| 缩写词 | 第9-10页 |
| 摘要 | 第10-13页 |
| Abstract | 第13-16页 |
| 第一章 引言 | 第17-29页 |
| 1 植物营养遗传研究进展 | 第18-20页 |
| 1.1 植物营养遗传学研究目的和意义 | 第18-19页 |
| 1.2 植物营养遗传学研究概况 | 第19-20页 |
| 2 植物基因克隆研究进展 | 第20-23页 |
| 2.1 植物基因克隆的目的和意义 | 第20页 |
| 2.2 植物基因克隆研究概况 | 第20-23页 |
| 2.2.1 植物生殖生长基因研究概况 | 第20-21页 |
| 2.2.2 植物抗病抗逆基因研究概况 | 第21-22页 |
| 2.2.3 植物材质基因研究概况 | 第22-23页 |
| 3 植物氮代谢相关基因研究进展 | 第23-26页 |
| 3.1 植物氮代谢相关基因研究的意义 | 第23页 |
| 3.2 植物硝酸还原酶基因和亚硝酸还原酶基因研究概况 | 第23-24页 |
| 3.3 植物谷氨酸脱氢酶基因研究概况 | 第24-25页 |
| 3.4 植物谷氨酰胺合成酶基因研究概况 | 第25-26页 |
| 4 植物天冬酰胺合成酶基因研究进展 | 第26-28页 |
| 4.1 植物天冬酰胺合成酶基因研究的目的和意义 | 第26页 |
| 4.2 植物天冬酰胺合成酶基因研究概况 | 第26-28页 |
| 5 本研究的内容和意义 | 第28-29页 |
| 5.1 本研究的内容 | 第28页 |
| 5.2 本研究的意义 | 第28-29页 |
| 第二章 杉木天冬酰胺合成酶基因的克隆 | 第29-48页 |
| 1 材料与方法 | 第29-40页 |
| 1.1 材料 | 第29-30页 |
| 1.1.1 植物材料 | 第29页 |
| 1.1.2 试剂材料 | 第29页 |
| 1.1.3 仪器设备 | 第29-30页 |
| 1.2 方法 | 第30-40页 |
| 1.2.1 杉木天冬酰胺合成酶基因保守片段的获取 | 第30-35页 |
| 1.2.1.1 杉木幼苗组织总RNA的提取及质量检测 | 第30页 |
| 1.2.1.2 杉木幼苗组织第一条链cDNA的合成 | 第30-31页 |
| 1.2.1.3 天冬酰胺合成酶基因引物的设计 | 第31页 |
| 1.2.1.4 天冬酰胺合成酶基因保守片段的PCR扩增 | 第31-32页 |
| 1.2.1.5 目的片段的回收、克隆和测序 | 第32-35页 |
| 1.2.2 杉木天冬酰胺合成酶基因5'RACE扩增 | 第35-38页 |
| 1.2.2.1 杉木幼苗组织总RNA的提取及质量检测 | 第35页 |
| 1.2.2.2 5'RACE cDNA的合成 | 第35-36页 |
| 1.2.2.3 5'RACE特异性引物的设计 | 第36-37页 |
| 1.2.2.4 5'RACE PCR扩增 | 第37页 |
| 1.2.2.5 目的片段的回收、克隆与测序 | 第37-38页 |
| 1.2.3 杉木天冬酰胺合成酶基因3'RACE扩增 | 第38-40页 |
| 1.2.3.1 杉木幼苗组织总RNA的提取及质量检测 | 第38页 |
| 1.2.3.2 3'RACE cDNA的合成 | 第38-39页 |
| 1.2.3.3 3'RACE特异性引物的设计 | 第39页 |
| 1.2.3.4 3'RACE PCR扩增 | 第39-40页 |
| 1.2.3.5 目的片段的回收、克隆与测序 | 第40页 |
| 1.2.4 杉木天冬酰胺合成酶基因序列拼接及编码框验证 | 第40页 |
| 1.2.4.1 序列拼接及分析 | 第40页 |
| 1.2.4.2 编码框验证 | 第40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-47页 |
| 2.1 杉木总RNA的提取 | 第40-41页 |
| 2.2 杉木天冬酰胺合成酶基因保守片段的获取 | 第41-42页 |
| 2.3 杉木天冬酰胺合成酶基因3'端的获取 | 第42-43页 |
| 2.4 杉木天冬酰胺合成酶基因5'端的获取 | 第43-44页 |
| 2.5 杉木天冬酰胺合成酶基因全长序列拼接及编码框验证 | 第44-47页 |
| 2.5.1 杉木天冬酰胺合成酶基因全长序列拼接及分析 | 第44-46页 |
| 2.5.2 杉木天冬酰胺合成酶基因编码框验证 | 第46-47页 |
| 3 小结与讨论 | 第47-48页 |
| 第三章 杉木天冬酰胺合成酶基因的生物信息学分析 | 第48-64页 |
| 1 材料与方法 | 第48-49页 |
| 1.1 材料 | 第48页 |
| 1.2 方法 | 第48-49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-62页 |
| 2.1 杉木ASN1蛋白的生物信息学分析 | 第49-55页 |
