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富苯丙氨酸碱性短肽的发现及其对蛋白质等电点和免疫交叉反应的影响

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
缩略词表第13-15页
第一章 绪论第15-24页
   ·蛋白质等电点第15-16页
   ·同一蛋白质具有不同等电点的现象第16-17页
   ·同一蛋白质具有不同等电点的可能原因第17-18页
   ·免疫交叉反应的研究进展第18-20页
   ·本论文研究的主要内容、目的和意义第20-21页
 参与文献第21-24页
第二章 富苯丙氨酸碱性短肽的发现第24-52页
   ·实验设计第26-27页
   ·实验材料第27页
   ·实验试剂第27页
   ·主要仪器设备第27-28页
   ·实验方法第28-34页
     ·蛋白质含量及氨基酸组成测定第28页
     ·层析柱的装柱和再生第28页
     ·乙醇酸氧化酶复合体的提取第28-29页
     ·乙醇酸氧化酶活力的测定第29页
     ·乙醇酸氧化酶40 kDa 亚基的制备第29页
     ·乙醇酸氧化酶SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳负极缓冲液蛋白质制备第29-30页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第30页
     ·等电聚焦电泳第30页
     ·醋酸纤维素薄膜电泳第30-31页
     ·毛细管等电聚焦第31-32页
     ·双向凝胶电泳第32-33页
     ·样品蛋白质抗体制备第33页
     ·蛋白质免疫印迹分析第33页
     ·粗蛋白质提取物制备第33-34页
   ·结果与分析第34-46页
     ·考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的标准曲线第34页
     ·乙醇酸氧化酶复合体及乙醇酸氧化酶40 kDa 亚基的获得第34-36页
     ·乙醇酸氧化酶复合体的醋酸纤维薄膜电泳、等电聚焦电泳和毛细管等电聚焦第36-37页
     ·乙醇酸氧化酶复合体的双向凝胶电泳第37页
     ·乙醇酸氧化酶复合体、乙醇酸氧化酶40 kDa 亚基的氨基酸组成第37-38页
     ·富苯丙氨酸碱性蛋白质的氨基酸组成第38页
     ·乙醇酸氧化酶复合体与SDS 的结合比例第38-40页
     ·乙醇酸氧化酶复合体的紫外全波长扫描第40-41页
     ·乙醇酸氧化酶复合体的免疫反应第41-42页
     ·乙醇酸氧化酶复合体的毛细管凝胶电泳第42-46页
   ·本章小结第46-47页
 参考文献第47-52页
第三章 富苯丙氨酸碱性短肽的特性第52-65页
   ·实验设计第52页
   ·实验材料第52-53页
   ·主要试剂及仪器设备第53页
   ·实验方法第53-56页
     ·乙醇酸氧化酶复合体的制备第53-54页
     ·乙醇酸酸氧化酶复合蛋白质的酸处理第54页
     ·未变性聚丙烯酰氨凝胶电泳第54页
     ·乙醇酸氧化酶蛋复合体的放置处理第54页
     ·葡聚糖凝胶 G-50 层析第54-55页
     ·蛋白质免疫印迹分析和斑点杂交第55-56页
   ·结果与分析第56-62页
     ·酸处理与放置处理前后乙醇酸氧化酶活性变化第56页
     ·乙醇酸氧化酶复合体在酸处理与放置处理前后凝胶电泳与斑点杂交第56-57页
     ·酸处理前后乙醇酸氧化酶复合体的氨基酸组成第57-58页
     ·酸处理前后乙醇酸氧化酶复合体的全波长扫描第58-59页
     ·二乙基氨基-纤维素柱层析中不同洗脱时间得到的乙醇酸氧化酶复合体的性质分析第59-60页
     ·二乙基氨基-纤维素柱层析中不同洗脱时间得到的乙醇酸氧化酶复合体的免疫印迹分析第60-62页
   ·本章小结第62-63页
 参考文献第63-65页
第四章 富苯丙氨酸碱性短肽对1,5 二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶的影响第65-79页
   ·实验设计第66页
   ·实验材料第66页
   ·主要试剂和仪器设备第66-67页
   ·实验方法第67-70页
     ·1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶复合体的纯化第67-68页
     ·1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶比活力测定第68页
     ·1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶复合体SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第68页
     ·氨基酸组成测定第68页
     ·蛋白质样品抗体制备第68-69页
     ·等电聚焦电泳、SDS-醋酸纤维素薄膜电泳和未变性聚丙烯酰胺凝胶电泳第69-70页
   ·结果与分析第70-76页
     ·1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶复合体的纯化第70页
     ·1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶复合体的电泳特性第70-71页
     ·1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶复合体等的氨基酸组成第71-73页
     ·乙醇酸氧化酶复合体的蛋白质免疫印迹分析第73页
     ·乙醇酸氧化酶复合体、乙醇酸氧化酶与绿叶粗蛋白的免疫杂交第73-74页
     ·1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶大小亚基复合体的免疫印迹分析第74-76页
   ·本章小结第76-77页
 参考文献第77-79页
第五章 富含苯丙氨酸碱性短肽对菠萝蛋白酶的影响第79-97页
   ·实验设计第81页
   ·实验材料第81页
   ·主要实验试剂与仪器设备第81-82页
   ·实验方法第82-85页
     ·蛋白质含量和菠萝蛋白酶活性测定第82页
     ·果菠萝蛋白酶的纯化、大小、氨基酸组成和等电点测定第82-83页
     ·茎菠萝蛋白酶复合体的纯化和氨基酸组成测定第83页
     ·茎菠萝蛋白酶复合体抗体制备和免疫印迹分析第83-84页
     ·茎菠萝蛋白酶复合体等电点的测定第84-85页
   ·结果与分析第85-94页
     ·果菠萝蛋白酶的纯化和氨基酸组成第85-86页
     ·茎菠萝蛋白酶复合体及茎菠萝蛋白酶亚基的纯化和氨基酸组成第86-88页
     ·菠萝茎汁粗蛋白质和茎菠萝蛋白酶复合体的等电点第88-89页
     ·茎菠萝蛋白酶复合体、乙醇酸氧化酶复合体和富苯丙氨酸碱性蛋白质之间的免疫交叉反应第89-92页
     ·茎菠萝蛋白酶28 kDa 亚基抗体对菠萝果汁亚基和茎菠萝蛋白酶亚基的免疫反应第92-94页
   ·本章小结第94-95页
 参考文献第95-97页
结论和展望第97-99页
攻读博士学位期间取得的研究成果第99-100页
致谢第100-101页
附录第101页

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