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黄酮类化合物LC431对潜伏期HIV再激活的机制研究

英文缩略对照表第10-12页
摘要第12-14页
Abstract第14-15页
第一章 前言第16-31页
    1.1 HIV及其治疗第16-19页
        1.1.1 HIV与AIDS第16页
        1.1.2 高效抗逆转录病毒疗法HAART第16-17页
        1.1.3 艾滋病治疗新疗法——shock & kill第17-19页
    1.2 真核生物基因转录第19-25页
        1.2.1 RNA聚合酶第19-20页
        1.2.2 正性转录延伸因子P-TEFb及其复合物第20-25页
    1.3 黄酮类母核化合物第25-26页
    1.4 组蛋白、组蛋白去乙酰化酶和组蛋白去乙酰化酶抑制剂第26-30页
        1.4.1 组蛋白Histone第26-27页
        1.4.2 组蛋白乙酰化第27-28页
        1.4.3 组蛋白去乙酰化酶抑制剂HDACi第28-30页
    1.5 本课题研究目的与意义第30-31页
第二章 实验材料和方法第31-50页
    2.1 实验试剂、药品、仪器第31-33页
        2.1.1 细胞株、质粒第31页
        2.1.2 主要试剂和材料第31-32页
        2.1.3 主要实验仪器和耗材第32-33页
    2.2 常用溶液配方第33-38页
        2.2.1 细胞培养相关溶液第33-34页
        2.2.2 核抽提缓冲液配制第34-35页
        2.2.3 全细胞裂解液第35页
        2.2.4 免疫共沉淀IP溶液配制第35-36页
        2.2.5 SDS-PAGE蛋白胶配制第36页
        2.2.6 Western Blot相关缓冲液第36-38页
    2.3 实验技术和方法第38-50页
        2.3.1 细胞培养第38页
        2.3.2 流式细胞术第38-39页
        2.3.3 Luciferase荧光素酶活性测定第39页
        2.3.4 质粒小量提取第39-40页
        2.3.5 脂质体PEI转染第40页
        2.3.6 小量核抽提NE第40-41页
        2.3.7 核分级抽提Modified Nuclear Fractionation第41页
        2.3.8 盐浓度透析第41-42页
        2.3.9 免疫共沉淀IP第42页
        2.3.10 Western Blot第42-43页
        2.3.11 MTT实验第43-44页
        2.3.12 细胞周期第44页
        2.3.13 Annexin V-FITC细胞凋亡实验第44-45页
        2.3.14 SILAC (stable isotopic labelling amino acid in cell)第45页
        2.3.15 酸提法提组蛋白第45-46页
        2.3.16 溶液中酶解FASP第46-47页
        2.3.17 C18除盐第47页
        2.3.18 试剂盒法提RNA第47-48页
        2.3.19 反转录第48页
        2.3.20 qRT-PCR第48-50页
第三章 结果与讨论第50-69页
    3.1 关于多种HIV潜伏激活剂化合物的筛选第50-53页
        3.1.1 黄酮类化合物的筛选第50-53页
    3.2 LC431对潜伏期HIV转录激活呈时间和浓度依赖性第53-55页
    3.3 LC431协同Prostratin、JQ1对潜伏期HIV有激活作用第55-56页
    3.4 LC431引起的潜伏期HIV再激活可以被iCDK9所抑制第56-57页
    3.6 LC431处理后P-TEFb复合物的动态变化第57-60页
        3.6.1 LC431可以将P-TEFb从7SK snRNP中释放出来第57-58页
        3.6.2 从7SK snRNP释放出来的P-TEFb没有被Tat募集组装入SEC复合物第58-59页
        3.6.3 从7SK snRNP释放出来的P-TEFb也没有被Brd4募集第59-60页
    3.7 LC431是组蛋白去乙酰化酶抑制剂第60-63页
        3.7.1 PI3K抑制剂LY294002可以抑制LC431的潜伏期HIV再激活作用第60-62页
        3.7.2 LC431可能是组蛋白去乙酰化酶抑制剂第62-63页
    3.8 LC431具有抗肿瘤活性第63-66页
        3.8.1 Parp切割第64-66页
        3.8.2 细胞凋亡的检测第66页
    3.9 结果与讨论第66-69页
参考文献第69-79页
致谢第79页

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