| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 缩略语表 | 第13-15页 |
| 1 前言 | 第15-24页 |
| ·CREB家族结构特征 | 第15-17页 |
| ·CREB1和CREB2的结构特征 | 第15-16页 |
| ·CREB3和CREB3L4的结构特征 | 第16-17页 |
| ·CREB家族功能研究 | 第17-23页 |
| ·CREB1功能研究 | 第17页 |
| ·CREB2功能研究 | 第17-19页 |
| ·CREB2与长期记忆抑制 | 第17-18页 |
| ·CREB2与内质网应激(ERstress) | 第18页 |
| ·CREB2参与细胞增殖和分化 | 第18-19页 |
| ·CREB2与病毒蛋白的相互作用及功能 | 第19页 |
| ·CREB3功能研究 | 第19-22页 |
| ·CREB3与病毒蛋白 | 第19-20页 |
| ·CREB3与内质网应激相关蛋白降解(ERAD) | 第20页 |
| ·CREB3与细胞趋化性的关系 | 第20-22页 |
| ·CREB3L4功能研究 | 第22-23页 |
| ·CREB3L4组织表达差异 | 第22-23页 |
| ·CREB3L4的功能研究 | 第23页 |
| ·研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-41页 |
| ·材料 | 第24-27页 |
| ·RNA与cDNA样品 | 第24页 |
| ·DNA样品 | 第24-25页 |
| ·用于基因组片段分离的模板基因组DNA | 第24页 |
| ·用于基因染色体定位的DNA样品 | 第24-25页 |
| ·培养基、工具酶及试剂盒 | 第25页 |
| ·常用溶液配方 | 第25-26页 |
| ·菌株与细胞 | 第26页 |
| ·主要实验仪器 | 第26页 |
| ·分子生物学及相关软件 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-41页 |
| ·总RNA的提取、纯化处理及检测 | 第27-28页 |
| ·组织总RNA的提取 | 第27页 |
| ·组织总RNA的纯化 | 第27-28页 |
| ·总RNA质量、纯度及含量检测 | 第28页 |
| ·CREB家族基因的克隆 | 第28-34页 |
| ·扩增CREB家族基因cDNA片断的引物的设计 | 第28-29页 |
| ·总cDNA模板的获取 | 第29-31页 |
| ·PCR反应 | 第31页 |
| ·用3'-RACE方法获取猪CREB3L4基因3'端cDNA序列 | 第31页 |
| ·PCR扩增产物的纯化 | 第31-32页 |
| ·扩增产物的鉴定(克隆和测序) | 第32-33页 |
| ·CREB家族基因组序列的获取 | 第33-34页 |
| ·CREB3启动子的扩增 | 第34页 |
| ·CREB家族基因的染色体定位 | 第34-35页 |
| ·定位引物设计及检测 | 第34-35页 |
| ·各基因染色体定位所扩增片断大小及PCR反应条件 | 第35页 |
| ·IMpRH定位信号的获得 | 第35页 |
| ·染色体定位及数据分析 | 第35页 |
| ·半定量PCR检测猪CREB家族基因的组织表达谱 | 第35-37页 |
| ·组织表达谱的引物设计 | 第36页 |
| ·CREB家族基因和GAPDH扩增的指数期循环数的确定 | 第36页 |
| ·CREB家族基因PCR扩增的反应条件 | 第36页 |
| ·半定量分析 | 第36-37页 |
| ·RT-PCR定性检测CREB3L4剪接体2的组织表达 | 第37页 |
| ·脂多糖刺激下,CREB3表达变化检测 | 第37-39页 |
| ·质粒的大量制备 | 第37-38页 |
| ·质粒浓度和纯度检测 | 第38页 |
| ·CREB3双荧光素酶报告载体构建 | 第38-39页 |
| ·qRT-PCR引物的设计 | 第39页 |
| ·qRT-PCR反应 | 第39页 |
| ·细胞培养 | 第39-41页 |
| ·细胞培养条件 | 第39页 |
| ·细胞总RNA的提取 | 第39-40页 |
| ·细胞转染 | 第40页 |
| ·双荧光素酶报告基因检测 | 第40-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-55页 |
| ·猪CREB家族基因全长cDNA的克隆与序列分析 | 第41-48页 |
| ·猪CREB2、CREB3基因全编码区cDNA的克隆 | 第41页 |
| ·猪CREB3L4基因全编码区cDNA和剪切体的克隆 | 第41-43页 |
| ·CREB2、CREB3和CREB3L4序列分析 | 第43-47页 |
| ·猪CREB2、CREB3和CREB3L4基因组结构分析 | 第47-48页 |
| ·猪CREB2、CREB3和CREB3L4染色体定位 | 第48-50页 |
| ·猪CREB3基因组启动子区的克隆及结构分析 | 第50-51页 |
| ·CREB3启动子区活性的检测 | 第51-52页 |
| ·猪CREB家族基因的组织表达谱 | 第52-54页 |
| ·猪CREB2和CREB3基因的组织表达谱 | 第52-53页 |
| ·猪CREB3L4和其剪切体的组织表达谱 | 第53-54页 |
| ·脂多糖(LPS)对CREB3基因表达的影响 | 第54-55页 |
| ·脂多糖(LPS)对CREB3mRNA的影响 | 第54-55页 |
| ·脂多糖(LPS)对CREB3启动子活性的影响 | 第55页 |
| 4 讨论 | 第55-59页 |
| ·猪CREB家族基因的结构分析 | 第55-57页 |
| ·猪CREB家族基因的染色体位置 | 第57-58页 |
| ·辐射杂种板细胞系技术原理 | 第57页 |
| ·猪CREB2基因染色体定位区域的QTL分布 | 第57-58页 |
| ·猪CREB家族基因表达的组织差异 | 第58页 |
| ·CREB3对脂多糖无应答作用 | 第58-59页 |
| 5 结论与创新点 | 第59-60页 |
| ·结论 | 第59页 |
| ·创新点 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 研究生期间论文发表情况 | 第68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 附录 | 第69-71页 |
