| Acknowledgements | 第1-7页 |
| 目录 | 第7-11页 |
| 摘要 | 第11-14页 |
| Abstract | 第14-17页 |
| 缩略词表 | 第17-18页 |
| 1 综述 | 第18-39页 |
| ·小孢子培养及植株再生技术的研究进展 | 第18-23页 |
| ·小孢子胚胎发生的影响因素 | 第18-21页 |
| ·小孢子供体基因型 | 第19页 |
| ·小孢子分离前生长环境温度 | 第19页 |
| ·小孢子取材时期 | 第19-20页 |
| ·小孢子分离后处理温度 | 第20页 |
| ·小孢子培养密度 | 第20页 |
| ·其它因素 | 第20-21页 |
| ·胚状体植株再生技术 | 第21-22页 |
| ·直接成苗技术 | 第21页 |
| ·间接成苗技术 | 第21-22页 |
| ·染色体加倍及倍性鉴定 | 第22-23页 |
| ·油菜转基因技术研究 | 第23-29页 |
| ·油菜转化外植体的选择 | 第23-25页 |
| ·子叶柄 | 第24页 |
| ·下胚轴 | 第24页 |
| ·小孢子 | 第24页 |
| ·原生质体 | 第24-25页 |
| ·油菜基因转化介导方法 | 第25-26页 |
| ·农杆菌转化 | 第25页 |
| ·基因枪转化 | 第25页 |
| ·显微注射法 | 第25页 |
| ·电激法 | 第25页 |
| ·PEG介导法 | 第25-26页 |
| ·激光微束法 | 第26页 |
| ·外源基因的种类 | 第26-28页 |
| ·抗虫基因 | 第26页 |
| ·抗病基因 | 第26-27页 |
| ·抗除草剂基因 | 第27页 |
| ·不育与恢复基因 | 第27-28页 |
| ·品质改良基因 | 第28页 |
| ·转基因油菜安全性分析 | 第28-29页 |
| ·生态环境风险 | 第28-29页 |
| ·基因流散风险 | 第29页 |
| ·人体健康风险 | 第29页 |
| ·除草剂丙酯草醚的应用概况及其作用机理研究 | 第29-33页 |
| ·丙酯草醚防除油菜田杂草效果 | 第30页 |
| ·丙酯草醚对油菜耐性及其农艺性状的影响 | 第30-31页 |
| ·丙酯草醚在植物体内的运转及在土壤中的残留动态研究 | 第31-32页 |
| ·丙酯草醚的作用机理研究 | 第32-33页 |
| ·实时荧光定量PCR技术在植物生物技术领域的应用研究 | 第33-37页 |
| ·基因表达分析 | 第34页 |
| ·转基因检测研究 | 第34-35页 |
| ·基因突变分析及多态性研究 | 第35页 |
| ·植物病害检验检疫 | 第35-36页 |
| ·存在的主要问题 | 第36-37页 |
| ·研究内容与意义 | 第37-39页 |
| 2 甘蓝型油菜小孢子胚胎发生、植株再生影响因素的研究 | 第39-50页 |
| ·材料和方法 | 第39-40页 |
| ·试验材料 | 第39页 |
| ·小孢子分离和培养 | 第39-40页 |
| ·植株再生与移栽 | 第40页 |
| ·统计分析 | 第40页 |
| ·结果与分析 | 第40-47页 |
| ·小孢子供体延长生长培养 | 第40-42页 |
| ·热击处理对甘蓝型油菜分离小孢子胚产率的影响 | 第42-43页 |
| ·不同活性炭浓度对甘蓝型油菜分离小孢子胚产率的影响 | 第43-44页 |
| ·不同蔗糖浓度对甘蓝型油菜小孢子胚产率的影响 | 第44-45页 |
| ·移入固体培养基前的胚龄对小孢子胚再生植株的影响 | 第45页 |
| ·不同激素配比NAA+BA组合对小孢子胚再生植株的影响 | 第45-47页 |
| ·不同GA浓度对甘蓝型油菜小孢子胚再生植株的影响 | 第47页 |
| ·讨论 | 第47-50页 |
| 3 甘蓝型油菜小孢子再生植株染色体加倍及倍性鉴定的研究 | 第50-58页 |
| ·材料与方法 | 第51-52页 |
| ·试验材料 | 第51页 |
| ·小孢子培养与植株再生 | 第51页 |
| ·再生植株秋水仙素根系加倍处理 | 第51页 |
| ·再生植株倍性鉴定 | 第51-52页 |
| ·FCM检测法 | 第51-52页 |
| ·FDA气孔荧光染色法 | 第52页 |
| ·结果与分析 | 第52-55页 |
| ·FCM鉴定甘蓝型油菜小孢子再生植株自然倍性分布 | 第52-53页 |
| ·秋水仙素处理根系的加倍效果 | 第53-55页 |
| ·不同倍性间的气孔大小 | 第55页 |
| ·讨论 | 第55-58页 |
| 4 甘蓝型油菜小孢子胚状体农杆菌介导转化体系的建立 | 第58-71页 |
| ·材料与方法 | 第58-63页 |
