| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11页 |
| 第一章 前言 | 第12-32页 |
| 1.1 PHGDH相关研究进展 | 第12-24页 |
| 1.1.1 PHGDH 简介 | 第12-13页 |
| 1.1.2 PHGDH 的分子结构 | 第13-19页 |
| 1.1.3 PHGDH 的调节 | 第19-21页 |
| 1.1.4 PHGDH 与癌症 | 第21-23页 |
| 1.1.5 PHGDH 与疾病 | 第23-24页 |
| 1.2 NBA1相关研究进展 | 第24-32页 |
| 1.2.1 NBA1简介 | 第24-25页 |
| 1.2.2 NBA1的结构 | 第25-27页 |
| 1.2.3 NBA1的功能 | 第27-30页 |
| 1.2.4 NBA1与乳腺癌 | 第30-32页 |
| 第二章 材料和方法 | 第32-58页 |
| 2.1 常用试剂与耗材 | 第32-33页 |
| 2.2 实验仪器 | 第33页 |
| 2.3 DNA相关实验方法 | 第33-48页 |
| 2.3.1 质粒载体 | 第33-36页 |
| 2.3.2 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第36-37页 |
| 2.3.3 DNA转化 | 第37-38页 |
| 2.3.4 质粒DNA的提取 | 第38-41页 |
| 2.3.5 克隆方法及策略 | 第41-45页 |
| 2.3.6 哺乳动物细胞表达质粒的构建 | 第45-48页 |
| 2.4 基因型鉴定 | 第48-49页 |
| 2.5 蛋白质相关实验方法 | 第49-54页 |
| 2.5.1 免疫共沉淀 | 第49-50页 |
| 2.5.2 蛋白质的浓度的测定(Bradford法) | 第50-51页 |
| 2.5.3 蛋白质的SDS-PAGE电泳与Western blotting分析 | 第51-52页 |
| 2.5.4 蛋白质LC-MS样品的制备 | 第52-53页 |
| 2.5.5 蛋白凝胶层析Superdex G200 size exclusion chromatography | 第53-54页 |
| 2.5.6 PHGDH Thr57磷酸化多克隆抗体的制备 | 第54页 |
| 2.6 细胞相关实验和方法 | 第54-57页 |
| 2.6.1 细胞培养 | 第54-55页 |
| 2.6.2 瞬时转染 | 第55页 |
| 2.6.3 慢病毒感染 | 第55-56页 |
| 2.6.4 细胞免疫荧光实验 | 第56页 |
| 2.6.5 细胞生长曲线的测定 | 第56-57页 |
| 2.7 LC-MS测定代谢物含量的样品制备 | 第57页 |
| 2.8 小鼠肿瘤肿体积测量 | 第57-58页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第58-77页 |
| 3.1 结果 | 第58-76页 |
| 3.1.1 NBA1是一个新的与PHGDH相互作用的蛋白 | 第58-60页 |
| 3.1.2 葡萄糖饥饿刺激增强NBA1与PHGDH的相互作用 | 第60-63页 |
| 3.1.3 NBA1与PHGDH结合区域的定位 | 第63-66页 |
| 3.1.4 NBA1不影响PHGDH复合体的形成 | 第66-67页 |
| 3.1.5 葡萄糖饥饿刺激使3PG水平降低导致NBA1与PHGDH相互作用增强 | 第67-69页 |
| 3.1.6 NBA1抑制PKCζ对PHGDH的磷酸化 | 第69-72页 |
| 3.1.7 NBA1促进乳腺癌细胞的生长 | 第72-73页 |
| 3.1.8 NBAl促进MMTV- Wnt-1小鼠原发性乳腺癌肿瘤的生长 | 第73-76页 |
| 3.2 讨论 | 第76-77页 |
| 附录一: 图表索引 | 第77-79页 |
| 附录二: 缩略语及中英文对照 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
