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基于“清浊相干”理论的肾间质纤维化尿外泌体源RNA液体活检指标研究

中文摘要第7-10页
Abstract第10-13页
前言第17-21页
第一部分 清浊与“清浊相干”理论第21-28页
    1. 清浊概念第21-22页
        1.1. 清浊是《内经》基本概念第21页
        1.2. 清浊可用作指一种物质第21-22页
        1.3. 清浊是相对的第22页
    2. 分清泌浊体现了体内的物质代谢方式第22-25页
        2.1. 分清泌浊的源流第22-23页
        2.2. 分清泌浊涉及脏腑众多,肾为重要枢机之一第23-25页
    3.“清浊相干”是分清泌浊失司的中医病理学概念第25-26页
    4.“清浊相干”与外泌体第26-28页
        4.1. 外泌体广泛存在于精血津液中第26-27页
        4.2. 可用中医基础理论预测外泌体的运行途径及生理功能第27-28页
第二部分 肾间质纤维化是“清浊相干”重要疾病之一,且与尿外泌体关系密切第28-33页
    1. 肾间质纤维化的流行病学及诊治第28页
    2. 肾间质纤维化是“清浊相干”重要疾病之一第28-31页
        2.1.“清浊相干”是肾间质纤维化重要病机第28-29页
        2.2. 肾间质纤维化“清浊相干”临床表现第29-30页
        2.3. 采用升清降浊法治疗肾间质纤维化疗效确切第30-31页
    3. 肾间质纤维化与尿外泌体关系密切第31-33页
        3.1. 外泌体乃肾损伤早期修复与纤维化诱导新途径第31-32页
        3.2. 尿外泌体能够反映肾单位及尿道细胞损伤与病理进程第32页
        3.3. 外泌体在纤维化病理过程中,起着关键调控作用第32-33页
第三部分 尿外泌体富集与鉴定技术的建立第33-52页
    1. 材料和方法第34-43页
        1.1. 尿液标本的收集第34-35页
        1.2. 实验中涉及的主要设备及试剂第35-36页
            1.2.1. 主要仪器设备第35页
            1.2.2. 主要的材料和试剂第35-36页
        1.3. 方法第36-43页
            1.3.1. 聚乙二醇沉淀剂母液的配制第36-37页
            1.3.2. 尿外泌体富集、鉴定及荷载RNA检测第37-43页
            1.3.3. 数据处理第43页
    2. 结果第43-48页
        2.1. 一般资料第43页
        2.2. 尿外泌体沉淀第43-44页
        2.3. 透射电子显微镜(TEM)结果第44页
        2.4. 尿外泌体内源性蛋白表达水平的检测第44-46页
            2.4.1. 尿外泌体总蛋白考马斯亮蓝染色第44-45页
            2.4.2. Western blot检测外泌体标记蛋白第45-46页
        2.5. 纳米颗粒跟踪分析仪(NTA)检测粒径分布第46页
        2.6. q RT-PCR检测β-actin m RNA和U6第46-48页
            2.6.1. q RT-PCR溶解曲线、扩增曲线及电泳结果第46-48页
            2.6.2. β-actin和U6 Ct值第48页
    3. 讨论第48-52页
第四部分 肾间质纤维化相关尿外泌体源RNA的检测及其意义第52-73页
    1. 材料和方法第53-59页
        1.1. 主要设备和试剂同第三部分第53页
        1.2. 病例选取和标本收集第53-54页
        1.3. 肾间质纤维化相关尿外泌体源RNA的检测第54-59页
            1.3.1. 尿外泌体的富集、鉴定第55-56页
            1.3.2. 尿外泌体荷载RNA的检测第56-59页
        1.4. 统计学处理第59页
    2. 结果第59-70页
        2.1. 临床资料第59-61页
        2.2. 尿外泌体富集及鉴定结果第61页
        2.3. q RT-PCR检测外泌体源RNA水平第61-62页
        2.4. 肾间质纤维化尿外泌体源RNA表达情况第62-63页
        2.5. 诊断价值分析第63-65页
        2.6. 肾间质纤维化患者外泌体源mi R-29c、mi R-21、E-cadherin和vimentin与临床指标的相关性分析第65-69页
        2.7. 不同纤维化程度病人间尿外泌体源mi R-29c、mi R-21、E-cadherin和vimentin相对含量比较第69-70页
    3. 讨论第70-73页
结语第73-74页
创新性评价第74-75页
    1. 理论创新第74页
    2. 方法创新第74页
    3. 技术创新第74-75页
问题与展望第75-77页
结论第77-78页
参考文献第78-89页
综述 肾纤维化的血、尿生物标志物研究进展第89-100页
    参考文献第95-100页
附件1:在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果第100-102页

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