中文摘要 | 第6-9页 |
英文摘要 | 第9-12页 |
中英对照缩略词表 | 第12-13页 |
前言 | 第13-15页 |
第一部分 神经干细胞提取、培养及鉴定 | 第15-23页 |
1 材料与方法 | 第15-19页 |
1.1 动物 | 第15页 |
1.2 器械和仪器 | 第15页 |
1.3 试剂 | 第15-16页 |
1.4 试剂配制 | 第16-17页 |
1.5 神经干细胞提取 | 第17页 |
1.6 神经干细胞Nestin鉴定 | 第17-18页 |
1.7 神经干细胞分化鉴定 | 第18-19页 |
2 结果 | 第19-21页 |
2.1 神经干细胞体外培养、观察 | 第19页 |
2.2 神经干细胞鉴定 | 第19-20页 |
2.3 神经干细胞分化鉴定 | 第20-21页 |
3 讨论 | 第21-23页 |
第二部分 UCP2RNA干扰载体高效转染神经干细胞方法的构建 | 第23-44页 |
1 材料与方法 | 第23-37页 |
1.1 试剂 | 第23-24页 |
1.2 仪器 | 第24-25页 |
1.3 试剂配制 | 第25-27页 |
1.4 UCP2RNA干扰载体的构建、转化和提取 | 第27-30页 |
1.5 电转染神经干细胞 | 第30-31页 |
1.6 慢病毒转染神经干细胞 | 第31-32页 |
1.7 QPCR检测慢病毒转染后神经干细胞UCP2基因表达 | 第32-34页 |
1.8 WesternBlot检测慢病毒转染后神经干细胞UCP2蛋白表达 | 第34-36页 |
1.9 统计分析 | 第36-37页 |
2 结果 | 第37-43页 |
2.1 1%琼脂糖凝胶电泳检测菌落 | 第37页 |
2.2 病毒转染和电转染效率、时效性比较 | 第37-39页 |
2.3 慢病毒转染后神经干细胞UCP2基因表达 | 第39-42页 |
2.4 慢病毒转染后神经干细胞UCP2蛋白表达 | 第42-43页 |
3 讨论 | 第43-44页 |
第三部分 UCP2低表达对神经干细胞活性氧、凋亡的影响 | 第44-52页 |
1 材料与方法 | 第44-47页 |
1.1 试剂 | 第44页 |
1.2 仪器 | 第44页 |
1.3 DCFH-DA探针检测神经干细胞ROS水平 | 第44-45页 |
1.4 荧光染色法检测神经干细胞活化的Caspase3 | 第45-46页 |
1.5 WesternBlot法检测神经干细胞Caspase3蛋白表达 | 第46页 |
1.6 统计分析 | 第46-47页 |
2 结果 | 第47-50页 |
2.1 神经干细胞ROS水平 | 第47-48页 |
2.2 神经干细胞Caspase3活化情况 | 第48-49页 |
2.3 神经干细胞Caspase3蛋白表达 | 第49-50页 |
3 讨论 | 第50-52页 |
全文结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
综述 | 第58-68页 |
参考文献 | 第64-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
在学期间承担/参与的科研课题与研究成果 | 第69-70页 |
个人简历 | 第70页 |