摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第11-28页 |
1.1 引言 | 第11页 |
1.2 叶片的衰老 | 第11-18页 |
1.2.1 衰老叶片的生理生化变化 | 第11-12页 |
1.2.2 植物内在激素调控叶片衰老进程 | 第12-16页 |
1.2.3 多种环境因素调控叶片衰老进程 | 第16-18页 |
1.3 植物WRKY转录因子 | 第18-22页 |
1.3.1 WRKY转录因子的结构与分类 | 第18-20页 |
1.3.2 WRKY转录因子参与植物对不同胁迫的响应 | 第20页 |
1.3.3 WRKY转录因子家族调控衰老进程 | 第20-22页 |
1.4 植物中的MPK | 第22-27页 |
1.4.1 植物中MAPK成员的结构特点和分类 | 第23-24页 |
1.4.2 植物中MAPK级联途径 | 第24-25页 |
1.4.3 植物中MAPK的功能 | 第25-27页 |
1.5 本研究的立项依据 | 第27-28页 |
第二章 材料与方法实验材料 | 第28-40页 |
2.1 | 第28-30页 |
2.1.1 植物材料 | 第28页 |
2.1.2 载体及菌株 | 第28页 |
2.1.3 实验用试剂和试剂盒 | 第28-29页 |
2.1.4 实验用仪器设备 | 第29-30页 |
2.1.5 试剂配制 | 第30页 |
2.2 试验方法 | 第30-40页 |
2.2.1 载体的构建 | 第30-32页 |
2.2.2 农杆菌冻融法转化 | 第32页 |
2.2.3 烟草中的瞬时表达 | 第32页 |
2.2.4 转基因拟南芥的构建及稳定表达株系的筛选 | 第32-33页 |
2.2.5 亚细胞定位 | 第33页 |
2.2.6 植物组织RNA提取和反转录(RT-PCR) | 第33页 |
2.2.7 荧光实时定量 | 第33-35页 |
2.2.8 植物蛋白的提取 | 第35页 |
2.2.9 蛋白含量测定 | 第35页 |
2.2.10 GUS组织化学染色及其活性检测 | 第35-36页 |
2.2.11 植物衰老表型分析 | 第36页 |
2.2.12 生理指标的定性与定量测量 | 第36-37页 |
2.2.13 双荧光素酶报告基因检测系统 | 第37页 |
2.2.14 蛋白的原核表达纯化和凝胶阻滞实验(EMSA) | 第37-38页 |
2.2.15 蛋白质免疫印迹(westernblot)检测蛋白表达 | 第38-39页 |
2.2.16 免疫沉淀(IP)和激酶酶活的分析(ADP-Glo) | 第39页 |
2.2.17 统计分析 | 第39-40页 |
第三章 油菜WGR1调控活性氧的积累与叶片衰老 | 第40-54页 |
3.1 BnaWGR1的亚细胞定位及其启动子在衰老过程的活性分析 | 第40-43页 |
3.2 BnaWGR1受油菜叶片衰老诱导 | 第43-44页 |
3.3 BnaWGR1的过表达促进拟南芥叶片衰老 | 第44-47页 |
3.4 BnaWGR1诱导活性氧及细胞凋亡相关基因的表达 | 第47-49页 |
3.5 BnaWGR1激活RbohF和RbohD的转录 | 第49-54页 |
第四章 油菜MPKa参与JA介导的叶片衰老 | 第54-65页 |
4.1 BnaCMPKa在油菜衰老时期的表达及其亚细胞定位 | 第54-55页 |
4.2 MPKa的异源表达诱发烟草叶片的细胞死亡 | 第55-57页 |
4.3 BnaCMPKa参与JA介导的叶片衰老 | 第57-60页 |
4.4 BnaCMPKa作用JA信号途径中下游靶标的筛选 | 第60-62页 |
4.5 BnaCMPKa的磷酸化活性受JA激活 | 第62-65页 |
第五章 讨论与总结 | 第65-69页 |
5.1 油菜BnaWGR1促进叶片衰老并正调控RbohD及RbohF的表达 | 第65-66页 |
5.2 油菜BnaCMPKa诱导叶片细胞死亡及参与JA介导的叶片衰老 | 第66-69页 |
参考文献 | 第69-83页 |
附录 | 第83-86页 |
缩略表 | 第86-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
作者简介 | 第89页 |