| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 英文缩略词简表 | 第11-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-16页 |
| 第二章 HAMP及miR-486-3p在肺癌中的表达情况及生物信息学分析 | 第16-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-20页 |
| 2.1.1 NSCLC临床组织标本 | 第17页 |
| 2.1.2 细胞株 | 第17页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第17-18页 |
| 2.1.4 相关试剂的配制 | 第18-19页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-28页 |
| 2.2.1 临床标本及资料采集 | 第20页 |
| 2.2.2 免疫组化法检测非小细胞肺癌组织及正常肺组织中HAMP的表达 | 第20-22页 |
| 2.2.3 细胞培养 | 第22-23页 |
| 2.2.4 荧光定量PCR法检测HAMP mRNA、miR-486-3p的表达 | 第23-27页 |
| 2.2.5 生物信息学分析 | 第27-28页 |
| 2.2.6 统计学分析 | 第28页 |
| 2.3 结果 | 第28-33页 |
| 2.3.1 HAMP在非小细胞肺癌组织中的表达 | 第28-31页 |
| 2.3.2 miR-486-3p在非小细胞肺癌组织中的表达 | 第31-32页 |
| 2.3.3 HAMP mRNA及miR-486-3p在非小细胞肺癌组织中的表达比较 | 第32页 |
| 2.3.4 肺癌细胞株中HAMP mRNA及miR-486-3p表达情况 | 第32-33页 |
| 2.3.5 生物信息学预测靶点 | 第33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-37页 |
| 2.5 结论 | 第37-38页 |
| 第三章 miR-486-3p靶向调控HAMP的表达研究 | 第38-56页 |
| 3.1 实验材料 | 第38-41页 |
| 3.1.1 细胞株 | 第38-39页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第39-40页 |
| 3.1.3 相关试剂配制 | 第40-41页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第41页 |
| 3.2 实验方法 | 第41-46页 |
| 3.2.1 荧光素酶报告质粒的构建 | 第41-44页 |
| 3.2.2 双荧光素酶报告系统检测 | 第44-45页 |
| 3.2.3 miR-486-3p调控HAMP的表达 | 第45-46页 |
| 3.2.4 统计学分析 | 第46页 |
| 3.3 结果 | 第46-51页 |
| 3.3.1 荧光素酶报告质粒的构建 | 第46-48页 |
| 3.3.2 miR-486-3p靶向调控HAMP的表达 | 第48-51页 |
| 3.4 讨论 | 第51-54页 |
| 3.5 结论 | 第54-56页 |
| 第四章 miR-486-3p靶向调控HAMP对肺癌H520细胞增殖的影响及分子机制研究 | 第56-82页 |
| 4.1 实验材料 | 第57-60页 |
| 4.1.1 细胞株及血清标本 | 第57页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第57-59页 |
| 4.1.3 相关试剂配制 | 第59-60页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第60页 |
| 4.2 实验方法 | 第60-66页 |
| 4.2.1 miR-486-3p表达质粒及对照质粒的构建及稳定表达细胞株的建立 | 第60-61页 |
| 4.2.2 HAMP真核表达质粒的构建 | 第61-62页 |
| 4.2.3 Western-blot检测 | 第62-64页 |
| 4.2.4 免疫荧光试验 | 第64页 |
| 4.2.5 细胞增殖实验 | 第64-65页 |
| 4.2.6 细胞及血清中总铁的检测 | 第65-66页 |
| 4.2.7 统计学分析 | 第66页 |
| 4.3 结果 | 第66-76页 |
| 4.3.1 稳定表达miR-486-3p肺癌H520细胞株的构建 | 第66-67页 |
| 4.3.2 HAMP真核表达质粒的构建及验证 | 第67-68页 |
| 4.3.3 高表达miR-486-3p对肺癌细胞H520细胞增殖的影响 | 第68-70页 |
| 4.3.4 pIRES-neo3-Flag-HAMP瞬转H520-miR-486-3p细胞对增殖的影响 | 第70-72页 |
| 4.3.5 H520-miR-486-3p及H520-control细胞中HAMP、ferroportin表达水平及细胞总铁的检测 | 第72-75页 |
| 4.3.6 非小细胞肺癌病人血清铁检测 | 第75-76页 |
| 4.4 讨论 | 第76-81页 |
| 4.5 结论 | 第81-82页 |
| 总结论 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-90页 |
| 综述一 | 第90-100页 |
| 参考文献 | 第95-100页 |
| 综述二 | 第100-124页 |
| 参考文献 | 第115-124页 |
| 攻读博士学位期间主要的研究成果 | 第124-125页 |
| 致谢 | 第125页 |
