中文摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
前言 | 第17-21页 |
第一部分 清浊与“清浊相干”理论 | 第21-28页 |
1. 清浊概念 | 第21-22页 |
1.1. 清浊是《内经》基本概念 | 第21页 |
1.2. 清浊可用作指一种物质 | 第21-22页 |
1.3. 清浊是相对的 | 第22页 |
2. 分清泌浊体现了体内的物质代谢方式 | 第22-25页 |
2.1. 分清泌浊的源流 | 第22-23页 |
2.2. 分清泌浊涉及脏腑众多,肾为重要枢机之一 | 第23-25页 |
3.“清浊相干”是分清泌浊失司的中医病理学概念 | 第25-26页 |
4.“清浊相干”与外泌体 | 第26-28页 |
4.1. 外泌体广泛存在于精血津液中 | 第26-27页 |
4.2. 可用中医基础理论预测外泌体的运行途径及生理功能 | 第27-28页 |
第二部分 肾间质纤维化是“清浊相干”重要疾病之一,且与尿外泌体关系密切 | 第28-33页 |
1. 肾间质纤维化的流行病学及诊治 | 第28页 |
2. 肾间质纤维化是“清浊相干”重要疾病之一 | 第28-31页 |
2.1.“清浊相干”是肾间质纤维化重要病机 | 第28-29页 |
2.2. 肾间质纤维化“清浊相干”临床表现 | 第29-30页 |
2.3. 采用升清降浊法治疗肾间质纤维化疗效确切 | 第30-31页 |
3. 肾间质纤维化与尿外泌体关系密切 | 第31-33页 |
3.1. 外泌体乃肾损伤早期修复与纤维化诱导新途径 | 第31-32页 |
3.2. 尿外泌体能够反映肾单位及尿道细胞损伤与病理进程 | 第32页 |
3.3. 外泌体在纤维化病理过程中,起着关键调控作用 | 第32-33页 |
第三部分 尿外泌体富集与鉴定技术的建立 | 第33-52页 |
1. 材料和方法 | 第34-43页 |
1.1. 尿液标本的收集 | 第34-35页 |
1.2. 实验中涉及的主要设备及试剂 | 第35-36页 |
1.2.1. 主要仪器设备 | 第35页 |
1.2.2. 主要的材料和试剂 | 第35-36页 |
1.3. 方法 | 第36-43页 |
1.3.1. 聚乙二醇沉淀剂母液的配制 | 第36-37页 |
1.3.2. 尿外泌体富集、鉴定及荷载RNA检测 | 第37-43页 |
1.3.3. 数据处理 | 第43页 |
2. 结果 | 第43-48页 |
2.1. 一般资料 | 第43页 |
2.2. 尿外泌体沉淀 | 第43-44页 |
2.3. 透射电子显微镜(TEM)结果 | 第44页 |
2.4. 尿外泌体内源性蛋白表达水平的检测 | 第44-46页 |
2.4.1. 尿外泌体总蛋白考马斯亮蓝染色 | 第44-45页 |
2.4.2. Western blot检测外泌体标记蛋白 | 第45-46页 |
2.5. 纳米颗粒跟踪分析仪(NTA)检测粒径分布 | 第46页 |
2.6. q RT-PCR检测β-actin m RNA和U6 | 第46-48页 |
2.6.1. q RT-PCR溶解曲线、扩增曲线及电泳结果 | 第46-48页 |
2.6.2. β-actin和U6 Ct值 | 第48页 |
3. 讨论 | 第48-52页 |
第四部分 肾间质纤维化相关尿外泌体源RNA的检测及其意义 | 第52-73页 |
1. 材料和方法 | 第53-59页 |
1.1. 主要设备和试剂同第三部分 | 第53页 |
1.2. 病例选取和标本收集 | 第53-54页 |
1.3. 肾间质纤维化相关尿外泌体源RNA的检测 | 第54-59页 |
1.3.1. 尿外泌体的富集、鉴定 | 第55-56页 |
1.3.2. 尿外泌体荷载RNA的检测 | 第56-59页 |
1.4. 统计学处理 | 第59页 |
2. 结果 | 第59-70页 |
2.1. 临床资料 | 第59-61页 |
2.2. 尿外泌体富集及鉴定结果 | 第61页 |
2.3. q RT-PCR检测外泌体源RNA水平 | 第61-62页 |
2.4. 肾间质纤维化尿外泌体源RNA表达情况 | 第62-63页 |
2.5. 诊断价值分析 | 第63-65页 |
2.6. 肾间质纤维化患者外泌体源mi R-29c、mi R-21、E-cadherin和vimentin与临床指标的相关性分析 | 第65-69页 |
2.7. 不同纤维化程度病人间尿外泌体源mi R-29c、mi R-21、E-cadherin和vimentin相对含量比较 | 第69-70页 |
3. 讨论 | 第70-73页 |
结语 | 第73-74页 |
创新性评价 | 第74-75页 |
1. 理论创新 | 第74页 |
2. 方法创新 | 第74页 |
3. 技术创新 | 第74-75页 |
问题与展望 | 第75-77页 |
结论 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-89页 |
综述 肾纤维化的血、尿生物标志物研究进展 | 第89-100页 |
参考文献 | 第95-100页 |
附件1:在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果 | 第100-102页 |