摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
第一章 绪论 | 第13-16页 |
1.1 课题来源、研究的目的和意义 | 第13页 |
1.2 国内外研究概况 | 第13-15页 |
1.3 论文的主要研究内容 | 第15-16页 |
第二章 SAHA对人HSCs- LX2激活相关生物学行为及标志性分子表达的调控作用 | 第16-25页 |
2.1.材料 | 第16页 |
2.1.1 细胞,主要试剂和实验材料 | 第16页 |
2.1.2 主要仪器和设备 | 第16页 |
2.2 方法 | 第16-20页 |
2.2.1 LX2细胞系培养与SAHA处理 | 第16-18页 |
2.2.2 细胞提取总RNA及实时荧光定量PCR | 第18-19页 |
2.2.3 WB检测α SMA,collagen I蛋白水平变化 | 第19页 |
2.2.4 EdU法检测SAHA对LX2细胞增殖情况的影响 | 第19-20页 |
2.2.5 Transwell实验检测SAHA对LX2细胞迁移能力的影响 | 第20页 |
2.2.6 统计学分析 | 第20页 |
2.3 结果 | 第20-25页 |
2.3.1 SAHA 以不同浓度处理 LX2 细胞系,CCK-8 试剂盒检测不同浓度在 LX2的增殖抑制率 | 第20-21页 |
2.3.2 比较 SAHA 在不同浓度处理 LX2 细胞 48hr 后对其形态和增殖活性的影响 | 第21-22页 |
2.3.3 SAHA对LX2细胞内蛋白乙酰化程度的影响 | 第22-23页 |
2.3.4 SAHA显著抑制HSCs激活标志性分子α SMA和collagen I的表达 | 第23-24页 |
2.3.5 SAHA抑制HSCs的增殖和迁移能力 | 第24-25页 |
第三章 SAHA抑制HSCs激活的分子机制的研究 | 第25-36页 |
3.1 材料 | 第25页 |
3.1.1 主要试剂与材料 | 第25页 |
3.1.2 主要仪器和设备 | 第25页 |
3.2 方法 | 第25-26页 |
3.2.1 细胞提取总RNA | 第25-26页 |
3.2.2 人类全转录组基因芯片检测和IPA生物学信息分析 | 第26页 |
3.2.3 芯片结果生物学信息分析 | 第26页 |
3.2.4 统计学处理 | 第26页 |
3.3 结果 | 第26-36页 |
3.3.1 SAHA作用于HSCs引起的基因差异表达 | 第26-29页 |
3.3.2 SAHA作用于HSCs引起的差异基因的生物学信息分析 | 第29-36页 |
第四章 SAHA通过抑制NFκB逆转LX2细胞系的激活状态 | 第36-46页 |
4.1 主要试剂与材料 | 第36页 |
4.2 方法 | 第36-39页 |
4.2.1 qPCR和WB验证NFκB1(p50)和P65的表达情况 | 第36页 |
4.2.2 DLR检测NFκB的活性 | 第36-37页 |
4.2.3 siRNA HMGB1转染LX2细胞系检测细胞内HMGB1敲除后SAHA对NFκB的影响 | 第37-38页 |
4.2.4 SAHA处理后细胞内HMGB1的变化 | 第38-39页 |
4.2.5 统计学分析 | 第39页 |
4.3 结果 | 第39-46页 |
4.3.1.SAHA抑制HSCs的NFκB蛋白表达 | 第39-40页 |
4.3.2 SAHA抑制HSCsNFκB转录活性 | 第40页 |
4.3.3 以CY3标记的siR-NC优化LX2转染条件 | 第40-42页 |
4.3.4 由SAHA引起的NFκB抑制依赖细胞内HMGB1 | 第42-44页 |
4.3.5 SAHA抑制NFκB的转录活性依赖细胞内HMGB1 | 第44页 |
4.3.6 SAHA处理LX2后细胞内HMGB1蛋白水平无显著变化 | 第44-45页 |
4.3.7 SAHA处理LX2后细胞内HMGB1亚细胞定位 | 第45页 |
4.3.8 SAHA处理LX2后细胞内HMGB1蛋白的赖氨酸残基乙酰化程度变化 | 第45-46页 |
第五章 讨论 | 第46-50页 |
第六章 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
英文缩略词表 | 第55-56页 |
综述 | 第56-69页 |
综述参考文献 | 第64-69页 |
附录 1 引物列表 | 第69-70页 |
在攻读硕士学位期间公开发表的论文与参加的项目 | 第70-71页 |
在国外刊物发表的论文 | 第70页 |
所参加的项目 | 第70-71页 |
致谢 | 第71页 |