摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
1 绪论 | 第11-13页 |
1.1 研究背景 | 第11-12页 |
1.1.1 空间生命科学的发展 | 第11页 |
1.1.2 骨髓间充质干细胞 | 第11页 |
1.1.3 模拟微重力对生命活动的影响 | 第11-12页 |
1.2 本文研究的目的、意义以及主要内容 | 第12-13页 |
1.2.1 本文研究的目的和意义 | 第12页 |
1.2.2 本文研究的主要内容 | 第12-13页 |
2 rMSCs 的原代分离培养 | 第13-18页 |
2.1 引言 | 第13页 |
2.2 实验动物、仪器和材料 | 第13-14页 |
2.2.1 实验动物 | 第13页 |
2.2.2 实验仪器 | 第13页 |
2.2.3 实验药品与试剂 | 第13-14页 |
2.2.4 主要实验试剂的配制 | 第14页 |
2.3 实验方法 | 第14-15页 |
2.3.1 rMSCs 的原代分离培养、传代培养 | 第14-15页 |
2.3.2 流式细胞仪检测细胞表面抗原 | 第15页 |
2.3.3 统计分析 | 第15页 |
2.4 实验结果 | 第15-17页 |
2.4.1 rMSCs 的形态学观察 | 第15页 |
2.4.2 rMSCs 表面抗原的表达 | 第15-17页 |
2.5 讨论 | 第17页 |
2.6 本章小结 | 第17-18页 |
3 微重力效应模拟装置 | 第18-23页 |
3.1 引言 | 第18页 |
3.2 微重力效应模拟装置 | 第18-21页 |
3.3 讨论 | 第21-22页 |
3.4 本章小结 | 第22-23页 |
4 模拟微重力对 rMSCs 增殖的影响及相关分子机理 | 第23-36页 |
4.1 引言 | 第23-24页 |
4.2 实验材料 | 第24-25页 |
4.2.1 主要实验仪器、实验耗材 | 第24页 |
4.2.2 主要实验药品与试剂 | 第24-25页 |
4.2.3 主要实验试剂的配置 | 第25页 |
4.3 实验方法 | 第25-29页 |
4.3.1 模拟微重力条件下 rMSCs 的培养 | 第25-26页 |
4.3.2 CCK-8 法检测细胞增殖 | 第26页 |
4.3.3 细胞计数检测细胞增殖 | 第26页 |
4.3.4 胶原裱衬 | 第26页 |
4.3.5 RT-PCR 检测 mRNA 表达变化 | 第26-28页 |
4.3.6 免疫荧光染色检测蛋白表达变化 | 第28-29页 |
4.4 实验结果 | 第29-33页 |
4.4.1 模拟微重力抑制 rMSCs 的增殖 | 第29-30页 |
4.4.2 模拟微重力对经典 Wnt 信号通路相关蛋白β-catenin、Wnt3a、DKK-1 的影响 | 第30-33页 |
4.5 讨论 | 第33-34页 |
4.6 本章小结 | 第34-36页 |
5 模拟微重力对 rMSCs 迁移的影响及相关分子机理 | 第36-46页 |
5.1 引言 | 第36页 |
5.2 实验材料 | 第36-37页 |
5.2.1 主要实验仪器、实验耗材 | 第36页 |
5.2.2 主要实验药品与试剂 | 第36页 |
5.2.3 主要实验试剂的配置 | 第36-37页 |
5.3 实验方法 | 第37-40页 |
5.3.1 划痕迁移实验 | 第37页 |
5.3.2 Transwell 跨膜迁移实验 | 第37-38页 |
5.3.3 免疫荧光染色检测 F-actin 细胞骨架 | 第38-39页 |
5.3.4 原子力显微镜检测细胞杨氏模量 | 第39-40页 |
5.4 实验结果 | 第40-43页 |
5.4.1 模拟微重力抑制 rMSCs 跨膜迁移和划痕迁移能力 | 第40-41页 |
5.4.2 模拟微重力增加 rMSCs 的细胞硬度 | 第41-42页 |
5.4.3 模拟微重力促进 rMSCs 中 F-actin 细胞骨架的重排 | 第42-43页 |
5.5 讨论 | 第43-45页 |
5.6 本章小结 | 第45-46页 |
6 结论与展望 | 第46-48页 |
6.1 主要结论 | 第46页 |
6.2 展望 | 第46-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-56页 |
附录 | 第56页 |
A 攻读硕士学位期间发表论文目录 | 第56页 |
B 参加学术会议 | 第56页 |
C 项目(主研人或第一申请人) | 第56页 |