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中国荷斯坦奶牛β-防御素基因LAP分子克隆及真核表达初步研究

中文摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
第一章 文献综述第9-26页
 1 动物防御素研究进展第9-24页
   ·动物防御素的分类及分布第9-14页
   ·防御素的染色体定位第14页
   ·防御素的分子结构与特征第14-16页
   ·防御素的进化关系第16-17页
   ·防御素基因的表达调控第17-18页
   ·防御素的生物学作用第18-21页
   ·防御素的应用前景第21-24页
 2 研究目的与意义第24-26页
第二章 中国荷斯坦奶牛LAP基因的克隆与序列分析第26-41页
 1 实验材料第26-27页
   ·实验动物第26页
   ·感受态细胞与克隆载体第26-27页
   ·主要试剂第27页
   ·主要仪器与设备第27页
 2 试验方法第27-34页
   ·引物设计第27页
   ·LAP基因的扩增及回收第27-31页
   ·LAP基因的连接转化与鉴定第31-34页
 3 结果第34-39页
   ·cDNA第一链的检测第34页
   ·RT-PCR结果第34-35页
   ·重组质粒pMD-19T-LAP的鉴定第35-36页
   ·LAP基因序列测定及序列分析第36-39页
 4 讨论第39-41页
第三章 中国荷斯坦奶牛LAP基因的真核表达载体的构建及其表达研究第41-52页
 1 试验材料第41-42页
   ·生物材料第41页
   ·主要试剂第41页
   ·主要仪器与设备第41-42页
 2 试验方法第42-46页
   ·重组质粒pEGFP-C1-LAP的构建流程第42页
   ·目的基因的酶切及纯化第42-43页
   ·连接与转化第43页
   ·重组阳性转化子的鉴定第43-45页
   ·LAP基因在COS7细胞中的表达与检测第45-46页
 3 结果第46-49页
   ·重组质粒pEGFP-C1-LAP的鉴定第46-47页
   ·LAP基因在COS7细胞中的表达鉴定第47页
   ·RT-PCR检测第47-49页
 4 讨论第49-52页
   ·牛β-防御素基因的表达研究第49-50页
   ·关于真核细胞转染第50-51页
   ·β-防御素基因LAP与奶牛乳房炎防治第51-52页
结论第52-53页
参考文献第53-58页
致谢第58-59页
附图1第59-60页
附图2第60-61页
附图3第61页

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