摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
1 文献综述 | 第14-24页 |
1.1 植物干旱胁迫研究进展 | 第14-16页 |
1.1.1 干旱胁迫对植物造成损害研究进展 | 第14-15页 |
1.1.2 植物耐旱性研究进展 | 第15-16页 |
1.2 柠条锦鸡儿抗旱的研究进展 | 第16-17页 |
1.2.1 柠条抗旱的生理特征研究进展 | 第16页 |
1.2.2 柠条抗旱的分子机制研究进展 | 第16-17页 |
1.3 木质素相关研究进展 | 第17-20页 |
1.3.1 木质素生物合成路径的酶蛋白研究进展 | 第17页 |
1.3.2 木质素生物合成途径研究进展 | 第17-18页 |
1.3.3 木质素生物合成途径调控研究进展 | 第18-19页 |
1.3.4 木质素生物学功能研究进展 | 第19-20页 |
1.4 MYB转录因子的研究进展 | 第20-22页 |
1.4.1 MYB转录因子的发现 | 第20页 |
1.4.2 MYB转录因子的结构和分类 | 第20-21页 |
1.4.3 MYB转录因子对木质素生物合成途径的调控 | 第21-22页 |
1.5 论文研究目的及意义 | 第22-24页 |
2 材料与方法 | 第24-42页 |
2.1 试验材料 | 第24-27页 |
2.1.1 动植物材料 | 第24-25页 |
2.1.2 试验试剂和试剂盒 | 第25页 |
2.1.3 培养基和溶液 | 第25-26页 |
2.1.4 菌株与载体 | 第26-27页 |
2.1.5 试验仪器 | 第27页 |
2.2 试验方法 | 第27-42页 |
2.2.1 转录组测序 | 第27页 |
2.2.2 柠条木质素合成途径7个酶基因的实时荧光定量PCR检测 | 第27-29页 |
2.2.3 柠条木质素合成途径Ck C4H和Ck C3H蛋白的Western blot检测 | 第29-35页 |
2.2.4 柠条叶片木质素在维管束组织中的分布检测 | 第35页 |
2.2.5 柠条叶片木质素含量测定 | 第35-36页 |
2.2.6 Ck MYB39基因的克隆 | 第36页 |
2.2.7 Ck C4H、Ck MYB39基因过表达载体的构建 | 第36-39页 |
2.2.8 Ck C4H、Ck MYB39蛋白质亚细胞定位 | 第39-40页 |
2.2.9 Ck C4H、Ck MYB39基因通过花序浸染法转化拟南芥 | 第40页 |
2.2.10 拟南芥种子的筛选 | 第40-42页 |
3 结果与分析 | 第42-61页 |
3.1 转录组数据KEGG通路富集分析结果 | 第42页 |
3.2 柠条木质素合成途径7个差异表达基因的分析结果 | 第42-43页 |
3.3 柠条木质素合成途径7个酶基因的q PCR结果 | 第43-46页 |
3.3.1 RNA质量分析 | 第43页 |
3.3.2 定量引物和内参基因引物检测 | 第43-44页 |
3.3.3 7个酶基因分别在野外和室内样品中q PCR结果 | 第44-46页 |
3.4 Ck C3H蛋白和Ck C4H蛋白的Western blot结果 | 第46-50页 |
3.4.1 Ck C3H基因和Ck C4H基因原核表达载体构建结果 | 第46-48页 |
3.4.2 Ck C4H蛋白和Ck C3H蛋白原核表达结果 | 第48页 |
3.4.3 Ck C4H蛋白和Ck C3H蛋白的纯化结果 | 第48-49页 |
3.4.4 Ck C4H和Ck C3H蛋白的Western blot结果 | 第49-50页 |
3.5 柠条叶片木质素在维管束组织中的分布结果 | 第50-52页 |
3.6 柠条叶片木质素含量的测定结果 | 第52-53页 |
3.7 Ck MYB39基因克隆和生物信息学分析 | 第53-56页 |
3.7.1 Ck MYB39转录因子NJ树的构建 | 第53-54页 |
3.7.2 Ck MYB39基因的克隆 | 第54页 |
3.7.3 Ck MYB39转录因子的生物信息学分析 | 第54-56页 |
3.8 Ck C4H、Ck MYB39基因过表达载体的构建 | 第56-61页 |
3.8.1 Ck C4H、Ck MYB39基因的克隆 | 第56页 |
3.8.2 植物双元表达载体p CAMBIA1302的Nco I酶切 | 第56-57页 |
3.8.3 Ck C4H、Ck MYB39基因与载体p CAMBIA1302重组质粒转化大肠杆菌DH5α的菌液PCR验证 | 第57页 |
3.8.4 Ck C4H、Ck MYB39基因与载体p CAMBIA1302重组质粒的酶切验证 | 第57-58页 |
3.8.5 Ck C4H、Ck MYB39基因与载体p CAMBIA1302重组质粒的农杆菌GV3101的菌液PCR验证 | 第58页 |
3.8.6 Ck C4H、Ck MYB39蛋白的亚细胞定位 | 第58-59页 |
3.8.7 Ck C4H、Ck MYB39基因的转基因拟南芥T2代植株 | 第59-61页 |
4 讨论 | 第61-64页 |
4.1 柠条木质素合成途径关键酶基因及蛋白表达量与干旱的关系 | 第61-62页 |
4.2 干旱和木质素代谢途径之间的关系 | 第62页 |
4.3 MYB家族转录因子与木质素途径调控之间的关系 | 第62-64页 |
5 结论与展望 | 第64-66页 |
5.1 研究结论 | 第64-65页 |
5.2 研究展望 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-73页 |
附录 1 | 第73-78页 |
附录 2 | 第78-81页 |
主要缩略词和中英文对照表(Abbreviation Index) | 第81-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
作者简介 | 第83页 |