| 2.1.1 杉木ASN1蛋白的理化性质预测与分析 | 第49页 |
| 2.1.2 杉木ASN1蛋白的信号肽预测 | 第49-50页 |
| 2.1.3 杉木ASN1蛋白的亚细胞定位预测 | 第50-51页 |
| 2.1.4 杉木ASN1蛋白的跨膜结构预测 | 第51页 |
| 2.1.5 杉木ASN1蛋白的磷酸化结构预测 | 第51-52页 |
| 2.1.6 杉木ASN1蛋白的卷曲螺旋结构预测 | 第52-53页 |
| 2.1.7 杉木ASN1蛋白的二级结构预测 | 第53页 |
| 2.1.8 杉木ASN1蛋白的三级结构预测 | 第53-54页 |
| 2.1.9 杉木ASN1蛋白的功能预测 | 第54-55页 |
| 2.1.10 杉木ASN1蛋白基因进化树分析 | 第55页 |
| 2.2 杉木ASN2蛋白的生物信息学分析 | 第55-62页 |
| 2.2.1 杉木ASN2蛋白的理化性质预测与分析 | 第55-56页 |
| 2.2.2 杉木ASN2蛋白的信号肽预测 | 第56页 |
| 2.2.3 杉木ASN2蛋白的亚细胞定位预测 | 第56-57页 |
| 2.2.4 杉木ASN2蛋白的跨膜结构预测 | 第57页 |
| 2.2.5 杉木ASN2蛋白的磷酸化结构预测 | 第57-58页 |
| 2.2.6 杉木ASN2蛋白的卷曲螺旋结构预测 | 第58-59页 |
| 2.2.7 杉木ASN2蛋白的二级结构预测 | 第59-60页 |
| 2.2.8 杉木ASN2蛋白的三级结构预测 | 第60-61页 |
| 2.2.9 杉木ASN2蛋白的功能预测 | 第61-62页 |
| 2.2.10 杉木ASN2蛋白基因进化树分析 | 第62页 |
| 3 小结与讨论 | 第62-64页 |
| 第四章 不同生长条件杉木天冬酰胺合成酶基因的定量表达分析 | 第64-74页 |
| 1 材料与方法 | 第64-67页 |
| 1.1 试验材料 | 第64页 |
| 1.2 方法 | 第64-67页 |
| 1.2.1 种子萌发处理方法 | 第64页 |
| 1.2.2 杉木幼苗胁迫处理及取样 | 第64-66页 |
| 1.2.2.1 杉木种子生长发育过程取样 | 第64页 |
| 1.2.2.2 干旱胁迫处理及取样 | 第64-65页 |
| 1.2.2.3 铝胁迫处理及取样 | 第65页 |
| 1.2.2.4 光照和暗胁迫处理及取样 | 第65-66页 |
| 1.2.3 荧光定量表达试验方法 | 第66-67页 |
| 1.2.3.1 不同处理杉木幼苗总RNA提取及cDNA合成 | 第66页 |
| 1.2.3.2 实时荧光定量PCR | 第66-67页 |
| 2 结果与分析 | 第67-72页 |
| 2.1 内参基因β-actin和目的基因杉木ASN的特异性扩增 | 第67-69页 |
| 2.2 不同生长条件杉木ASN基因的定量表达分析 | 第69-72页 |
| 2.2.1 杉木幼苗不同生长发育阶段ASN基因的定量表达分析 | 第69-70页 |
| 2.2.2 干旱胁迫杉木幼苗ASN基因的定量表达分析 | 第70-71页 |
| 2.2.3 铝胁迫杉木幼苗ASN基因的定量表达分析 | 第71页 |
| 2.2.4 光照和暗胁迫杉木幼苗ASN基因的定量表达分析 | 第71-72页 |
| 3 小结与讨论 | 第72-74页 |
| 第五章 不同生长条件杉木天冬酰胺含量的测定分析 | 第74-81页 |
| 1 材料与方法 | 第74-76页 |
| 1.1 材料 | 第74页 |
| 1.2 方法 | 第74-76页 |
| 2 结果与分析 | 第76-79页 |
| 2.1 标准曲线的建立 | 第76页 |
| 2.2 不同生长条件杉木天冬酰胺含量的测定 | 第76-79页 |
| 2.2.1 杉木幼苗不同生长发育阶段天冬酰胺含量的测定 | 第76-77页 |
| 2.2.2 干旱胁迫杉木幼苗天冬酰胺含量的测定 | 第77-78页 |
| 2.2.3 铝胁迫天冬酰胺含量的测定 | 第78页 |
| 2.2.4 光照和暗胁迫天冬酰胺含量的测定 | 第78-79页 |
| 3 小结与讨论 | 第79-81页 |
| 第六章 总结与展望 | 第81-84页 |
| 1 杉木幼苗天冬酰胺合成酶基因的克隆 | 第81页 |
| 2 杉木幼苗天冬酰胺合成酶基因的生物信息学分析 | 第81-82页 |
| 3 杉木幼苗不同条件天冬酰胺合成酶基因表达量与天冬酰胺含量的关系 | 第82-83页 |
| 后续研究展望 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-91页 |
| 附录 | 第91-92页 |
| 1. 杉木天冬酰胺合成酶基因序列比对结果 | 第91页 |
| 2. 比对结果中相应物种同源基因序列登录GenBank信息 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
