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组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA对肝星状细胞激活相关生物学特征的影响及其分子机制的研究

摘要第7-10页
Abstract第10-11页
第一章 绪论第13-16页
    1.1 课题来源、研究的目的和意义第13页
    1.2 国内外研究概况第13-15页
    1.3 论文的主要研究内容第15-16页
第二章 SAHA对人HSCs- LX2激活相关生物学行为及标志性分子表达的调控作用第16-25页
    2.1.材料第16页
        2.1.1 细胞,主要试剂和实验材料第16页
        2.1.2 主要仪器和设备第16页
    2.2 方法第16-20页
        2.2.1 LX2细胞系培养与SAHA处理第16-18页
        2.2.2 细胞提取总RNA及实时荧光定量PCR第18-19页
        2.2.3 WB检测α SMA,collagen I蛋白水平变化第19页
        2.2.4 EdU法检测SAHA对LX2细胞增殖情况的影响第19-20页
        2.2.5 Transwell实验检测SAHA对LX2细胞迁移能力的影响第20页
        2.2.6 统计学分析第20页
    2.3 结果第20-25页
        2.3.1 SAHA 以不同浓度处理 LX2 细胞系,CCK-8 试剂盒检测不同浓度在 LX2的增殖抑制率第20-21页
        2.3.2 比较 SAHA 在不同浓度处理 LX2 细胞 48hr 后对其形态和增殖活性的影响第21-22页
        2.3.3 SAHA对LX2细胞内蛋白乙酰化程度的影响第22-23页
        2.3.4 SAHA显著抑制HSCs激活标志性分子α SMA和collagen I的表达第23-24页
        2.3.5 SAHA抑制HSCs的增殖和迁移能力第24-25页
第三章 SAHA抑制HSCs激活的分子机制的研究第25-36页
    3.1 材料第25页
        3.1.1 主要试剂与材料第25页
        3.1.2 主要仪器和设备第25页
    3.2 方法第25-26页
        3.2.1 细胞提取总RNA第25-26页
        3.2.2 人类全转录组基因芯片检测和IPA生物学信息分析第26页
        3.2.3 芯片结果生物学信息分析第26页
        3.2.4 统计学处理第26页
    3.3 结果第26-36页
        3.3.1 SAHA作用于HSCs引起的基因差异表达第26-29页
        3.3.2 SAHA作用于HSCs引起的差异基因的生物学信息分析第29-36页
第四章 SAHA通过抑制NFκB逆转LX2细胞系的激活状态第36-46页
    4.1 主要试剂与材料第36页
    4.2 方法第36-39页
        4.2.1 qPCR和WB验证NFκB1(p50)和P65的表达情况第36页
        4.2.2 DLR检测NFκB的活性第36-37页
        4.2.3 siRNA HMGB1转染LX2细胞系检测细胞内HMGB1敲除后SAHA对NFκB的影响第37-38页
        4.2.4 SAHA处理后细胞内HMGB1的变化第38-39页
        4.2.5 统计学分析第39页
    4.3 结果第39-46页
        4.3.1.SAHA抑制HSCs的NFκB蛋白表达第39-40页
        4.3.2 SAHA抑制HSCsNFκB转录活性第40页
        4.3.3 以CY3标记的siR-NC优化LX2转染条件第40-42页
        4.3.4 由SAHA引起的NFκB抑制依赖细胞内HMGB1第42-44页
        4.3.5 SAHA抑制NFκB的转录活性依赖细胞内HMGB1第44页
        4.3.6 SAHA处理LX2后细胞内HMGB1蛋白水平无显著变化第44-45页
        4.3.7 SAHA处理LX2后细胞内HMGB1亚细胞定位第45页
        4.3.8 SAHA处理LX2后细胞内HMGB1蛋白的赖氨酸残基乙酰化程度变化第45-46页
第五章 讨论第46-50页
第六章 结论第50-51页
参考文献第51-55页
英文缩略词表第55-56页
综述第56-69页
    综述参考文献第64-69页
附录 1 引物列表第69-70页
在攻读硕士学位期间公开发表的论文与参加的项目第70-71页
    在国外刊物发表的论文第70页
    所参加的项目第70-71页
致谢第71页

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