| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 绪论 | 第10-21页 |
| ·茄尼醇的性质及用途 | 第10-13页 |
| ·茄尼醇的物理化学性质 | 第10-11页 |
| ·茄尼醇的应用 | 第11-12页 |
| ·茄尼醇的生产及市场现状 | 第12-13页 |
| ·烟草中茄尼醇的合成途径 | 第13-16页 |
| ·萜类化合物 | 第13-14页 |
| ·植物萜类生物合成途径 | 第14-15页 |
| ·茄尼醇前体物异戊二烯焦磷酸的来源 | 第15-16页 |
| ·萜类代谢过程中的关键酶 | 第16页 |
| ·发根培养与植物次生代谢物的生产 | 第16-19页 |
| ·发根农杆菌 | 第17页 |
| ·发根农杆菌在植物基因工程中的应用 | 第17-18页 |
| ·发根农杆菌在生产次生代谢物中的应用 | 第18-19页 |
| ·实验的目的意义、主要内容及技术路线 | 第19-21页 |
| ·实验的研究意义 | 第19-20页 |
| ·实验的主要内容 | 第20页 |
| ·实验的技术路线 | 第20-21页 |
| 2 拟南芥中脱氧木酮糖-5-磷酸合酶基因的克隆与分离 | 第21-39页 |
| ·实验材料 | 第21-23页 |
| ·生物材料 | 第21页 |
| ·主要仪器设备与生产厂家 | 第21-22页 |
| ·菌株和载体 | 第22-23页 |
| ·实验药品 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-31页 |
| ·拟南芥叶片总RNA提取 | 第23-25页 |
| ·RT-PCR获得拟南芥dxs基因DNA序列 | 第25-26页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳回收拟南芥DXS基因片段 | 第26-27页 |
| ·拟南芥dxps基因cDNA片段与pMD~(TM)19-T Simple连接 | 第27-31页 |
| ·结果分析 | 第31-38页 |
| ·拟南芥总RNA的结果检测 | 第31页 |
| ·RT-PCR扩增dxps基因 | 第31-32页 |
| ·质粒PCR结果 | 第32-33页 |
| ·测序结果与比对 | 第33-38页 |
| ·小结与讨论 | 第38-39页 |
| 3 植物表达载体的构建 | 第39-50页 |
| ·实验材料 | 第39-40页 |
| ·菌株和载体 | 第39页 |
| ·主要试剂配制 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-46页 |
| ·质粒PCR | 第40-41页 |
| ·dxps基因片段与pMD~(TM)19-T Simple Vector连接 | 第41-42页 |
| ·带有酶切位点的重组质粒pMD-19dxps酶切 | 第42页 |
| ·载体pBI121质粒的提取 | 第42-43页 |
| ·载体pBI121质粒的酶切与回收 | 第43-44页 |
| ·目的基因与表达载体DNA的连接和转化 | 第44-45页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第45页 |
| ·A4农杆菌的转化与转化菌株的筛选鉴定 | 第45-46页 |
| ·结果分析 | 第46-49页 |
| ·pMD-19dxps酶切结果 | 第46-47页 |
| ·pBI121酶切结果 | 第47页 |
| ·pBI121-pMD19重组质粒的PCR和酶切结果鉴定 | 第47-48页 |
| ·转入发根农杆菌中的PCR及酶切鉴定 | 第48-49页 |
| ·小结与讨论 | 第49-50页 |
| 4 烟草发根培养系统的建立 | 第50-59页 |
| ·试验材料 | 第50-51页 |
| ·植物材料 | 第50页 |
| ·实验试剂 | 第50-51页 |
| ·实验设备 | 第51页 |
| ·材料和方法 | 第51-53页 |
| ·无菌苗的培养 | 第51页 |
| ·共转化与共培养 | 第51-52页 |
| ·Ri-质粒转化的判断 | 第52-53页 |
| ·结果分析 | 第53-58页 |
| ·烟草品种对发根转化效率的影响 | 第53-54页 |
| ·不同部位叶片对发根转化效率的影响 | 第54页 |
| ·Ri-质粒转化的判断 | 第54-55页 |
| ·发根的活体压片 | 第55-57页 |
| ·最佳生长培养基的筛选 | 第57-58页 |
| ·小结与讨论 | 第58-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-64页 |
| 附录一 DNA MARKER和载体图谱 | 第64-66页 |
| 附录二 英文缩写词表 | 第66-67页 |
| 个人简历 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
