| 中文摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第1章 前言 | 第10-38页 |
| ·苏云金芽孢杆菌概述 | 第10-17页 |
| ·Bt 研究历史 | 第10-11页 |
| ·Bt 杀虫活性物质 | 第11-14页 |
| ·Bt 的应用 | 第14-15页 |
| ·Bt 在应用中遗传改良研究概况 | 第15-17页 |
| ·杀虫晶体蛋白研究概述 | 第17-32页 |
| ·ICPs 基因的定位 | 第17-18页 |
| ·ICPs 基因的分类 | 第18-19页 |
| ·ICPs 的结构 | 第19-22页 |
| ·ICPs 结构与功能的关系 | 第22-28页 |
| ·ICPs 杀虫作用机理 | 第28-32页 |
| ·蛋白转导结构域研究概述 | 第32-37页 |
| ·PTD 种类 | 第32-33页 |
| ·PTD 蛋白的研究概述 | 第33-34页 |
| ·PTD 蛋白的内化机制 | 第34-36页 |
| ·PTD 的应用 | 第36-37页 |
| ·本实验研究的目的意义 | 第37-38页 |
| 第2章 材料与方法 | 第38-51页 |
| ·实验材料 | 第38-43页 |
| ·菌株与质粒 | 第38页 |
| ·供试小菜蛾 | 第38-39页 |
| ·目的片段扩增所需引物 | 第39页 |
| ·培养基和抗生素 | 第39页 |
| ·酶和试剂 | 第39-42页 |
| ·主要仪器设备 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-51页 |
| ·苏云金芽孢杆菌含cry1Ac 基因的质粒提取 | 第43页 |
| ·cry1Ac 结构域基因的PCR 扩增 | 第43-44页 |
| ·PCR 产物凝胶电泳及胶回收 | 第44页 |
| ·提取pET-216 质粒 | 第44-45页 |
| ·pET-216 载体及目的片段PCR 胶回收产物双酶切 | 第45页 |
| ·目的片段与载体的连接 | 第45页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞制备 | 第45-46页 |
| ·连接产物转化 | 第46页 |
| ·阳性重组子的筛选与鉴定 | 第46页 |
| ·融合基因在大肠杆菌BL21(DE3)中的诱导表达条件的优化 | 第46-47页 |
| ·蛋白表达SDS-PAGE 检测 | 第47-48页 |
| ·蛋白表达形式的检测 | 第48页 |
| ·融合蛋白纯化 | 第48-49页 |
| ·融合蛋白浓度测定 | 第49-50页 |
| ·融合蛋白的生物活性测定 | 第50-51页 |
| 第3章 结果与分析 | 第51-78页 |
| ·融合表达载体构建 | 第51-61页 |
| ·pET1Ac 融合表达载体构建 | 第51-56页 |
| ·pETT1Ac 融合表达载体构建 | 第56-61页 |
| ·融合蛋白诱导表达条件的优化 | 第61-66页 |
| ·IPTG 诱导浓度的优化 | 第61-62页 |
| ·IPTG 诱导时间的优化 | 第62-64页 |
| ·IPTG 诱导温度的优化 | 第64-66页 |
| ·融合蛋白表达形式的SDS-PAGE 验证 | 第66-74页 |
| ·pET1Ac 融合蛋白表达形式的鉴定 | 第66-70页 |
| ·pETT1Ac 融合蛋白表达形式的鉴定 | 第70-74页 |
| ·融合蛋白纯化 | 第74-75页 |
| ·融合蛋白浓度测定 | 第75-76页 |
| ·融合蛋白生物活性测定 | 第76-78页 |
| 第4章 讨论 | 第78-81页 |
| ·原核表达系统的选择 | 第78-79页 |
| ·蛋白表达的影响因素 | 第79页 |
| ·蛋白质生物活性测定的影响因素 | 第79-81页 |
| 结论 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-95页 |
| 附录 | 第95-98页 |
| 致谢 | 第98页 |