摘要 | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-17页 |
1 TRP蛋白家族简要概述 | 第8-9页 |
2 TRPM蛋白家族概况 | 第9-13页 |
3 TRPM1蛋白概况及研究进展 | 第13-16页 |
4 研究内容、目的及意义 | 第16-17页 |
第二章 绵羊TRPM1基因的克隆和序列分析 | 第17-29页 |
1 材料与方法 | 第17-22页 |
1.1 试验动物及其组织 | 第17页 |
1.2 主要仪器和试剂 | 第17-19页 |
1.3 试验方法 | 第19-22页 |
1.3.1 绵羊皮肤组织总RNA的提取及鉴定 | 第19页 |
1.3.2 反转录与目的片段扩增 | 第19-20页 |
1.3.3 PCR引物的设计及RT-PCR扩增 | 第20页 |
1.3.4 PCR扩增产物纯化回收 | 第20-21页 |
1.3.5 PCR回收产物与T3-Cloing-Vector的连接 | 第21页 |
1.3.6 重组质粒的转化 | 第21页 |
1.3.7 重组质粒的筛选 | 第21页 |
1.3.8 测序 | 第21页 |
1.3.9 TRPM1基因序列的生物信息学分析 | 第21-22页 |
2 结果分析 | 第22-27页 |
2.1 RT-PCR扩增TRPM1基因序列 | 第22页 |
2.2 蓝白斑筛选结果及TRPM1基因序列测定结果 | 第22-23页 |
2.3 TRPM1蛋白生物信息学预测结果 | 第23-27页 |
2.3.1 TRPM1蛋白理化性质 | 第23页 |
2.3.2 TRPM1二级结构分析 | 第23-25页 |
2.3.3 TRPM1信号肽预测 | 第25页 |
2.3.4 TRPM1跨膜结构预测 | 第25-26页 |
2.3.5 TRPM1疏水性预测 | 第26页 |
2.3.6 TRPM1糖基化位点预测 | 第26-27页 |
2.3.7 TRPM1磷酸化位点预测 | 第27页 |
3 讨论 | 第27-28页 |
4 小结 | 第28-29页 |
第三章 TRPM1 mRNA在绵羊皮肤组织中的表达特性研究 | 第29-40页 |
1 材料与方法 | 第29-33页 |
1.1 试验动物与样品采集 | 第29页 |
1.2 主要仪器及试剂 | 第29-31页 |
1.2.1 主要仪器 | 第29-30页 |
1.2.2 主要试剂 | 第30页 |
1.2.3 主要试剂的配制 | 第30-31页 |
1.3 试验方法 | 第31-33页 |
1.3.1 不同发育阶段不同绵羊毛色皮肤总RNA的提取及鉴定 | 第31页 |
1.3.2 反转录目的片段的扩增 | 第31页 |
1.3.3 引物设计及合成 | 第31页 |
1.3.4 不同发育阶段不同绵羊毛色皮肤TRPM1 mRNA qRT-PCR检测 | 第31-32页 |
1.3.5 不同发育阶段不同绵羊毛色皮肤TRPM1蛋白水平检测 | 第32页 |
1.3.6 不同发育阶段不同绵羊毛色皮肤TRPM1免疫组化定位 | 第32-33页 |
1.4 数据处理与统计分析 | 第33页 |
2 结果分析 | 第33-38页 |
2.1 TRPM1 mRNA qRT-PCR检测结果 | 第33-35页 |
2.2 TRPM1蛋白水平检测结果 | 第35-36页 |
2.3 成年绵羊不同毛色皮肤中TRPM1蛋白免疫组化结果 | 第36-38页 |
3 讨论 | 第38-39页 |
4 小结 | 第39-40页 |
全文结论 | 第40-41页 |
后续研究设想 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-47页 |
Abstract | 第47-48页 |
致谢 | 第49页 |