摘要 | 第3-4页 |
abstract | 第4-5页 |
第1章 前言 | 第9-21页 |
1.1 TCF7L2对少突胶质细胞发育的影响 | 第9-16页 |
1.1.1 TCF7L2在Wnt信号通路中的作用 | 第10-11页 |
1.1.2 TCF7L2/Wnt信号通路与少突胶质细胞 | 第11-13页 |
1.1.3 少突胶质细胞髓鞘化和再髓鞘化 | 第13-14页 |
1.1.4 少突胶质细胞相关疾病研究 | 第14-15页 |
1.1.5 TCF7L2研究总结 | 第15-16页 |
1.2 LncRNA在神经发育和神经系统疾病中的作用 | 第16-20页 |
1.2.1 LncRNA简介 | 第16-17页 |
1.2.2 LncRNA与神经系统发育 | 第17-18页 |
1.2.3 LncRNA与神经系统疾病 | 第18-20页 |
1.3 本论文研究意义 | 第20-21页 |
第2章 实验仪器与材料 | 第21-24页 |
2.1 实验动物 | 第21页 |
2.2 实验仪器与设备 | 第21-22页 |
2.3 试剂材料 | 第22-24页 |
第3章 实验方法 | 第24-42页 |
3.1 RNA提取 | 第24-25页 |
3.2 反转录与qPCR | 第25-26页 |
3.3 LncRNA784原位杂交 | 第26-28页 |
3.3.1 样品制备及预处理 | 第26页 |
3.3.2 BaseScope检测 | 第26-28页 |
3.4 NPC细胞培养 | 第28-33页 |
3.4.1 NPC原代培养 | 第28-29页 |
3.4.2 支原体检测 | 第29-30页 |
3.4.3 NPC传代、冻存和复苏 | 第30-31页 |
3.4.4 NPC贴壁培养和分化 | 第31-32页 |
3.4.5 细胞Brdu染色 | 第32-33页 |
3.5 慢病毒感染NPC | 第33-37页 |
3.5.1 SiRNA设计 | 第33-34页 |
3.5.2 慢病毒包装 | 第34-35页 |
3.5.3 慢病毒感染NPC | 第35-37页 |
3.6 WesternBlot实验 | 第37-40页 |
3.6.1 蛋白质提取 | 第37-38页 |
3.6.2 WesternBlot | 第38-40页 |
3.7 细胞免疫荧光染色 | 第40-42页 |
3.7.1 样品准备 | 第40页 |
3.7.2 免疫染色 | 第40-42页 |
第4章 实验结果 | 第42-57页 |
4.1 Lnc784与TCF7L2基因在小鼠体内表达情况和位置 | 第42-44页 |
4.1.1 Lnc784的蛋白编码能力分析结果 | 第42页 |
4.1.2 Lnc784与TCF7L2基因反向互补 | 第42-43页 |
4.1.3 Lnc784与TCF7L2基因在小鼠脑区中普遍表达 | 第43-44页 |
4.2 NPC原代培养 | 第44-46页 |
4.2.1 支原体检测结果 | 第44-45页 |
4.2.2 NPC免疫染色鉴定 | 第45页 |
4.2.3 NPC分化能力检测 | 第45-46页 |
4.3 病毒感染NPC | 第46-49页 |
4.3.1 病毒感染结果 | 第46-47页 |
4.3.2 感染病毒后细胞增殖情况 | 第47-49页 |
4.4 Lnc784与TCF7L2基因间调控关系 | 第49-51页 |
4.4.1 转录水平上过表达Lnc784后TCF7L2下调 | 第49-50页 |
4.4.2 转录水平上敲低Lnc784后TCF7L2上调 | 第50页 |
4.4.3 翻译水平上过表达Lnc784后TCF7L2蛋白量减少 | 第50-51页 |
4.4.4 翻译水平上敲低Lnc784后TCF7L2蛋白量增加 | 第51页 |
4.5 过表达Lnc784抑制少突胶质细胞分化 | 第51-54页 |
4.5.1 过表达Lnc784后髓鞘相关蛋白基因表达降低 | 第51-52页 |
4.5.2 过表达Lnc784后CNP+少突胶质细胞数量减少 | 第52-53页 |
4.5.3 过表达Lnc784后CNP蛋白量降低 | 第53-54页 |
4.6 敲低Lnc784促进少突胶质细胞分化 | 第54-57页 |
4.6.1 敲低Lnc784后髓鞘相关蛋白基因表达增加 | 第54页 |
4.6.2 敲低Lnc784后CNP+少突胶质细胞数量增多 | 第54-56页 |
4.6.3 敲低Lnc784后CNP蛋白量增加 | 第56-57页 |
第5章 总结与讨论 | 第57-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
附录A 引物和抗体信息 | 第66-67页 |