| 内容提要 | 第1-5页 |
| 英文缩略词 | 第5-11页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| 第1章 绪论 | 第12-40页 |
| ·流感疫苗的研究 | 第12-23页 |
| ·流感病毒的生物学特征 | 第12-15页 |
| ·流感病毒的致病性及免疫性 | 第15页 |
| ·流感的历史与现状 | 第15-16页 |
| ·流感疫苗的研究进展 | 第16-23页 |
| ·通用型疫苗靶位的选择 | 第23页 |
| ·流感病毒M2 蛋白疫苗研究进展 | 第23-33页 |
| ·M2 蛋白的结构及功能 | 第23-24页 |
| ·M2 蛋白与盐酸金刚烷胺耐药性的研究 | 第24-25页 |
| ·M2 蛋白疫苗研究进展 | 第25-31页 |
| ·M2e 疫苗诱导保护的机制 | 第31-32页 |
| ·M2e 疫苗的临床开发 | 第32-33页 |
| ·展望 | 第33页 |
| ·人血清白蛋白研究进展 | 第33-40页 |
| ·人血清白蛋白的结构 | 第33-34页 |
| ·人血清白蛋白的生物学功能 | 第34-36页 |
| ·人血清白蛋白基因工程研究进展 | 第36-38页 |
| ·人血清白蛋白融合技术 | 第38-40页 |
| 第2章 HSA/M2E 毕赤酵母高效分泌表达体系的建立和鉴定 | 第40-64页 |
| ·材料与方法 | 第41-56页 |
| ·器材及设备 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41-42页 |
| ·引物 | 第42页 |
| ·Trizol 法从人胚胎肝组织中提取总RNA | 第42-43页 |
| ·RT-PCR 扩增HSA cDNA 序列 | 第43-44页 |
| ·HSA cDNA 克隆载体的构建 | 第44-47页 |
| ·pPICZαC-HSA 载体的构建 | 第47-48页 |
| ·pPICZαC-HSA/M2e 表达载体的构建 | 第48-49页 |
| ·毕赤酵母的转化 | 第49-50页 |
| ·阳性菌株的筛选 | 第50-51页 |
| ·表达产物HSA/M2e 分析 | 第51-54页 |
| ·AKTA explorer 多功能纯化系统小量纯化HSA/M2e | 第54-55页 |
| ·HSA/M2e 氨基酸序列分析 | 第55-56页 |
| ·结果 | 第56-61页 |
| ·人胚胎肝组织总RNA 的提取 | 第56页 |
| ·RT-PCR 扩增cDNA | 第56页 |
| ·重组载体pMD18-T-HSA 的酶切鉴定 | 第56-57页 |
| ·重组质粒pPICZαC-HSA 及pPICZαC-HSA/M2e 的酶切鉴定 | 第57页 |
| ·HSA/M2e 毕赤酵母工程菌的筛选 | 第57-60页 |
| ·HSA/M2e 小量纯化 | 第60页 |
| ·HSA/M2e 的N-端氨基酸序列分析 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-64页 |
| 第3章 HSA/M2E 中试规模发酵及纯化工艺研究 | 第64-78页 |
| ·材料与方法 | 第64-70页 |
| ·器材及设备 | 第64-65页 |
| ·溶液配制 | 第65-66页 |
| ·毕赤酵母表达HSA/M2e 的pH 值优化 | 第66-67页 |
| ·利用80L 发酵罐大规模发酵表达HSA/M2e | 第67-69页 |
| ·HSA/M2e 大规模纯化系统的建立 | 第69-70页 |
| ·Bradford 法定量HSA/M2e | 第70页 |
| ·结果 | 第70-73页 |
| ·毕赤酵母表达HSA/M2e pH 值的优化 | 第70-71页 |
| ·HSA/M2e 大规模发酵结果 | 第71-73页 |
| ·讨论 | 第73-78页 |
| 第4章 融合蛋白HSA/M2E 小鼠体内免疫及其抗流感病毒研究 | 第78-101页 |
| ·材料与方法 | 第79-85页 |
| ·器材及设备 | 第79页 |
| ·主要试剂 | 第79-80页 |
| ·溶液配制 | 第80-81页 |
| ·实验动物、病毒和细胞 | 第81页 |
| ·动物免疫实验 | 第81-84页 |
| ·动物保护性实验 | 第84-85页 |
| ·结果处理及统计学分析 | 第85页 |
| ·结果 | 第85-95页 |
| ·免疫血清的ELISA 实验结果 | 第85-86页 |
| ·细胞免疫结果 | 第86-89页 |
| ·H1N1 和H3N2 流感病毒的毒力测定结果 | 第89页 |
| ·流感病毒攻击后对小鼠一般状况及体重的影响 | 第89-91页 |
| ·肺指数和肺指数抑制率的测定 | 第91-92页 |
| ·小鼠肺部病毒滴度的测定 | 第92-93页 |
| ·肺组织病理观察 | 第93-95页 |
| ·重组蛋白对小鼠的保护效果分析 | 第95页 |
| ·讨论 | 第95-101页 |
| ·动物免疫实验 | 第97-99页 |
| ·动物保护性实验 | 第99-101页 |
| 研究总结 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-115页 |
| 附录 | 第115-122页 |
| 附录一 PPICZΑC-HSA/M2E 序列分析结果 | 第115-119页 |
| 附录二 PPICZΑC-HSA/M2E 载体构建 | 第119-120页 |
| 附录三 HSA/M2E N-端9 个氨基酸残基序列色谱图 | 第120-122页 |
| 攻读博士期间发表的学术论文 | 第122-123页 |
| 致谢 | 第123-124页 |
| 中文摘要 | 第124-129页 |
| ABSTRACT | 第129-134页 |
