英文缩略对照表 | 第10-12页 |
摘要 | 第12-14页 |
Abstract | 第14-15页 |
第一章 前言 | 第16-31页 |
1.1 HIV及其治疗 | 第16-19页 |
1.1.1 HIV与AIDS | 第16页 |
1.1.2 高效抗逆转录病毒疗法HAART | 第16-17页 |
1.1.3 艾滋病治疗新疗法——shock & kill | 第17-19页 |
1.2 真核生物基因转录 | 第19-25页 |
1.2.1 RNA聚合酶 | 第19-20页 |
1.2.2 正性转录延伸因子P-TEFb及其复合物 | 第20-25页 |
1.3 黄酮类母核化合物 | 第25-26页 |
1.4 组蛋白、组蛋白去乙酰化酶和组蛋白去乙酰化酶抑制剂 | 第26-30页 |
1.4.1 组蛋白Histone | 第26-27页 |
1.4.2 组蛋白乙酰化 | 第27-28页 |
1.4.3 组蛋白去乙酰化酶抑制剂HDACi | 第28-30页 |
1.5 本课题研究目的与意义 | 第30-31页 |
第二章 实验材料和方法 | 第31-50页 |
2.1 实验试剂、药品、仪器 | 第31-33页 |
2.1.1 细胞株、质粒 | 第31页 |
2.1.2 主要试剂和材料 | 第31-32页 |
2.1.3 主要实验仪器和耗材 | 第32-33页 |
2.2 常用溶液配方 | 第33-38页 |
2.2.1 细胞培养相关溶液 | 第33-34页 |
2.2.2 核抽提缓冲液配制 | 第34-35页 |
2.2.3 全细胞裂解液 | 第35页 |
2.2.4 免疫共沉淀IP溶液配制 | 第35-36页 |
2.2.5 SDS-PAGE蛋白胶配制 | 第36页 |
2.2.6 Western Blot相关缓冲液 | 第36-38页 |
2.3 实验技术和方法 | 第38-50页 |
2.3.1 细胞培养 | 第38页 |
2.3.2 流式细胞术 | 第38-39页 |
2.3.3 Luciferase荧光素酶活性测定 | 第39页 |
2.3.4 质粒小量提取 | 第39-40页 |
2.3.5 脂质体PEI转染 | 第40页 |
2.3.6 小量核抽提NE | 第40-41页 |
2.3.7 核分级抽提Modified Nuclear Fractionation | 第41页 |
2.3.8 盐浓度透析 | 第41-42页 |
2.3.9 免疫共沉淀IP | 第42页 |
2.3.10 Western Blot | 第42-43页 |
2.3.11 MTT实验 | 第43-44页 |
2.3.12 细胞周期 | 第44页 |
2.3.13 Annexin V-FITC细胞凋亡实验 | 第44-45页 |
2.3.14 SILAC (stable isotopic labelling amino acid in cell) | 第45页 |
2.3.15 酸提法提组蛋白 | 第45-46页 |
2.3.16 溶液中酶解FASP | 第46-47页 |
2.3.17 C18除盐 | 第47页 |
2.3.18 试剂盒法提RNA | 第47-48页 |
2.3.19 反转录 | 第48页 |
2.3.20 qRT-PCR | 第48-50页 |
第三章 结果与讨论 | 第50-69页 |
3.1 关于多种HIV潜伏激活剂化合物的筛选 | 第50-53页 |
3.1.1 黄酮类化合物的筛选 | 第50-53页 |
3.2 LC431对潜伏期HIV转录激活呈时间和浓度依赖性 | 第53-55页 |
3.3 LC431协同Prostratin、JQ1对潜伏期HIV有激活作用 | 第55-56页 |
3.4 LC431引起的潜伏期HIV再激活可以被iCDK9所抑制 | 第56-57页 |
3.6 LC431处理后P-TEFb复合物的动态变化 | 第57-60页 |
3.6.1 LC431可以将P-TEFb从7SK snRNP中释放出来 | 第57-58页 |
3.6.2 从7SK snRNP释放出来的P-TEFb没有被Tat募集组装入SEC复合物 | 第58-59页 |
3.6.3 从7SK snRNP释放出来的P-TEFb也没有被Brd4募集 | 第59-60页 |
3.7 LC431是组蛋白去乙酰化酶抑制剂 | 第60-63页 |
3.7.1 PI3K抑制剂LY294002可以抑制LC431的潜伏期HIV再激活作用 | 第60-62页 |
3.7.2 LC431可能是组蛋白去乙酰化酶抑制剂 | 第62-63页 |
3.8 LC431具有抗肿瘤活性 | 第63-66页 |
3.8.1 Parp切割 | 第64-66页 |
3.8.2 细胞凋亡的检测 | 第66页 |
3.9 结果与讨论 | 第66-69页 |
参考文献 | 第69-79页 |
致谢 | 第79页 |