| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 本文縮略词 | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-28页 |
| 2 实验试剂与仪器 | 第28-30页 |
| 2.1 主要实验材料 | 第28页 |
| 2.2 主要实验试剂 | 第28页 |
| 2.3 主要实验仪器 | 第28-30页 |
| 3 实验方法 | 第30-38页 |
| 3.1 南极海洋菌胞外多糖PEP提纯方法 | 第30页 |
| 3.2 肿瘤细胞的培养 | 第30-31页 |
| 3.3 体外肿瘤生长抑制试验 | 第31页 |
| 3.4 乳腺癌细胞形态学观察 | 第31-32页 |
| 3.5 Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡 | 第32页 |
| 3.6 活性氧的检测 | 第32页 |
| 3.7 线粒体膜电位的检测 | 第32-33页 |
| 3.8 细胞内钙离子浓度的检测 | 第33页 |
| 3.9 RT-PCR检测乳腺癌细胞MDA-MB-231中p53、Bcl-2、Bax、FasL和Fas的mRNA表达 | 第33-35页 |
| 3.9.1 总RNA的提取 | 第33页 |
| 3.9.2 cDNA的合成 | 第33-34页 |
| 3.9.3 引物的设计 | 第34页 |
| 3.9.4 PCR反应 | 第34-35页 |
| 3.9.5 凝胶电泳 | 第35页 |
| 3.10 实时定量PCR检测MDA-MB-231细胞中Caspase12、Caspase3、ATF-4、ATF-6、CHOP等基因表达变化 | 第35-38页 |
| 3.10.1 乳腺癌细胞总RNA提取及cDNA合成 | 第35页 |
| 3.10.2 实时定量PCR反应体系的设置 | 第35页 |
| 3.10.3 QRT-RCR引物设计 | 第35-36页 |
| 3.10.4 反应条件 | 第36页 |
| 3.10.5 结果分析 | 第36-38页 |
| 4 结果与分析 | 第38-54页 |
| 4.1 南极海洋菌胞外多糖PEP对乳腺癌细胞MDA-MB-231生长增殖的影响 | 第38-54页 |
| 4.1.1 PEP对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖的影响 | 第38-39页 |
| 4.1.2 Hoechst 33342染色法观察细胞形态变化 | 第39-40页 |
| 4.1.3 Annexin V-FITC/PI流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第40-43页 |
| 4.1.4 PEP对MDA-MB-231细胞中活性氧变化的影响 | 第43-44页 |
| 4.1.5 PEP对MDA-MB-231细胞线粒体膜电位的影响 | 第44-46页 |
| 4.1.6 PEP对MDA-MB-231细胞钙离子的影响 | 第46-47页 |
| 4.1.7 PEP对MDA-MB-231细胞p53、Bcl-2、Bax、FasL和Fas的mRNA表达量的影响 | 第47-49页 |
| 4.1.8 PEP对MDA-MB-231细胞中与内质网途径相关的基因Caspase-12、Caspase-3、ATF4、ATF6、GRP78和CHOP的mRNA表达量的影响 | 第49-54页 |
| 5 讨论 | 第54-60页 |
| 5.1 南极海洋菌胞外多糖对人乳腺癌细胞增殖的影响 | 第54-55页 |
| 5.2 PEP诱导人乳腺癌细胞凋亡的机制研究 | 第55-60页 |
| 6 结论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第71页 |
