摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
缩写词表 | 第10-15页 |
1 绪论 | 第15-32页 |
·油茶研究现状 | 第15-21页 |
·油茶常规育种研究 | 第15-17页 |
·油茶的分子生物学研究 | 第17-21页 |
·植物种子发育、成熟相关基因研究现状 | 第21-29页 |
·胚发育相关基因 | 第21-22页 |
·贮藏物质相关蛋白基因 | 第22-24页 |
·LEA蛋白基因 | 第24-25页 |
·成熟调控相关基因 | 第25-29页 |
·研究目的意义及技术路线 | 第29-32页 |
·研究目的意义 | 第29-30页 |
·技术路线 | 第30-32页 |
2 油茶种子成熟调控蛋白基因的基因组DNA全长克隆及生物信息学分析 | 第32-57页 |
·材料与方法 | 第33-40页 |
·实验材料与克隆载体 | 第33页 |
·各种酶类及试剂、药品 | 第33-34页 |
·生物信息学分析的主要软件与数据库 | 第34页 |
·油茶种子成熟调控蛋白基因的cDNA克隆的分离 | 第34-35页 |
·油茶种子成熟调控蛋白基因的cDNA克隆的测序检测 | 第35页 |
·油茶基因组总DNA提取 | 第35-36页 |
·油茶种子成熟调控蛋白基因基因组DNA全长克隆 | 第36-40页 |
·生物信息学预测 | 第40页 |
·结果与分析 | 第40-55页 |
·油茶种子成熟调控蛋白基因的cDNA克隆的分离 | 第40-41页 |
·油茶种子成熟调控蛋白基因cDNA全长克隆 | 第41-45页 |
·油茶基因组DNA的提取结果 | 第45页 |
·油茶种子成熟调控蛋白基因基因组DNA全长克隆 | 第45-47页 |
·生物信息学分析 | 第47-55页 |
·讨论 | 第55-57页 |
3 油茶种子成熟调控蛋白基因的表达模式 | 第57-70页 |
·材料与方法 | 第58-62页 |
·试验材料 | 第58页 |
·药品、酶及试剂 | 第58页 |
·半定量RT-PCR | 第58-62页 |
·结果与分析 | 第62-68页 |
·总RNA的提取质量 | 第62-63页 |
·总RNA的浓度测定结果 | 第63-64页 |
·半定量RT-PCR平台平台期的确定 | 第64-65页 |
·油茶种子成熟调控蛋白基因在油茶不同组织中的表达差异分析 | 第65-66页 |
·油茶种子成熟调控蛋白基因在不同发育期的油茶种子中的表达分析 | 第66-68页 |
·讨论 | 第68-70页 |
4 油茶种子成熟调控蛋白基因的功能研究分析 | 第70-95页 |
·材料与方法 | 第72-83页 |
·植物材料与表达载体 | 第72-74页 |
·菌株与试剂 | 第74页 |
·中间过渡表达载体pCAMBIA1304-35S的构建 | 第74-76页 |
·油茶CoRrp基因siRNA表达载体构建 | 第76-77页 |
·油茶CoRrp基因过量表达载体构建 | 第77-79页 |
·野生型拟南芥的种植 | 第79页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第79-80页 |
·工程菌的获得 | 第80页 |
·转基因拟南芥的获得 | 第80-82页 |
·DNA水平初步鉴定过表达和干扰表达植株 | 第82页 |
·RNA水平进一步鉴定超量表达和RNA干扰表达植株中CoRrp基因的表达量 | 第82页 |
·转基因植株的表型观察 | 第82页 |
·GUS染色 | 第82-83页 |
·结果与分析 | 第83-93页 |
·中间过渡表达载体pCAMBIA1304-35S的双酶切结果 | 第83-84页 |
·油茶CoRrp基因siRNA表达载体构建 | 第84-85页 |
·CoRrp过量表达载体构建 | 第85-86页 |
·转基因拟南芥植株T1代筛选结果 | 第86-87页 |
·转基因拟南芥植株T2代筛选结果 | 第87页 |
·DNA水平初步鉴定过表达和干扰表达转基因植株 | 第87-88页 |
·油茶CoRrp基因在过量表达转基因拟南芥、干扰表达拟南芥及野生型拟南芥中的表达量分析 | 第88-89页 |
·野生型拟南芥、超量表达拟南芥及干扰表达拟南芥表型观察分析 | 第89-91页 |
·GUS染色分析 | 第91-93页 |
·讨论 | 第93-95页 |
5 主要研究结论与创新点 | 第95-98页 |
·主要研究结论 | 第95-97页 |
·创新点 | 第97-98页 |
参考文献 | 第98-112页 |
附录A:主要试剂的配制 | 第112-114页 |
附录B:博士期间的主要学术成果 | 第114-115页 |
致谢 | 第115页 |