| 摘要 | 第2-4页 |
| abstract | 第4-5页 |
| 引言 | 第8-9页 |
| 材料与方法 | 第9-26页 |
| 1 实验材料 | 第9-14页 |
| 1.1 研究对象 | 第9-10页 |
| 1.2 主要实验试剂 | 第10-12页 |
| 1.3 主要实验耗材 | 第12页 |
| 1.4 主要实验仪器 | 第12-13页 |
| 1.5 软件与数据库 | 第13页 |
| 1.6 统计软件和方法 | 第13-14页 |
| 2 实验方法 | 第14-26页 |
| 2.1 免疫组织化学检测步骤 | 第14页 |
| 2.2 SMAD4基因突变筛查 | 第14-17页 |
| 2.3 真核表达载体构建 | 第17-21页 |
| 2.4 Westernblot(免疫印迹)检测胰腺癌细胞系中SMAD4的蛋白表达 | 第21-22页 |
| 2.5 q-PCR检测胰腺癌细胞系中SMAD4mRNA表达量 | 第22-24页 |
| 2.6 SMAD4Y353C对细胞增殖的影响 | 第24页 |
| 2.7 伤口愈合实验检测SMAD4Y353C对细胞迁移能力的影响 | 第24-26页 |
| 结果 | 第26-36页 |
| 1 免疫组化结果 | 第26-28页 |
| 2 SMAD4基因突变筛查结果 | 第28-31页 |
| 2.1 SMAD4外显子扩增产物琼脂糖凝胶电泳结果 | 第28页 |
| 2.2 SMAD4测序结果 | 第28-31页 |
| 2.3 突变热点区错义突变位点同源性比较结果 | 第31页 |
| 2.4 PolyPhen2对SMAD4突变位点风险性预测 | 第31页 |
| 3 真核表达载体构建结果 | 第31-32页 |
| 3.1 SMAD4野生型真核表达载体构建结果 | 第31-32页 |
| 3.2 SMAD4突变型表达载体构建结果 | 第32页 |
| 4 SMAD4Y353C对SMAD4蛋白和mRNA表达的影响 | 第32-33页 |
| 5 SMAD4Y353C细胞增殖和迁移实验结果 | 第33-36页 |
| 5.1 SMAD4Y353C不影响细胞增殖 | 第33-34页 |
| 5.2 SMAD4Y353C促进细胞迁移 | 第34-36页 |
| 讨论 | 第36-38页 |
| 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-42页 |
| 综述 | 第42-54页 |
| 综述参考文献 | 第48-54页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
