| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 引言 | 第8-29页 |
| 一、骨的发生 | 第8-11页 |
| （一） 膜内成骨 | 第9页 |
| （二） 软骨内成骨 | 第9-11页 |
| 二、骨骼发育过程中的关键转录因子 | 第11-27页 |
| （一） Runx2、Osterix 与成骨细胞 | 第11-16页 |
| （二） Sox9、L-Sox5 和Sox6 与软骨细胞 | 第16-25页 |
| （三） PU.1、MITF 等与破骨细胞 | 第25-27页 |
| 三、本论文研究的内容和意义 | 第27-29页 |
| 材料与方法 | 第29-41页 |
| 一、实验材料 | 第29-32页 |
| （一） 细胞 | 第29页 |
| （二） 抗体 | 第29页 |
| （三） 试剂 | 第29-30页 |
| （四） 质粒 | 第30页 |
| （五） 引物 | 第30-31页 |
| （六） 主要仪器设备 | 第31-32页 |
| 二、实验方法 | 第32-41页 |
| （一） 细胞培养 | 第32页 |
| （二） 质粒构建 | 第32-33页 |
| （三） 质粒的大量制备 | 第33-34页 |
| （四） 瞬时转染 | 第34-35页 |
| （五） 稳定转染 | 第35页 |
| （六） 报告基因（荧光素酶双报告系统）检测 | 第35页 |
| （七） RT-PCR，RealTime PCR | 第35-38页 |
| （八） 免疫荧光检测 | 第38-39页 |
| （九） 全细胞蛋白制备 | 第39页 |
| （十） 蛋白质电泳和免疫印迹 | 第39-40页 |
| （十一） Alcian blue 染色 | 第40页 |
| （十二） Microarray 分析 | 第40-41页 |
| 结果与分析 | 第41-56页 |
| 一、Runx2 参与调控 Osterix 启动子活性及其基因表达研究 | 第41-47页 |
| （一） 过表达的Runx2 定位于细胞核内 | 第41页 |
| （二） Runx2 在非成骨细胞以及成骨细胞中能诱导Osterix 的表达 | 第41-42页 |
| （三） 克隆人的Osterix 启动子 | 第42-44页 |
| （四） Runx2 功能性结合位点的鉴定 | 第44-45页 |
| （五） Osterix 能上调I-型胶原蛋白的启动子活性，而Runx2 不能 | 第45-47页 |
| 二、软骨细胞分化过程中，SOX转录因子之间的初始比例变化能调控软骨细胞的增殖和分化 | 第47-56页 |
| （一） 建立过表达L-Sox5、Sox6、Sox9 和L-Sox5+Sox9 的ATDC5 细胞系 | 第47-48页 |
| （二） 过表达L-Sox5、Sox6、Sox9 和L-Sox5+Sox9 使软骨细胞分化程度发生不同变化 | 第48-50页 |
| （三） 过表达L-Sox5 或Sox9 对软骨特异性基因的表达产生不同的调控作用 | 第50-51页 |
| （四） 软骨分化过程中，过表达L-Sox5、Sox6、Sox9 和L-Sox5+Sox9 使软骨细胞增殖速率发生不同变化 | 第51-52页 |
| （五） STAT-1 是L-Sox5 或Sox9 控制软骨细胞增殖的下游关键因子之一 | 第52-54页 |
| （六） 软骨细胞分化过程中，Sox 转录因子初始比例变动使MEK-ERK 信号途径的应答发生改变 | 第54-56页 |
| 讨论 | 第56-60页 |
| 一、Runx2 参与调控 Osterix 启动子活性及其基因表达研究 | 第56-57页 |
| 二、软骨细胞分化过程中，SOX转录因子之间的比例变化能调控软骨细胞的增殖和分化 | 第57-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 创新点 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 附录 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 作者简历 | 第71-72页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第72页 |
