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茶树成花相关基因的cDNA克隆及生物信息学分析

摘要第1-9页
Abstract第9-12页
第一章 文献综述第12-21页
 1 花发育的研究第12-14页
   ·花器官结构第12页
   ·花器官发育学说第12-14页
     ·建成论第12页
     ·“ABC”模型第12-14页
 2 成花基因研究进展第14-16页
   ·开花决定第14-15页
   ·花的发端第15页
   ·MADS-box 基因第15-16页
 3 与开花转变相关的基因第16页
   ·晚花突变第16页
   ·早花突变第16页
   ·开花时间的天然突变第16页
 4 控制开花转化的遗传途径第16-18页
   ·光周期途径第16-17页
   ·春化途径第17页
   ·自主途径第17-18页
   ·赤霉素途径第18页
   ·开花途径整合子第18页
   ·开花时间抑制基因第18页
 5 木本植物成花调控研究现状第18-19页
 6 本研究的背景与意义第19-21页
第二章 茶树EMF2 基因cDNA 全长的克隆第21-42页
 1 材料与方法第21页
   ·植物材料第21页
   ·仪器与试剂第21页
   ·Maker、试剂盒和酶第21页
   ·载体及菌株第21页
   ·实验用具与耗材第21页
   ·引物合成与测序第21页
 2 茶树叶片总RNA的提取及纯化第21-28页
   ·茶树叶总RNA 的提取第21-22页
   ·茶树叶片RNA 含量及浓度测定第22页
   ·茶树叶片EMF2 保守区的克隆第22-25页
     ·cDNA 的合成第22-23页
     ·引物设计第23页
     ·保守区扩增第23-24页
     ·PCR 产物的回收纯化第24页
     ·目的片段与PMD18-T 载体的连接、转化及鉴定第24-25页
       ·PCR 产物与PMD18-T 载体的连接第24页
       ·转化及鉴定第24-25页
   ·3′ RACE第25-26页
     ·3′cDNA 的合成第25页
     ·3′ RACE 引物设计第25页
     ·3′端扩增第25-26页
     ·目的片段的回收与纯化第26页
     ·目的片段与PMD18-T 载体连接、转化及鉴定第26页
   ·5′ RACE第26-28页
     ·5′ RACE 引物设计第26页
     ·5′ RACE-Ready cDNA 的合成第26-27页
     ·5′末端的PCR 扩增第27-28页
     ·目的片段回收纯化第28页
     ·目的片段与PMD18-T 载体的连接、转化及鉴定第28页
 3 结果和分析第28-35页
   ·茶树叶片总RNA 的纯度检测第28-29页
   ·茶树EMF2基因保守区扩增结果第29-30页
   ·茶树叶片EMF2 基因cDNA 的RACE 及序列分析第30-33页
     ·茶树叶片EMF2 基因cDNA 的3′RACE 结果第30-31页
     ·茶树EMF2 基因5′RACE 扩增第31-33页
   ·茶树叶片EMF2 基因cDNA 全长的获得第33-35页
 4 生物信息学分析第35-40页
   ·EMF2 基因cDNA 序列同源性分析第35-36页
   ·茶树EMF2 基因蛋白序列分析第36-40页
     ·茶树EMF2 基因氨基酸及亲水性分析第36-39页
     ·茶树EMF2 基因蛋白质保守区的预测及分析第39页
     ·茶树EMF2 蛋白质跨膜区结构及二级结构的预测第39-40页
 5 讨论第40-42页
第三章 茶树细胞色素P450 基因cDNA 的克隆第42-52页
 1 材料与方法第42页
   ·植物材料第42页
   ·仪器与试剂第42页
   ·试剂盒、酶和Maker第42页
   ·载体及菌株第42页
   ·实验用具与耗材第42页
   ·引物合成与测序第42页
 2 茶树总RNA 的提取及纯化第42-45页
   ·茶树总RNA 的提取第42页
   ·茶树细胞色素P450 保守区的克隆第42-43页
     ·cDNA 的合成第42页
     ·引物设计第42页
     ·保守区扩增第42-43页
     ·PCR 产物的回收纯化第43页
     ·目的片段与PMD18-T 载体连接、转化及鉴定第43页
   ·3′ RACE第43-45页
     ·3′RACE 引物设计第43页
     ·3′RACE-Ready cDNA 的合成第43页
     ·3′末端的PCR 扩增第43-45页
     ·目的片段的回收纯化第45页
     ·目的片段与PMD18-T 载体的连接、转化及鉴定第45页
 3 结果和分析第45-48页
   ·茶树P450 基因cDNA 保守区的扩增结果第45-46页
   ·茶树P450 基因cDNA 的3′RACE 及序列分析第46-48页
 4 生物信息学分析第48-51页
   ·茶树P450 基因cDNA 序列同源性分析第48-49页
   ·茶树P450 蛋白序列分析第49-51页
     ·茶树P450 蛋白质保守区的预测及功能分析第49-50页
     ·茶树P450 蛋白质跨膜区结构及二级结构的预测第50-51页
 5 讨论第51-52页
第四章 茶树LEAFY 基因cDNA 的克隆第52-57页
 1 材料与方法第52页
   ·植物材料第52页
   ·仪器与试剂第52页
   ·菌株和质粒载体第52页
   ·实验用具与耗材第52页
   ·引物合成与测序第52页
 2 茶树总RNA 的提取及纯化第52-53页
   ·茶树LEAFY 保守区的克隆第52-53页
     ·cDNA 的合成第52页
     ·引物设计第52页
     ·保守区cDNA 的PCR 扩增第52-53页
     ·PCR 产物的回收纯化第53页
     ·目的片段与PMD18-T 载体的连接、转化及鉴定第53页
 3 结果和分析第53-56页
   ·茶树LFY 基因cDNA 保守区的扩增结果第53-56页
 4 讨论第56-57页
参考文献第57-65页
致谢第65页

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