化学修饰对Trigger Factor分子伴侣功能的影响
| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 第1章 绪论 | 第8-23页 |
| 1.1 课题来源 | 第8页 |
| 1.2 细胞内蛋白稳态的维持 | 第8-9页 |
| 1.3 分子伴侣简介 | 第9-12页 |
| 1.4 TF结构组成与功能简介 | 第12-18页 |
| 1.4.1 TF的结构与结构域 | 第12-14页 |
| 1.4.2 TF与核糖体、新生肽链的相互作用 | 第14-16页 |
| 1.4.3 TF的生理功能 | 第16-18页 |
| 1.5 TF与其他伴侣因子的关系 | 第18-20页 |
| 1.6 TF与其他核糖体结合因子的协调 | 第20-21页 |
| 1.7 蛋白化学修饰简介 | 第21页 |
| 1.8 主要研究内容及意义 | 第21-22页 |
| 1.9 本文技术路线 | 第22-23页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第23-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 原核表达系统 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂及缓冲液 | 第23页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第23-24页 |
| 2.1.4 制备突变体所需引物 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-30页 |
| 2.2.1 重组体的构建 | 第25页 |
| 2.2.2 PCR制备突变体质粒 | 第25-26页 |
| 2.2.3 突变体蛋白的纯化 | 第26-27页 |
| 2.2.4 突变体蛋白的化学修饰与鉴定 | 第27-28页 |
| 2.2.5 TF突变体蛋白的结构表征 | 第28页 |
| 2.2.6 TF突变体蛋白分子伴侣活性的检测 | 第28-30页 |
| 2.3 本章小节 | 第30-31页 |
| 第3章 TF突变体蛋白的制备、修饰及结构表征 | 第31-42页 |
| 3.1 TF突变体设计 | 第31-32页 |
| 3.2 TF半胱氨酸残基点突变体制备 | 第32-35页 |
| 3.2.1 利用PCR制得突变体序列 | 第32-33页 |
| 3.2.2 突变体蛋白的纯化 | 第33-34页 |
| 3.2.3 突变体蛋白的化学修饰及检测 | 第34-35页 |
| 3.3 化学修饰蛋白圆二色光谱的检测 | 第35-38页 |
| 3.4 化学修饰蛋白TRP荧光发射光谱 | 第38-41页 |
| 3.5 本章小结 | 第41-42页 |
| 第4章 化学修饰对TF分子伴侣功能的影响 | 第42-58页 |
| 4.1 引言 | 第42页 |
| 4.2 化学修饰对TF突变体活性的影响 | 第42-56页 |
| 4.3 讨论 | 第56-57页 |
| 4.4 本章小结 | 第57-58页 |
| 结论 | 第58页 |
| 展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
