摘要 | 第2-5页 |
ABSTRACT | 第5-8页 |
符号说明 | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-21页 |
1 我国养鹅业的现状 | 第14-15页 |
1.1 我国养鹅业的发展优势 | 第14页 |
1.2 我国养鹅业主要疫病 | 第14-15页 |
1.2.1 小鹅瘟 | 第14-15页 |
1.2.2 鹅副粘病毒病 | 第15页 |
1.2.3 鹅流行性感冒 | 第15页 |
1.2.4 鹅球虫病 | 第15页 |
2 小鹅瘟病毒的研究现状 | 第15-19页 |
2.1 小鹅瘟病毒病原学 | 第16页 |
2.2 小鹅瘟病毒的分子生物学特性 | 第16-17页 |
2.2.1 结构蛋白 | 第16页 |
2.2.2 非结构蛋白 | 第16-17页 |
2.2.3 末端回文结构 | 第17页 |
2.3 小鹅瘟病毒的理化特性 | 第17页 |
2.3.1 物理性质 | 第17页 |
2.3.2 耐受性 | 第17页 |
2.3.3 血凝性 | 第17页 |
2.4 小鹅瘟病毒的诊断 | 第17-19页 |
2.4.1 小鹅瘟病毒的流行病学 | 第17-18页 |
2.4.2 小鹅瘟的临床症状和剖检变化 | 第18页 |
2.4.3 GPV的分离培养 | 第18页 |
2.4.4 分子生物学鉴定 | 第18页 |
2.4.5 血清学诊断技术 | 第18-19页 |
3 小鹅瘟疫苗的研究进展 | 第19-20页 |
3.1 抗血清和卵黄抗体 | 第19页 |
3.2 活疫苗 | 第19页 |
3.3 灭活疫苗 | 第19-20页 |
3.4 基因工程疫苗 | 第20页 |
4 研究的目的与意义 | 第20-21页 |
第二章 小鹅瘟疫苗候选株的筛选 | 第21-50页 |
1 材料与方法 | 第22-30页 |
1.1 材料 | 第22-23页 |
1.1.1 检测试剂、血清及毒株 | 第22页 |
1.1.2 鹅胚和SPF鸡胚 | 第22页 |
1.1.3 红细胞悬液 | 第22页 |
1.1.4 试剂及仪器 | 第22-23页 |
1.2 方法 | 第23-30页 |
1.2.1 病毒分离及鉴定 | 第23-24页 |
1.2.2 毒株生物学特性研究 | 第24-25页 |
1.2.3 小鹅瘟疫苗候选株的确定及候选株的全基因组测序 | 第25页 |
1.2.4 制苗用毒种的传代及鉴定 | 第25-27页 |
1.2.5 毒种纯净性鉴定 | 第27-29页 |
1.2.6 制苗用毒种种子批的建立 | 第29页 |
1.2.7 种毒的保存期研究 | 第29-30页 |
2 结果 | 第30-48页 |
2.1 病毒分离 | 第30-31页 |
2.1.1 鹅胚接种 | 第30-31页 |
2.1.2 鸡胚接种实验 | 第31页 |
2.2 病毒的鉴定 | 第31-34页 |
2.2.1 琼脂扩散实验(AGP) | 第31页 |
2.2.2 红细胞凝集实验 | 第31-32页 |
2.2.3 小鹅瘟阳性血清中和实验 | 第32页 |
2.2.4 分离株VP3基因序列测定及分析 | 第32-34页 |
2.3 病毒的生物学特性研究 | 第34-36页 |
2.3.1 毒株传代稳定性(ELD_(50)) | 第35页 |
2.3.2 对雏鹅的毒力实验 | 第35-36页 |
2.4 分离毒株免疫原性比较试验 | 第36-37页 |
2.4.1 免疫种鹅产生的抗体水平 | 第36-37页 |
2.4.2 雏鹅攻毒保护性实验 | 第37页 |
2.5 疫苗候选株——TZ10株生物学特性研究 | 第37-46页 |
2.5.1 TZ10株全基因组测序 | 第37-38页 |
2.5.2 TZ10株毒种传代及无菌检验 | 第38页 |
2.5.3 不同代次TZ10株病毒含量(ELD_(50))的测定 | 第38-39页 |
2.5.4 不同代次毒种对雏鹅的毒力 | 第39-41页 |
2.5.5 毒种的特异性鉴定结果 | 第41页 |
2.5.6 不同代次病毒免疫原性实验 | 第41-42页 |
2.5.7 毒种的纯净性 | 第42-46页 |
2.6 TZ10株毒种种子批的建立 | 第46页 |
2.7 毒种的保存期试验 | 第46-48页 |
2.7.1 不同保存条件、时间对病毒含量(ELD_(50))的影响 | 第46-47页 |
2.7.2 不同保存条件及时间毒种对雏鹅的毒力 | 第47-48页 |
3 讨论 | 第48-50页 |
第三章 小鹅瘟灭活疫苗(TZ10株)生产工艺研究 | 第50-59页 |
1 材料与方法 | 第50-53页 |
1.1 材料 | 第50-51页 |
