| 中文摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 缩略词表 | 第6-10页 |
| 第一部分 前言 | 第10-21页 |
| 1.1 蛋白质磷酸化和去磷酸化 | 第10-13页 |
| 1.1.1 蛋白质磷酸化的主要类型与功能 | 第11页 |
| 1.1.2 蛋白质磷酸化的分子机制 | 第11-13页 |
| 1.1.3 蛋白质磷酸化分析发展现状及今后趋势 | 第13页 |
| 1.2 蛋白磷酸酶 | 第13-16页 |
| 1.2.1 蛋白磷酸酶家族简介 | 第13-15页 |
| 1.2.2 丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶 | 第15页 |
| 1.2.3 蛋白磷酸酶1(PP1) | 第15-16页 |
| 1.3 生长素极性运输 | 第16-21页 |
| 1.3.1 生长素输出载体PIN蛋白 | 第17-18页 |
| 1.3.2 生长素输出载体MDR/PGP蛋白 | 第18-19页 |
| 1.3.3 生长素输入载体AUX/LAXs | 第19-21页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第21-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.1.1 拟南芥 | 第21页 |
| 2.1.2 菌种及载体 | 第21页 |
| 2.1.3 常用培养基配方 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-33页 |
| 2.2.1 拟南芥培养 | 第21-22页 |
| 2.2.2 拟南芥无菌苗培养 | 第22页 |
| 2.2.3 载体构建 | 第22-25页 |
| 2.2.3.1 Gateway法 | 第22-23页 |
| 2.2.3.2 酶切酶连法 | 第23页 |
| 2.2.3.3 目的片段的回收(Axygen胶回收试剂盒) | 第23-24页 |
| 2.2.3.4 质粒提取(质粒试剂盒) | 第24页 |
| 2.2.3.5 菌斑筛选 | 第24页 |
| 2.2.3.6 CaCl_2法制备大肠杆菌感受态 | 第24-25页 |
| 2.2.4 构建CaMV 35S强启动子下融合GFP的超表达载体 | 第25页 |
| 2.2.5 烟草叶片瞬时表达 | 第25-26页 |
| 2.2.6 酵母双杂 | 第26-28页 |
| 2.2.6.1 LiAc法制备酵母感受态: | 第26页 |
| 2.2.6.2 酵母双杂交载体构建 | 第26-27页 |
| 2.2.6.3 酵母双杂交 | 第27页 |
| 2.2.6.4 酵母显色反应(滤纸法) | 第27-28页 |
| 2.2.7 遗传关系鉴定 | 第28-30页 |
| 2.2.7.1 双突变体的构建 | 第28页 |
| 2.2.7.2 CTAB法提取DNA | 第28-29页 |
| 2.2.7.3 PCR体系 | 第29页 |
| 2.2.7.4 多突变纯合体筛选 | 第29-30页 |
| 2.2.7.5 多突变体根长统计 | 第30页 |
| 2.2.8 RNA的提取 | 第30-31页 |
| 2.2.9 cDNA第一链的合成 | 第31页 |
| 2.2.10 RT-PCR | 第31页 |
| 2.2.11 qRT-PCR | 第31-32页 |
| 2.2.12 GFP标记的三突变体筛选及其观察 | 第32-33页 |
| 第三部分 实验结果 | 第33-46页 |
| 3.1 TOPPs家族各成员主要定位在细胞膜及细胞核上 | 第33-34页 |
| 3.2 TOPP1、TOPP3、TOPP4、TOPP7与PIN1蛋白在体外有相互作用 | 第34-35页 |
| 3.3 TOPPs T-DNA单突变体植株 | 第35-39页 |
| 3.3.1 各T-DNA单突变体的插入位点 | 第35-36页 |
| 3.3.2 TOPPs T-DNA单突变体的筛选与表型鉴定 | 第36-38页 |
| 3.3.3 单突变体根长对外源IAA的敏感程度与野生型一致 | 第38-39页 |
| 3.4 TOPPs双突变体及多突变体植株 | 第39-45页 |
| 3.4.1 双突变体与多突变体的构建、筛选与表型鉴定 | 第39-41页 |
| 3.4.2 TOPPs多突变体中各TOPP转录水平检测 | 第41-42页 |
| 3.4.3 多突变体根长对外源IAA的敏感程度与野生型一致 | 第42-43页 |
| 3.4.4 多突变体根长对外源GA、PAC的敏感程度与野生型一致 | 第43-45页 |
| 3.5 topp2/4-2/6和topp4-2/6/7三突变体中PIN2、PIN3、PIN7的定位没有发生变化 | 第45-46页 |
| 第四部分 讨论 | 第46-48页 |
| 4.1 TOPPs T-DNA插入单突变体与多突变体没有明显表型 | 第46页 |
| 4.2 TOPPs家族成员之间存在功能冗余性 | 第46-47页 |
| 4.3 TOPPs作为一种磷酸酶与PIN蛋白之间的关系 | 第47页 |
| 4.4 TOPPs在调控植物生长发育中的功能有待研究 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
