阶段中的表达差异第53-54页
       ·MEF2C不同转录本在猪背最长肌不同发育阶段中的表达差异第54-55页
       ·去势对MEF2C在猪心脏不同发育阶段中表达的影响第55-56页
       ·去势对MEF2C在猪背最长肌不同发育阶段中表达的影响第56-59页
   ·讨论第59-66页
     ·RT-PCR方法的构建第59-60页
     ·试验动物的选取第60-61页
     ·MEF2C在不同日龄猪心脏中表达的差异第61-63页
     ·MEF2C在不同日龄猪背最长肌中表达的差异第63页
     ·去势处理对MEF2C在猪心脏不同发育阶段中表达的影响第63-65页
     ·去势对MEF2C在猪背最长肌不同发育阶段中表达的影响第65-66页
第四章 小结第66-67页
参考文献第67-71页

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