| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 绪论 | 第10-20页 |
| 1.1 概述 | 第10页 |
| 1.2 重组蛋白的表达 | 第10-11页 |
| 1.3 传统包涵体的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.3.1 传统包涵体 | 第11页 |
| 1.3.2 传统包涵体形成机制 | 第11-12页 |
| 1.3.3 传统包涵体的利用 | 第12页 |
| 1.4 非传统包涵体的研究进展 | 第12-16页 |
| 1.4.1 非传统包涵体的发现 | 第12-13页 |
| 1.4.2 非传统包涵体的形成机制 | 第13-14页 |
| 1.4.3 非传统包涵体结构 | 第14-15页 |
| 1.4.4 非传统包涵体的应用 | 第15-16页 |
| 1.5 非传统包涵体的制备工艺 | 第16-17页 |
| 1.5.1 目的蛋白在细菌中的表达 | 第16页 |
| 1.5.2 细胞破碎 | 第16-17页 |
| 1.5.3 非传统包涵体洗涤 | 第17页 |
| 1.6 TRAIL蛋白的研究进展 | 第17-19页 |
| 1.6.1 TRAIL蛋白的结构 | 第17-18页 |
| 1.6.2 TRAIL蛋白诱导细胞凋亡作用 | 第18页 |
| 1.6.3 TRAIL蛋白的凋亡机制 | 第18-19页 |
| 1.7 本课题的研究背景及主要内容 | 第19-20页 |
| 1.7.1 本课题的研究背景及意义 | 第19页 |
| 1.7.2 本课题的主要研究内容 | 第19-20页 |
| 第2章 TRAIL包涵体制备工艺的优化 | 第20-41页 |
| 2.1 引言 | 第20页 |
| 2.2 材料与方法 | 第20-30页 |
| 2.2.1 质粒 | 第20页 |
| 2.2.2 菌株 | 第20页 |
| 2.2.3 细胞株 | 第20页 |
| 2.2.4 主要仪器与试剂 | 第20-23页 |
| 2.2.5 菌体培养 | 第23-24页 |
| 2.2.6 SDS-PAGE蛋白检测 | 第24页 |
| 2.2.7 Western bolt检测2.2.8 BCA蛋白浓度的测定 | 第24-26页 |
| 2.2.8 细胞的培养 | 第26页 |
| 2.2.9 TRAIL包涵体活性预实验 | 第26-27页 |
| 2.2.10 培养过程的优化 | 第27页 |
| 2.2.11 细胞破碎方法的优化 | 第27-29页 |
| 2.2.12 洗涤条件优化 | 第29页 |
| 2.2.13 扫描电镜分析 | 第29页 |
| 2.2.14 优化实验 | 第29-30页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第30-39页 |
| 2.3.1 TRAIL包涵体的表达 | 第30页 |
| 2.3.2 TRAIL包涵体活性预实验 | 第30-31页 |
| 2.3.3 培养条件优化 | 第31-35页 |
| 2.3.4 细胞破碎方法 | 第35-37页 |
| 2.3.5 包涵体的洗涤 | 第37-38页 |
| 2.3.6 优化条件下制备的包涵体 | 第38-39页 |
| 2.4 本章小结 | 第39-41页 |
| 第3章 TRAIL包涵体活性验证及活性成分释放 | 第41-57页 |
| 3.1 引言 | 第41页 |
| 3.2 材料与方法 | 第41-45页 |
| 3.2.1 细胞株 | 第41页 |
| 3.2.2 主要仪器与试剂 | 第41-42页 |
| 3.2.3 细胞杀伤实验 | 第42-43页 |
| 3.2.4 细胞凋亡实验 | 第43页 |
| 3.2.5 真空冷冻干燥 | 第43-44页 |
| 3.2.6 蛋白二级结构检测 | 第44页 |
| 3.2.7 不同介质中TRAIL包涵体的活性成分释放 | 第44页 |
| 3.2.8 尿素的临界细胞浓度 | 第44-45页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第45-56页 |
| 3.3.1 TRAIL包涵体的活性验证 | 第45-49页 |
| 3.3.2 不同介质中TRAIL包涵体中活性成分释放曲线 | 第49-53页 |
| 3.3.3 不同介质处理的残留包涵体活性与结构分析 | 第53-56页 |
| 3.4 本章小结 | 第56-57页 |
| 第4章 结论与展望 | 第57-59页 |
| 4.1 结论 | 第57-58页 |
| 4.2 展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章 | 第66页 |