| ·试验材料 | 第58-59页 |
| ·转化受体 | 第58页 |
| ·农杆菌菌株及质粒 | 第58-59页 |
| ·试验方法 | 第59-63页 |
| ·甘蓝型油菜小孢子培养 | 第59页 |
| ·感受态农杆菌的制备与质粒转化 | 第59-60页 |
| ·质粒鉴定 | 第60-61页 |
| ·农杆菌介导转化油菜小孢子胚状体 | 第61-62页 |
| ·转化植株目的基因的检测 | 第62-63页 |
| ·数据分析 | 第63页 |
| ·结果与分析 | 第63-68页 |
| ·质粒DNA检测 | 第63-64页 |
| ·羧苄青霉素对子叶胚状体成活率和愈伤组织诱导率的影响 | 第64-65页 |
| ·潮霉素的筛选效果以及对子叶胚状体芽再生能力的影响 | 第65页 |
| ·头孢霉素对再生植株生根的影响 | 第65-66页 |
| ·转化再生植株和对照植株基因组DNA的检测 | 第66-67页 |
| ·转化植株目的基因的PCR检测 | 第67-68页 |
| ·转化植株的染色体加倍与移栽 | 第68页 |
| ·讨论 | 第68-71页 |
| 5 基因枪介导双价抗虫基因转化体系的初步研究 | 第71-82页 |
| ·材料与方法 | 第71-77页 |
| ·试验材料 | 第71-72页 |
| ·试验方法 | 第72-77页 |
| ·小孢子的培养 | 第72页 |
| ·受体材料的制备 | 第72页 |
| ·热击转化感受态大肠杆菌 | 第72页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第72-73页 |
| ·基因枪转化 | 第73-75页 |
| ·恢复培养 | 第75页 |
| ·筛选培养和生根培养 | 第75页 |
| ·油菜植株的PCR检测 | 第75-76页 |
| ·转化再生植株的染色体加倍与移栽 | 第76-77页 |
| ·结果与分析 | 第77-81页 |
| ·高渗处理对胚状体再生能力的影响 | 第77-78页 |
| ·基因枪轰击次数与潮霉素筛选浓度对胚状体的影响 | 第78页 |
| ·转基因油菜植株的基因组DNA检测 | 第78-79页 |
| ·转基因油菜植株的PCR检测 | 第79页 |
| ·转化植株的染色体加倍与移栽 | 第79-81页 |
| ·讨论 | 第81-82页 |
| 6 利用丙酯草醚诱变筛选抗除草剂油菜的初步研究 | 第82-88页 |
| ·材料与方法 | 第82-83页 |
| ·试验材料 | 第82-83页 |
| ·小孢子离体培养 | 第83页 |
| ·EMS处理 | 第83页 |
| ·ZJ0273选择培养 | 第83页 |
| ·根系加倍与倍性检测 | 第83页 |
| ·大田移栽与抗性检验 | 第83页 |
| ·结果与分析 | 第83-87页 |
| ·EMS诱变对子叶胚状体成活率的影响 | 第83-84页 |
| ·ZJ0273处理对子叶胚状体植株再生的影响 | 第84页 |
| ·ZJ0273喷施100 mg/L抗性检验 | 第84-85页 |
| ·利用EMS和ZJ0273筛选获得的植株农艺性状变异分析 | 第85-87页 |
| ·讨论 | 第87-88页 |
| 7 丙酯草醚胁迫下靶标基因在子叶胚状体中的表达研究 | 第88-97页 |
| ·材料与方法 | 第89-92页 |
| ·试验材料 | 第89页 |
| ·小孢子的分离及培养 | 第89页 |
| ·ZJ0273处理 | 第89-90页 |
| ·ALS酶活测定 | 第90-91页 |
| ·ALS、KARI基因的引物设计 | 第91页 |
| ·子叶胚状体叶片RNA的提取、纯化与反转录 | 第91页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第91-92页 |
| ·数据分析 | 第92页 |
| ·结果与分析 | 第92-95页 |
| ·ZJ0273处理下油菜子叶胚状体的存活率变化 | 第92-93页 |
| ·ZJ0273处理下ALS酶活性变化 | 第93页 |
| ·样品RNA纯度和完整性检测 | 第93页 |
| ·子叶胚状体中ALS和KARI基因的FQ-PCR扩增曲线和溶解曲线分析 | 第93-94页 |
| ·ZJ0273处理下子叶胚状体中ALS和KARI基因的表达特征差异 | 第94-95页 |
| ·讨论 | 第95-97页 |
| 论文创新点及今后研究方向 | 第97-98页 |
| 论文创新点 | 第97页 |
| 今后研究方向 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-118页 |
| 附录 博士期间发表的论文及专利情况 | 第118页 |
