| 目录 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-22页 |
| 1. 几种模式生物中的细胞核锚定和迁移研究 | 第11-15页 |
| 2. 细胞核膜蛋白SUN蛋白和KASH蛋白 | 第15-19页 |
| 3. 细胞核膜和人类健康 | 第19-22页 |
| 第二章 SUN1、SUN2蛋白在骨骼肌细胞核锚定中的功能 | 第22-38页 |
| 一、摘要 | 第22页 |
| 二、背景知识和选题意义 | 第22-25页 |
| 1. 骨骼肌细胞核的定位 | 第22-24页 |
| 2. SUN蛋白和KASH蛋白细胞核锚定功能的研究背景 | 第24-25页 |
| 3. 选题意义 | 第25页 |
| 三、实验材料与方法 | 第25-27页 |
| 1. Sun2基因敲除小鼠的建立和Sun1Sun2双敲除小鼠的培育 | 第25-26页 |
| 2. NSE-SUN1转基因小鼠的建立 | 第26页 |
| 3. RT-PCR | 第26页 |
| 4. 引物列表 | 第26页 |
| 5. 免疫荧光染色和显微镜分析 | 第26-27页 |
| 四、实验结果 | 第27-36页 |
| 1. 突触下细胞核的锚定在Sun1敲除小鼠中被部分破坏 | 第27-28页 |
| 2. 肌肉细胞核的定位在Sun2敲除小鼠中没有受到影响 | 第28-30页 |
| 3. 突触下细胞核的锚定在Sun1/2双敲除小鼠中被破坏 | 第30-32页 |
| 4. 非突触下细胞核的定位在Sun1/2双敲除小鼠中被破坏 | 第32-34页 |
| 5. Sun1/2双敲除破坏Syne-1,而不破坏LaminA/C在细胞核膜上的定位 | 第34-36页 |
| 五、小结 | 第36-38页 |
| 第三章 KASH蛋白Syne-1、Syne-2和SUN蛋白SUN1、SUN2在大脑神经细胞迁移中的功能 | 第38-51页 |
| 一、摘要 | 第38页 |
| 二、背景知识和选题意义 | 第38-45页 |
| 1. 大脑神经细胞的发生与迁移 | 第38-42页 |
| 2. SUN蛋白和KASH蛋白细胞核迁移功能的研究背景 | 第42页 |
| 3. SUN1、SUN2和Syne-1、Syne-2在小鼠大脑发育中的前期研究结果 | 第42-44页 |
| 4. 荧光标记大脑皮层中的神经前体细胞可以观察神经细胞的迁移 | 第44-45页 |
| 三、实验材料和方法 | 第45-46页 |
| 1. 表达质粒的构建 | 第45-46页 |
| 2. 小鼠胚胎子宫内电转和急性脑片培养及显微摄影术 | 第46页 |
| 四、实验结果 | 第46-49页 |
| 1. SUN1/2DKO和Syne-2KO小鼠皮层神经细胞矢向迁移失败 | 第46-47页 |
| 2. SUN1/2和Syne-2对于皮层神经细胞细胞核转位(nucleokinesis)以及细胞核-中心体偶联至关重要 | 第47-48页 |
| 3. 大脑皮层神经前体细胞核的INM需要SUN1/2和Syne-2 | 第48-49页 |
| 五、小结 | 第49-51页 |
| 1. SUN1/2和Syne-1/2为神经细胞矢向迁移和INM所必需 | 第49-50页 |
| 2. 两种SUN蛋白和两种KASH蛋白在大脑发育过程中的功能分别冗余 | 第50-51页 |
| 第四章 KASH蛋白Syne-2/Nesprin-2和SUN蛋白SUN1/2调控小鼠视网膜发育中的细胞核迁移 | 第51-75页 |
| 一、摘要 | 第51页 |
| 二、背景知识和选题意义 | 第51-54页 |
| 1. 哺乳动物视网膜发育 | 第51-54页 |
| 2. SUN蛋白和KASH蛋白在眼睛发育中的功能研究背景 | 第54页 |
| 三、实验材料和方法 | 第54-56页 |
| 1. 小鼠饲养 | 第54页 |
| 2. 组织分析和免疫荧光染色 | 第54-55页 |
| 3. BrdU标记和流式细胞技术 | 第55页 |
| 4. 小鼠视网膜电生理 | 第55页 |
| 5. 统计分析 | 第55页 |
| 6. 免疫共沉淀和免疫印迹 | 第55-56页 |
| 四、实验结果 | 第56-72页 |
| 1. Syne-2KASH结构域缺失导致视网膜外核层变薄以及细胞核定位异常 | 第56-60页 |
| 2. SUN1和SUN2在视网膜ONL发育中的功能部分冗余 | 第60-61页 |
| 3. Syne-2KO和SUN1KO小鼠视网膜细胞过度凋亡 | 第61-63页 |
| 4. INM在Syne-2KO和Sun1Sun2DKO小鼠中受到影响 | 第63-65页 |
| 5. 视杆细胞核在Syne-2KO和Sun1KO小鼠视网膜中迁移紊乱 | 第65-66页 |
| 6. 视锥细胞核迁移在Syne-2KO和Sun1KO小鼠视网膜中异常 | 第66-69页 |
| 7. Syne-2KO和Sun1KO小鼠视网膜电生理缺陷 | 第69-70页 |
| 8. Syne-2在视网膜中通过连接dynein、dynactin、kinesin介导细胞核迁移 | 第70-72页 |
| 五、小结 | 第72-75页 |
| 1. KASH蛋白和SUN蛋白在小鼠发育中的冗余和特异性 | 第72-73页 |
| 2. Syne-2和SUN1/2在视网膜前体细胞INM和光感受细胞细胞核迁移中的作用 | 第73页 |
| 3. Syne-2和SUN1/2通过连接dynein、dynactin、kinesin介导细胞核迁移 | 第73-75页 |
| 第五章 SUN1、SUN2在DNA损伤反应中的功能 | 第75-85页 |
| 一、摘要 | 第75页 |
| 二、背景知识和选题意义 | 第75-77页 |
| 1. DNA损伤反应机制 | 第75-76页 |
| 2. SUN蛋白在维持基因组稳定中的潜在功能 | 第76-77页 |
| 三、实验材料和方法 | 第77-78页 |
| 1. 细胞培养,生长曲线和药物处理 | 第77页 |
| 2. BrdU标记和流式细胞技术 | 第77页 |
| 3. Tandem Affinity Purification | 第77-78页 |
| 四、实验结果 | 第78-83页 |
| 1. Sun1/2DKOMEF细胞增殖能力提前降低 | 第78-79页 |
| 2. Sun1/2DKOMEF细胞中DNA损伤反应能力降低 | 第79页 |
| 3. SUN1、SUN2和Rcn2、DNAPKcs/Ku70相互作用 | 第79-82页 |
| 4. Sun1/2DKOMEF细胞MAPK信号反应滞后 | 第82-83页 |
| 五、小结和进一步的研究计划 | 第83-85页 |
| 1. SUN蛋白参与调节DNA损伤反应信号 | 第83-84页 |
| 2. SUN1和SUN2是如何通过Rcn2激活ERK1/2的? | 第84页 |
| 3. SUN1和SUN2是否通过Ku70介导DNA损伤? | 第84-85页 |
| 总结与展望 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-97页 |
| 在学期间发表文章 | 第97-98页 |
| 致谢 | 第98-100页 |