1.1.1 鹅胚 | 第50-51页 |
1.1.2 TZ10株毒种 | 第51页 |
1.1.3 试剂 | 第51页 |
1.2 方法 | 第51-53页 |
1.2.1 小鹅瘟病毒(TZ10株)抗原生产工艺研究 | 第51-52页 |
1.2.2 小鹅瘟(TZ10)株抗原灭活工艺研究 | 第52页 |
1.2.3 灭活疫苗乳化工艺 | 第52-53页 |
1.2.4 免疫效力试验 | 第53页 |
2 结果 | 第53-58页 |
2.1 抗原生产工艺 | 第53-56页 |
2.1.1 最佳接种剂量的确定 | 第53-54页 |
2.1.2 病毒接种不同日龄鹅胚的比较 | 第54-55页 |
2.1.3 病毒培养时间的确定 | 第55-56页 |
2.2 抗原灭活 | 第56-57页 |
2.2.1 小鹅瘟病毒TZ10株灭活条件的确定 | 第56-57页 |
2.2.2 小鹅瘟病毒TZ10株灭活方法稳定性实验 | 第57页 |
2.3 乳化工艺研究 | 第57-58页 |
2.3.1 乳化工艺实验试验 | 第57-58页 |
2.3.2 免疫效力试验 | 第58页 |
3 讨论 | 第58-59页 |
第四章 小鹅瘟灭活疫苗安全性评价试验 | 第59-65页 |
1 材料与方法 | 第59-61页 |
1.1 材料 | 第59-60页 |
1.1.1 毒种及检验用试剂 | 第59-60页 |
1.1.2 非免疫鹅胚 | 第60页 |
1.1.3 实验动物 | 第60页 |
1.1.4 疫苗 | 第60页 |
1.2 方法 | 第60-61页 |
1.2.1 单剂量接种的安全性实验 | 第60页 |
1.2.2 单剂量重复接种的安全性实验 | 第60-61页 |
1.2.3 双倍剂量接种的安全性实验 | 第61页 |
2 结果 | 第61-64页 |
2.1 单剂量接种的安全性实验结果 | 第61-62页 |
2.2 单剂量重复接种安全性实验结果 | 第62-63页 |
2.3 双倍剂量接种安全性实验结果 | 第63-64页 |
3 讨论 | 第64-65页 |
第五章 小鹅瘟灭活疫苗效力评价试验 | 第65-87页 |
1 材料与方法 | 第66-70页 |
1.1 材料 | 第66页 |
1.1.1 毒种及检验用试剂 | 第66页 |
1.1.2 非免疫鹅胚 | 第66页 |
1.1.3 实验动物 | 第66页 |
1.1.4 疫苗 | 第66页 |
1.2 方法 | 第66-70页 |
1.2.1 小鹅瘟灭活疫苗(TZ10株)免疫效力实验 | 第66-67页 |
1.2.2 小鹅瘟灭活疫苗(TZ10株)最小免疫剂量研究 | 第67-68页 |
1.2.3 小鹅瘟灭活疫苗(TZ10株)免疫持续期实验 | 第68-69页 |
1.2.4 小鹅瘟灭活疫苗(TZ10株)效检替代动物免疫试验 | 第69-70页 |
2 结果 | 第70-85页 |
2.1 TZ10株灭活疫苗免疫效力实验结果 | 第70-72页 |
2.1.1 种鹅血清GPV琼扩抗体检测结果 | 第70-71页 |
2.1.2 鹅蛋卵黄GPV琼扩抗体检测 | 第71页 |
2.1.3 雏鹅被动保护攻毒实验结果 | 第71-72页 |
2.2 灭活疫苗最小免疫剂量实验 | 第72-78页 |
2.2.1 种鹅血清及种蛋卵黄抗体检测 | 第72-73页 |
2.2.2 雏鹅被动免疫攻毒保护实验结果 | 第73-74页 |
2.2.3 被动免疫雏鹅攻毒保护与血清抗体水平相关性分 | 第74页 |
2.2.4 被动免疫雏鹅血清抗体水平与种鹅血清抗体水平相关性分析 | 第74-75页 |
2.2.5 种鹅血清抗体与雏鹅被动免疫保护的相关性分析 | 第75-78页 |
2.3 小鹅瘟灭活疫苗(TZ10株)免疫持续期实验 | 第78-81页 |
2.3.1 种鹅免疫1次的免疫持续期试验 | 第78-79页 |
2.3.2 鹅免疫2次的免疫持续期试验 | 第79-81页 |
2.4 小鹅瘟灭活疫苗(TZ10株)效检替代动物免疫试验结果 | 第81-85页 |
2.4.1 不同免疫剂量免疫SPF鸡产生小鹅瘟琼扩抗体效价检测结果 | 第81-82页 |
2.4.2 不同剂量免疫7~8月龄种鹅产生小鹅瘟琼扩抗体效价检测结果 | 第82-84页 |
2.4.3 不同动物免后AGP抗体水平与中和抗体水平的相关性分析 | 第84-85页 |
3 讨论 | 第85-87页 |
附录 | 第87-90页 |
全文总结 | 第90-92页 |
参考文献 | 第92-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
攻读博士学位期间的研究论文及成果 | 第99-100页 |