本文主要缩略语表 | 第10-12页 |
摘要 | 第12-13页 |
ABSTRACT | 第13页 |
1 前言 | 第14-17页 |
2 实验材料和仪器 | 第17-24页 |
2.1 实验材料和试剂 | 第17-22页 |
2.1.1 临床组织标本 | 第17页 |
2.1.2 细胞系 | 第17页 |
2.1.3 主要试剂 | 第17-20页 |
2.1.4 主要溶液配方 | 第20-22页 |
2.2 实验主要仪器 | 第22-24页 |
3 实验方法 | 第24-38页 |
3.1 子宫内膜细胞的原代培养 | 第24-27页 |
3.1.1 主要溶液及配制 | 第24页 |
3.1.2 细胞的分离和培养 | 第24-26页 |
3.1.3 细胞类型的鉴定 | 第26页 |
3.1.4 细胞的冻存和复苏 | 第26-27页 |
3.2 免疫细胞化学 | 第27-28页 |
3.2.1 主要试剂配制 | 第27页 |
3.2.2 主要实验步骤 | 第27-28页 |
3.3 酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第28-29页 |
3.4 Real Time PCR检测相关基因的表达 | 第29-32页 |
3.4.1 总RNA的抽提 | 第29-30页 |
3.4.2 RNA逆转录为cDNA | 第30页 |
3.4.3 Real Time PCR检测基因表达 | 第30-32页 |
3.5 Western blot | 第32-33页 |
3.6 免疫组织化学法 | 第33页 |
3.7 MTS法 | 第33-34页 |
3.8 重组质粒构建 | 第34-35页 |
3.9 质粒瞬时转染 | 第35页 |
3.10 荧光素酶活性测定 | 第35-36页 |
3.11 EdU法测细胞增殖率 | 第36-37页 |
3.12 统计学分析 | 第37-38页 |
4 实验结果 | 第38-54页 |
4.1 原代细胞培养 | 第38-40页 |
4.1.1 原代子宫内膜细胞的培养及细胞形态学分析 | 第38-39页 |
4.1.2 原代子宫内膜细胞的免疫细胞化学鉴定 | 第39-40页 |
4.2 LXA_4、ER、PR在内异症中的表达 | 第40-44页 |
4.2.1 LXA_4在异位及正常子宫内膜中的表达情况 | 第40-41页 |
4.2.2 ER与PR在异位及正常子宫内膜中的表达 | 第41-43页 |
4.2.3 不同月经周期中ER和PR在异位及正常子宫内膜中的表达 | 第43-44页 |
4.3 LXA_4对ER和PR表达及对E_2诱导的ERE转录活性的影响 | 第44-47页 |
4.3.1 LXA_4对ESCs中ER和PR表达的影响 | 第44-45页 |
4.3.2 E_2存在时LXA_4对ESC_s中ER及PR表达的影响 | 第45-47页 |
4.3.3 LXA_4对E_2诱导的ERE转录活性的影响 | 第47页 |
4.4 LXA_4对p38 MAPK信号通路的调节 | 第47-51页 |
4.4.1 磷酸化p38 MAPK在异位病灶及正常子宫内膜中的表达 | 第47-48页 |
4.4.2 LXA_4可抑制E_2诱导的ESCs中p38 MAPK磷酸化 | 第48-49页 |
4.4.3 ERβ兴奋剂DPN可抑制ESCs中p38 MAPK磷酸化 | 第49-50页 |
4.4.4 LXA_4对E_2诱导的p38 MAPK下游炎症因子的抑制作用 | 第50-51页 |
4.5 LXA_4抑制ESCs的增殖 | 第51-54页 |
4.5.1 MTS法检测LXA_4对ESCs生长的影响 | 第51页 |
4.5.2 EdU法检测LXA_4对ESCs增殖率的影响 | 第51-54页 |
5 讨论 | 第54-60页 |
5.1 LXA_4在异位子宫内膜组织中的表达分析 | 第54-55页 |
5.2 LXA_4对内异症中ER的调节作用 | 第55-57页 |
5.2.1 ER、PR在内异症中的表达 | 第55-56页 |
5.2.2 LXA_4对内异症中ER的调节作用 | 第56-57页 |
5.3 LXA_4对ER-p38 MAPK串话通路的影响 | 第57-60页 |
6 结论 | 第60-61页 |
创新点 | 第61-62页 |
展望 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-71页 |
致谢 | 第71-73页 |
在学期间科研成果 | 第73页 |