| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-12页 |
| 1 绪论 | 第12-26页 |
| ·问题的提出与研究意义 | 第12-14页 |
| ·问题的提出 | 第12-13页 |
| ·研究的意义 | 第13-14页 |
| ·国内外研究现状 | 第14-22页 |
| ·前交叉韧带的结构、功能 | 第14页 |
| ·ACL 损伤机理 | 第14-15页 |
| ·基质金属蛋白酶对组织损伤及修复的研究 | 第15-17页 |
| ·低氧对组织损伤与修复的研究 | 第17-19页 |
| ·机械应力在组织损伤与修复中的研究及应用 | 第19-22页 |
| ·本文的研究目的和研究内容 | 第22-26页 |
| ·研究目的 | 第22页 |
| ·研究内容 | 第22-23页 |
| ·创新点 | 第23-26页 |
| 2 动物前交叉韧带损伤后关节腔微环境的变化 | 第26-46页 |
| ·引言 | 第26页 |
| ·实验材料与试剂 | 第26-29页 |
| ·主要实验仪器及耗材 | 第26-27页 |
| ·仪器 | 第27-28页 |
| ·主要试剂的配制 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-31页 |
| ·SD 大鼠 ACL 损伤模型的建立 | 第29页 |
| ·关节腔内组织提取 | 第29-30页 |
| ·明胶酶谱 | 第30-31页 |
| ·整体 MMPs 活性测定 | 第31页 |
| ·数据分析 | 第31页 |
| ·实验结果 | 第31-42页 |
| ·实验装置设计 | 第31-32页 |
| ·动物 ACL 损伤模型的建立 | 第32-33页 |
| ·ACL 损伤后关节液中炎症因子 TNF-α,IL-1β 和 IL-6 的表达增加 | 第33-34页 |
| ·ACL 损伤后关节液中 MMP-2 及整体 MMP 家族活性的表达变化 | 第34-35页 |
| ·ACL 损伤后,ACL 组织以及上清液中 MMP-2 的活性的表达变化 | 第35-36页 |
| ·关节腔内其它组织以及上清液中 MMP-2 活性的表达 | 第36-42页 |
| ·分析与讨论 | 第42-44页 |
| ·本章小结 | 第44-46页 |
| 3 机械应力作用下炎症因子对滑膜成纤维细胞 MMP-2 活性的影响 | 第46-60页 |
| ·引言 | 第46页 |
| ·实验材料与试剂 | 第46-48页 |
| ·主要实验仪器及耗材 | 第46-47页 |
| ·仪器 | 第47-48页 |
| ·实验方法 | 第48-49页 |
| ·细胞培养 | 第48页 |
| ·体外力学加载及炎症因子刺激 | 第48-49页 |
| ·炎症因子处理 | 第49页 |
| ·明胶酶谱 | 第49页 |
| ·整体 MMPs 活性测定 | 第49页 |
| ·数据分析 | 第49页 |
| ·实验结果 | 第49-57页 |
| ·机械压应力对滑膜成纤维细胞 MMP-2 活性表达的影响 | 第49-50页 |
| ·TNF-α 和 IL-1α 对滑膜成纤维细胞 MMP-2 的活性表达的影响 | 第50-54页 |
| ·机械损伤压应力与炎症因子对滑膜成纤维细胞 MMP-2 的活性的影响 | 第54-56页 |
| ·机械损伤压应力与炎症因子对滑膜细胞整体 MMPs 家族活性的影响 | 第56-57页 |
| ·分析与讨论 | 第57-58页 |
| ·本章小结 | 第58-60页 |
| 4 机械应力条件下 TNF-α 与 IL-1β 对 ACL 成纤维细胞 MMP-2 表达的影响 | 第60-76页 |
| ·引言 | 第60页 |
| ·实验材料与试剂 | 第60-63页 |
| ·主要实验仪器及耗材 | 第60-61页 |
| ·仪器 | 第61-62页 |
| ·主要试剂配制 | 第62-63页 |
