| 摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 符号说明 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-17页 |
| 1.1 稻米的蒸煮与食味品质 | 第9-12页 |
| 1.1.1 直链淀粉含量 | 第9-10页 |
| 1.1.2 胶稠度 | 第10-11页 |
| 1.1.3 糊化温度 | 第11页 |
| 1.1.4 淀粉粘滞性 | 第11-12页 |
| 1.2 水稻蜡质基因Wx | 第12-16页 |
| 1.2.1 Wx基因的等位变异类型 | 第13-14页 |
| 1.2.2 Wx基因的表达调控 | 第14-15页 |
| 1.2.3 Wx等位基因在育种中的应用 | 第15-16页 |
| 1.3 本研究的目的及意义 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-25页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第17页 |
| 2.2 质粒DNA的提取、酶切、连接与转化 | 第17-18页 |
| 2.3 DNA的克隆与序列分析 | 第18-19页 |
| 2.4 功能验证载体的构建 | 第19页 |
| 2.5 根瘤农杆菌介导的水稻转化 | 第19-20页 |
| 2.6 转基因水稻的检测 | 第20页 |
| 2.7 稻米样品的前处理 | 第20-21页 |
| 2.8 稻米品质的测定 | 第21-22页 |
| 2.8.1 表观直链淀粉含量的测定 | 第21页 |
| 2.8.2 胶稠度的测定 | 第21页 |
| 2.8.3 RVA谱的测定 | 第21-22页 |
| 2.8.4 食味值的测定 | 第22页 |
| 2.9 淀粉的提取 | 第22页 |
| 2.10 淀粉的去脂 | 第22页 |
| 2.11 水稻胚乳总RNA提取 | 第22-23页 |
| 2.12 第一链cDNA的获得 | 第23页 |
| 2.13 实时荧光定量RT-PCR | 第23页 |
| 2.14 蛋白的SDS-PAGE分析 | 第23-24页 |
| 2.15 GBSSI蛋白的磷酸化测序 | 第24页 |
| 2.16 GBSSI酶活的测定 | 第24页 |
| 2.17 GBSSI蛋白的同源建模 | 第24-25页 |
| 2.18 稻米及淀粉体外消化特性的测定 | 第25页 |
| 2.19 统计分析 | 第25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-42页 |
| 3.1 SNP_(10)~(C/T)的转基因功能验证 | 第25-31页 |
| 3.1.1 功能验证载体的构建 | 第25-26页 |
| 3.1.2 T_0代转基因植株的鉴定 | 第26-27页 |
| 3.1.3 转基因水稻纯系的筛选 | 第27页 |
| 3.1.4 转基因植株表型分析 | 第27-28页 |
| 3.1.5 Wx基因在转基因水稻胚乳中的表达分析 | 第28页 |
| 3.1.6 转基因稻米成熟种子中蛋白水平表达分析 | 第28-29页 |
| 3.1.7 转基因稻米理化品质的测定 | 第29-30页 |
| 3.1.8 转基因稻米淀粉粘滞性比较 | 第30-31页 |
| 3.2 利用近等基因系分析SNP_(10)~(C/T)对稻米品质的效应 | 第31-35页 |
| 3.2.1 不同背景下近等基因系的构建及鉴定 | 第31-33页 |
| 3.2.2 近等基因系稻米理化品质分析 | 第33-35页 |
| 3.2.3 近等基因系淀粉消化速率分析 | 第35页 |
| 3.3 SNP_(10)~(C/T)对基因表达和酶活的效应分析 | 第35-39页 |
| 3.3.1 Wx基因转录水平表达分析 | 第35-36页 |
| 3.3.2 蛋白水平表达分析 | 第36-37页 |
| 3.3.3 GBSSI酶活比较 | 第37-38页 |
| 3.3.4 GBSSI蛋白结构及磷酸化位点分析 | 第38-39页 |
| 3.4 SNP_(10)~(C/T)在其它Wx等位基因背景下对稻米品质的效应 | 第39-42页 |
| 3.4.1 转基因材料的创建与鉴定 | 第39-40页 |
| 3.4.2 SNP_(10)~(C/T)在Wx~(mp)背景下的效应 | 第40-41页 |
| 3.4.3 SNP_(10)~(C/T)在Wx~b背景下的效应 | 第41页 |
| 3.4.4 SNP_(10)~(C/T)在Wx~(in)背景下的效应 | 第41-42页 |
| 4 小结与讨论 | 第42-47页 |
| 4.1 小结 | 第42-43页 |
| 4.2 Wx基因SNP_(10)~(C/T)的效应分析 | 第43-45页 |
| 4.3 Wx~(lsv)与SNP_(10)~(C/T)在育种中的应用前景 | 第45-46页 |
| 4.4 研究展望 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
