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六邻体嵌合型rAd5载体的构建与功能研究

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
目录第7-10页
第一章 前言第10-21页
   ·腺病毒相关背景介绍第10-12页
     ·腺病毒颗粒及其形态结构第10-11页
     ·腺病毒的基因组结构第11-12页
     ·腺病毒六邻体 HVR 区结构第12页
   ·人类腺病毒的分型第12-15页
     ·腺病毒分型方法第14页
     ·腺病毒的流行情况第14-15页
   ·腺病毒载体简介第15-16页
     ·腺病毒载体的应用及特点第15-16页
     ·腺病毒载体的研究现状第16页
   ·论文设计与实验方案第16-21页
     ·本论文立题依据第16-18页
     ·本论文的构思第18-19页
     ·实验方案与技术路线第19-21页
第二章 实验材料和方法第21-33页
   ·材料、仪器和试剂第21-24页
     ·材料第21-22页
     ·主要仪器第22-23页
     ·常用试剂配置第23-24页
   ·实验方法第24-33页
     ·病毒基因组 DNA 的提取第24页
     ·腺病毒的包装第24-25页
     ·腺病毒的筛选第25-26页
     ·腺病毒的扩增第26-27页
     ·氯化铯密度梯度离心法纯化腺病毒第27-28页
     ·嵌合型 rAd5 载体的滴度测定第28-30页
     ·衣壳蛋白染色法快速测定嵌合型 rAd5 载体的滴度第30页
     ·嵌合型 rAd5 载体的特异性检测第30页
     ·嵌合型 rAd5 载体包装效率的检测第30-31页
     ·嵌合型 rAd5 载体转基因稳定性的检测第31页
     ·嵌合型 rAd5 载体复制能力的检测第31-32页
     ·嵌合型 rAd5 载体基因表达水平的检测第32-33页
第三章 结果与讨论第33-65页
   ·六邻体嵌合 rAd5 载体的构建第33-48页
     ·pGEM-TEasy、PCR2.1-TOPO 载体的改造第34-37页
     ·6HVR(5+7)和 26Loop4 的构建及鉴定第37-39页
     ·嵌合载体 rAd5HVR26(5+7)和 rAd5HVR26(5+7)Loop4 的构建和鉴定第39-45页
     ·嵌合载体 rAd5HVR37(5+7)、rAd5HVR37(5+7)Loop4 和rAd5HVR43(5+7)、rAd5HVR43(5+7)Loop4 的构建和鉴定第45-48页
   ·表达荧光素酶(luciferase)和绿色荧光蛋白(GFP)检测基因的穿梭载体的构建和鉴定第48-50页
   ·rAd5 嵌合载体的包装,筛选,扩增,纯化,滴度测定第50-57页
     ·rAd5 嵌合载体的包装第50-53页
     ·rAd5 嵌合重组病毒的筛选第53-55页
     ·rAd5 嵌合重组病毒的扩增第55-56页
     ·rAd5 嵌合重组病毒的纯化第56-57页
     ·rAd5 嵌合重组病毒的滴度测定第57页
     ·嵌合型 rAd5 载体包装效率比较第57-59页
   ·嵌合型 rAd5 载体传代稳定性检测第59-60页
   ·嵌合型 rAd5 载体复制能力和转基因表达水平的比较第60-63页
   ·结论第63-65页
参考文献第65-69页
致谢第69页

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