| ·实验方法 | 第63-65页 |
| ·细胞培养 | 第63页 |
| ·体外力学加载及炎症因子刺激 | 第63页 |
| ·炎症因子处理 | 第63页 |
| ·明胶酶谱 | 第63页 |
| ·Western Blot | 第63-65页 |
| ·数据分析 | 第65页 |
| ·实验结果 | 第65-72页 |
| ·IL-1β 与 TNF-α 对 ACL 成纤维细胞 MMP-2 的活性表达的影响 | 第65-68页 |
| ·机械损伤拉伸与炎症因子对 ACL 成纤维细胞 MMP-2 表达的影响 | 第68-72页 |
| ·分析与讨论 | 第72-73页 |
| ·本章小结 | 第73-76页 |
| 5 机械应力条件下低氧对 ACL 成纤维细胞 MMP-2、HIF-1α、VEGF和 CTGF 表达的影响 | 第76-94页 |
| ·引言 | 第76页 |
| ·材料与仪器 | 第76-78页 |
| ·实验材料与试剂 | 第76-78页 |
| ·仪器 | 第78页 |
| ·实验方法 | 第78-81页 |
| ·细胞培养 | 第78页 |
| ·体外力学加载与氯化钴处理 | 第78-79页 |
| ·MTT 检测细胞活力 | 第79页 |
| ·Hoechst 33258 染色 | 第79页 |
| ·流式细胞术分析 | 第79页 |
| ·明胶酶谱 | 第79页 |
| ·RNA 的提取和反转录 | 第79-80页 |
| ·实时荧光定量 RT-PCR 检测 | 第80-81页 |
| ·数据分析 | 第81页 |
| ·实验结果 | 第81-90页 |
| ·不同浓度的氯化钴对细胞活力的影响 | 第81-82页 |
| ·氯化钴对细胞凋亡的影响 | 第82-83页 |
| ·氯化钴对 HIF-1α 表达的影响 | 第83-84页 |
| ·氯化钴化学模拟低氧与机械拉伸对 ACL 成纤维细胞 HIF-1α 表达的影响 | 第84-85页 |
| ·氯化钴化学模拟低氧与机械拉伸对 ACL 成纤维细胞 VEGF 表达的影响 | 第85-86页 |
| ·氯化钴化学模拟低氧与机械拉伸对 ACL 成纤维细胞 CTGF 表达的影响 | 第86-88页 |
| ·氯化钴化学模拟低氧与机械拉伸对 ACL 成纤维细胞 MMP-2 表达的影响 | 第88-90页 |
| ·分析与讨论 | 第90-91页 |
| ·本章小结 | 第91-94页 |
| 6 NF-κB 信号通路介导 ACL 成纤维细胞 MMP-2 的表达 | 第94-102页 |
| ·引言 | 第94页 |
| ·材料与仪器 | 第94-96页 |
| ·实验材料与试剂 | 第94-95页 |
| ·仪器 | 第95-96页 |
| ·实验方法 | 第96-97页 |
| ·细胞培养 | 第96页 |
| ·体外力学加载及炎症因子刺激 | 第96页 |
| ·氯化钴处理 | 第96-97页 |
| ·明胶酶谱 | 第97页 |
| ·数据分析 | 第97页 |
| ·实验结果 | 第97-99页 |
| ·MAPK 信号通路抑制剂对机械应力诱导 MMP-2 活性的影响 | 第97-98页 |
| ·NF-κB 信号通路抑制剂能显著降低机械应力诱导的 MMP-2 的表达 | 第98页 |
| ·在体外模拟关节腔微环境条件下,Bay-11 抑制 MMP-2 的表达 | 第98-99页 |
| ·讨论与分析 | 第99-101页 |
| ·本章小结 | 第101-102页 |
| 7 结论与展望 | 第102-106页 |
| ·主要结论 | 第102-103页 |
| ·后续工作展望 | 第103-106页 |
| 致谢 | 第106-108页 |
| 参考文献 | 第108-122页 |
| 附录 | 第122-124页 |
| A. 作者在攻读学位期间发表的论文目录 | 第122-123页 |
| B. 专利 | 第123-124页 |
| C. 作者在攻读博士学位期间参加的科研项目情况 | 第124页 |
