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油茶种子成熟调控蛋白基因的分离克隆及功能研究

摘要第1-7页
Abstract第7-10页
缩写词表第10-15页
1 绪论第15-32页
   ·油茶研究现状第15-21页
     ·油茶常规育种研究第15-17页
     ·油茶的分子生物学研究第17-21页
   ·植物种子发育、成熟相关基因研究现状第21-29页
     ·胚发育相关基因第21-22页
     ·贮藏物质相关蛋白基因第22-24页
     ·LEA蛋白基因第24-25页
     ·成熟调控相关基因第25-29页
   ·研究目的意义及技术路线第29-32页
     ·研究目的意义第29-30页
     ·技术路线第30-32页
2 油茶种子成熟调控蛋白基因的基因组DNA全长克隆及生物信息学分析第32-57页
   ·材料与方法第33-40页
     ·实验材料与克隆载体第33页
     ·各种酶类及试剂、药品第33-34页
     ·生物信息学分析的主要软件与数据库第34页
     ·油茶种子成熟调控蛋白基因的cDNA克隆的分离第34-35页
     ·油茶种子成熟调控蛋白基因的cDNA克隆的测序检测第35页
     ·油茶基因组总DNA提取第35-36页
     ·油茶种子成熟调控蛋白基因基因组DNA全长克隆第36-40页
     ·生物信息学预测第40页
   ·结果与分析第40-55页
     ·油茶种子成熟调控蛋白基因的cDNA克隆的分离第40-41页
     ·油茶种子成熟调控蛋白基因cDNA全长克隆第41-45页
     ·油茶基因组DNA的提取结果第45页
     ·油茶种子成熟调控蛋白基因基因组DNA全长克隆第45-47页
     ·生物信息学分析第47-55页
   ·讨论第55-57页
3 油茶种子成熟调控蛋白基因的表达模式第57-70页
   ·材料与方法第58-62页
     ·试验材料第58页
     ·药品、酶及试剂第58页
     ·半定量RT-PCR第58-62页
   ·结果与分析第62-68页
     ·总RNA的提取质量第62-63页
     ·总RNA的浓度测定结果第63-64页
     ·半定量RT-PCR平台平台期的确定第64-65页
     ·油茶种子成熟调控蛋白基因在油茶不同组织中的表达差异分析第65-66页
     ·油茶种子成熟调控蛋白基因在不同发育期的油茶种子中的表达分析第66-68页
   ·讨论第68-70页
4 油茶种子成熟调控蛋白基因的功能研究分析第70-95页
   ·材料与方法第72-83页
     ·植物材料与表达载体第72-74页
     ·菌株与试剂第74页
     ·中间过渡表达载体pCAMBIA1304-35S的构建第74-76页
     ·油茶CoRrp基因siRNA表达载体构建第76-77页
     ·油茶CoRrp基因过量表达载体构建第77-79页
     ·野生型拟南芥的种植第79页
     ·农杆菌感受态细胞的制备第79-80页
     ·工程菌的获得第80页
     ·转基因拟南芥的获得第80-82页
     ·DNA水平初步鉴定过表达和干扰表达植株第82页
     ·RNA水平进一步鉴定超量表达和RNA干扰表达植株中CoRrp基因的表达量第82页
     ·转基因植株的表型观察第82页
     ·GUS染色第82-83页
   ·结果与分析第83-93页
     ·中间过渡表达载体pCAMBIA1304-35S的双酶切结果第83-84页
     ·油茶CoRrp基因siRNA表达载体构建第84-85页
     ·CoRrp过量表达载体构建第85-86页
     ·转基因拟南芥植株T1代筛选结果第86-87页
     ·转基因拟南芥植株T2代筛选结果第87页
     ·DNA水平初步鉴定过表达和干扰表达转基因植株第87-88页
     ·油茶CoRrp基因在过量表达转基因拟南芥、干扰表达拟南芥及野生型拟南芥中的表达量分析第88-89页
     ·野生型拟南芥、超量表达拟南芥及干扰表达拟南芥表型观察分析第89-91页
     ·GUS染色分析第91-93页
   ·讨论第93-95页
5 主要研究结论与创新点第95-98页
   ·主要研究结论第95-97页
   ·创新点第97-98页
参考文献第98-112页
附录A:主要试剂的配制第112-114页
附录B:博士期间的主要学术成果第114-115页
致谢第115页

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