| 致谢 | 第5-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 1 引言 | 第12-19页 |
| 1.1 研究背景与意义 | 第12-14页 |
| 1.2 国内外研究现状 | 第14-16页 |
| 1.3 荧光共振能量转移-荧光相关光谱(FERT-FCS)技术及应用 | 第16-17页 |
| 1.4 实验设计与技术路线 | 第17-19页 |
| 2 实验材料 | 第19-25页 |
| 2.1 细胞、载体与宿主菌 | 第19页 |
| 2.2 工具酶、试剂盒与抗体 | 第19页 |
| 2.3 主要生化试剂 | 第19-20页 |
| 2.4 主要实验仪器 | 第20-21页 |
| 2.5 主要溶液配制 | 第21-25页 |
| 3 实验方法 | 第25-37页 |
| 3.1 细胞培养 | 第25-26页 |
| 3.2 sCLU-His蛋白的构建和表达 | 第26-32页 |
| 3.2.1 目的基因BamH Ⅰ-sCLU-His-Xba Ⅰ的获得 | 第26-27页 |
| 3.2.2 重组质粒pFastBacl-sCLU-His的构建 | 第27-29页 |
| 3.2.3 转座 | 第29页 |
| 3.2.4 rBacmid DNA的提取 | 第29页 |
| 3.2.5 rBacmid DNA的PCR鉴定 | 第29-30页 |
| 3.2.6 重组杆状病毒rBacmid-sCLU-His的获得和扩增 | 第30-31页 |
| 3.2.7 sCLU-His蛋白的表达和鉴定 | 第31-32页 |
| 3.3 sCLU-His蛋白的纯化与鉴定 | 第32-33页 |
| 3.3.1 sCLU-His蛋白的Ni-NTA纯化 | 第32-33页 |
| 3.3.2 sCLU-His蛋白的GF纯化 | 第33页 |
| 3.3.3 sCLU-His蛋白的SDS-PAGE与Western blot鉴定 | 第33页 |
| 3.3.4 sCLU-His蛋白的纯度与分子量测定 | 第33页 |
| 3.4 Aβ42荧光单体的制备及鉴定 | 第33-34页 |
| 3.4.1 Aβ_(42)单体制备 | 第33页 |
| 3.4.2 Aβ_(42)荧光单体的制备 | 第33-34页 |
| 3.4.3 Aβ_(42)荧光单体的质谱鉴定 | 第34页 |
| 3.5 sCLU-His对Aβ_(42)聚集影响的动力学行为变化 | 第34-35页 |
| 3.5.1 仪器及参数 | 第34-35页 |
| 3.5.2 激发体积的校正 | 第35页 |
| 3.5.3 荧光检测Aβ_(42)聚集过程动力学行为变化 | 第35页 |
| 3.6 TEM观察Aβ_(42)聚集过程的形貌变化 | 第35-37页 |
| 4 实验结果 | 第37-56页 |
| 4.1 sCLU-His蛋白的构建和表达 | 第37-40页 |
| 4.1.1 重组质粒pFastBacl-sCLU-His的构建和鉴定 | 第37-39页 |
| 4.1.2 sCLU-His蛋白的表达和鉴定 | 第39-40页 |
| 4.2 sCLU-His蛋白的纯化及鉴定 | 第40-42页 |
| 4.3 不同荧光标签对Aβ_(42)聚集行为的影响 | 第42-51页 |
| 4.3.1 Aβ_(42)荧光单体的质谱鉴定 | 第43-44页 |
| 4.3.2 不同Aβ_(42)荧光单体聚集的动力学行为比较 | 第44-47页 |
| 4.3.3 不同荧光标签对Aβ_(42)单体聚集影响的机制探讨 | 第47-49页 |
| 4.3.4 不同荧光标记Aβ_(42)单体聚集的形貌观察 | 第49-51页 |
| 4.4 sCLU-His对Aβ_(42)聚集行为影响的动力学性质变化 | 第51-56页 |
| 5 讨论 | 第56-59页 |
| 6 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 附录 | 第66-68页 |
| 硕士期间发表论文情况 | 第68-69页 |
| 作者简历 | 第69-71页 |
| 学位论文数据集 | 第71页 |
