中文摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-26页 |
1 动物防御素研究进展 | 第9-24页 |
·动物防御素的分类及分布 | 第9-14页 |
·防御素的染色体定位 | 第14页 |
·防御素的分子结构与特征 | 第14-16页 |
·防御素的进化关系 | 第16-17页 |
·防御素基因的表达调控 | 第17-18页 |
·防御素的生物学作用 | 第18-21页 |
·防御素的应用前景 | 第21-24页 |
2 研究目的与意义 | 第24-26页 |
第二章 中国荷斯坦奶牛LAP基因的克隆与序列分析 | 第26-41页 |
1 实验材料 | 第26-27页 |
·实验动物 | 第26页 |
·感受态细胞与克隆载体 | 第26-27页 |
·主要试剂 | 第27页 |
·主要仪器与设备 | 第27页 |
2 试验方法 | 第27-34页 |
·引物设计 | 第27页 |
·LAP基因的扩增及回收 | 第27-31页 |
·LAP基因的连接转化与鉴定 | 第31-34页 |
3 结果 | 第34-39页 |
·cDNA第一链的检测 | 第34页 |
·RT-PCR结果 | 第34-35页 |
·重组质粒pMD-19T-LAP的鉴定 | 第35-36页 |
·LAP基因序列测定及序列分析 | 第36-39页 |
4 讨论 | 第39-41页 |
第三章 中国荷斯坦奶牛LAP基因的真核表达载体的构建及其表达研究 | 第41-52页 |
1 试验材料 | 第41-42页 |
·生物材料 | 第41页 |
·主要试剂 | 第41页 |
·主要仪器与设备 | 第41-42页 |
2 试验方法 | 第42-46页 |
·重组质粒pEGFP-C1-LAP的构建流程 | 第42页 |
·目的基因的酶切及纯化 | 第42-43页 |
·连接与转化 | 第43页 |
·重组阳性转化子的鉴定 | 第43-45页 |
·LAP基因在COS7细胞中的表达与检测 | 第45-46页 |
3 结果 | 第46-49页 |
·重组质粒pEGFP-C1-LAP的鉴定 | 第46-47页 |
·LAP基因在COS7细胞中的表达鉴定 | 第47页 |
·RT-PCR检测 | 第47-49页 |
4 讨论 | 第49-52页 |
·牛β-防御素基因的表达研究 | 第49-50页 |
·关于真核细胞转染 | 第50-51页 |
·β-防御素基因LAP与奶牛乳房炎防治 | 第51-52页 |
结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
附图1 | 第59-60页 |
附图2 | 第60-61页 |
附图3 | 第61页 |