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靶向锚定于树突状细胞的新型HBV疫苗研究

论文创新点第5-9页
中文摘要第9-11页
Abstract第11-12页
1 引言第13-33页
    1.1 研究背景第13-29页
        1.1.1 乙型肝炎病毒的发现及其本质第13-15页
        1.1.2 HBV的特点和流行病学分布第15-18页
            1.1.2.1 HBV简介第15-17页
            1.1.2.2 HBV的受体第17-18页
            1.1.2.3 HBV的分型和流行病学分布第18页
        1.1.3 HBV的临床研究现状第18-21页
            1.1.3.1 HBV感染的血清学研究第18-19页
            1.1.3.2 HBV的病理特征第19-21页
        1.1.4 HBV的治疗和预防第21-26页
            1.1.4.1 HBV的治疗第21-23页
            1.1.4.2 HBV疫苗的开发第23-26页
        1.1.5 DC的发现和功能第26-28页
        1.1.6 DC细胞表面受体DEC205第28-29页
    1.2 研究目的和意义第29-32页
    1.3 研究方法和内容第32-33页
2 材料与方法第33-46页
    2.1 材料第33-38页
        2.1.1 细胞株、菌种及SPF级小鼠第33页
        2.1.2 质粒第33页
        2.1.3 工具酶、Marker、化学试剂、抗体、试剂盒等第33-34页
        2.1.4 培养基第34页
            2.1.4.1 细菌培养基第34页
            2.1.4.2 细胞培养基第34页
        2.1.5 缓冲液第34-36页
        2.1.6 实验仪器第36-37页
        2.1.7 T细胞特异性结合多肽预测第37页
        2.1.8 引物第37-38页
    2.2 方法第38-46页
        2.2.1 质粒提取及浓度检测第38页
        2.2.2 感受态细胞制备第38页
        2.2.3 感受态细胞转化第38页
        2.2.4 放线菌基因组DNA提取第38-39页
        2.2.5 聚合酶链式反应(PCR)第39-40页
        2.2.6 DNA胶回收第40页
        2.2.7 PCR产物连接T载体第40页
        2.2.8 酶切反应与连接反应第40页
        2.2.9 DNA电泳和蛋白电泳第40-41页
        2.2.10 Western blot第41-42页
        2.2.11 his标签蛋白表达、纯化和复性第42页
        2.2.12 抗体的纯化和生物素化第42-43页
        2.2.13 免疫荧光细胞化学实验第43-44页
        2.2.14 小鼠皮下注射及采血第44页
        2.2.15 小鼠高压水动力尾静脉注射第44页
        2.2.16 酶联免疫反应Elisa第44页
        2.2.17 酶联免疫斑点Elispot第44-45页
        2.2.18 统计学分析第45-46页
3 结果第46-64页
    3.1 重组蛋白的表达、纯化及复性第46-49页
        3.1.1 构建pET-his突变质粒第46页
        3.1.2 重组质粒的构建第46-47页
        3.1.3 融合蛋白的表达、纯化及复性第47-49页
    3.2 抗体的生物素化第49-51页
    3.3 靶向疫苗复合物与小鼠CD205体外结合实验第51页
    3.4 小鼠的免疫接种、尾静脉注射及各组免疫效果比较第51-64页
        3.4.1 preS-cSA融合蛋白在C57BL/6小鼠中的免疫保护作用第51-53页
        3.4.2 靶向锚定于DC的preS-cSA融合蛋白在BALB/c小鼠中的免疫保护作用第53-57页
            3.4.2.1 靶向锚定于DC的preS-cSA融合蛋白激活的体液免疫反应第54-56页
            3.4.2.2 靶向锚定于DC的preS-cSA融合蛋白与非靶向融合蛋白的免疫保护作用比较第56-57页
        3.4.3 靶向锚定于DC的preS-cSA融合蛋白激活的细胞免疫反应第57-60页
        3.4.4 靶向锚定于DC的tCore-cSA融合蛋白的免疫保护作用第60-61页
        3.4.5 靶向锚定于DC的疫苗对HBV感染的治疗作用第61-64页
4 讨论第64-72页
5 展望第72-75页
参考文献第75-84页
致谢第84页

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