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利用原生质体非对称融合转移胡萝卜瓣化型细胞质不育性的研究

中文摘要第7-9页
英文摘要第9页
前言第11-35页
    1 问题提出第11-12页
    2 胡萝卜雄性不育性研究及利用进展第12-18页
        2.1 遗传机制第13-14页
        2.2 胡萝卜雄性不育的分子生物学研究第14-15页
        2.3 开花生物学特性第15-16页
        2.4 胡萝卜雄性不育系选育及利用概况第16-18页
        2.5 胡萝卜雄性不育新类型第18页
    3 非对称原生质体融合第18-33页
        3.1 原生质体融合的作用第18页
        3.2 非对称原生质体融合特点—获得非对称杂种或胞质杂种第18-21页
            3.2.1 供体处理第19-20页
            3.2.2 受体的处理第20-21页
        3.3 胡萝卜原生质体非对称融合研究第21-22页
        3.4 其他作物非对称融合研究第22-23页
        3.5 影响非对称融合中染色体丢失的因素第23-31页
            3.5.1 辐射剂量第23-29页
            3.5.2 亲缘关系第29页
            3.5.3 融合亲本和再生杂种的倍性(DNA量)第29页
            3.5.4 其它因素第29-31页
        3.6 非对称融合在育种上的潜在价值第31-33页
            3.6.1 转移部分核遗传物质,得到非对称杂种第31-32页
            3.6.2 转移细胞质基因组,得到胞质杂种第32-33页
    4 研究内容第33-35页
材料和方法第35-43页
    1 材料第35-36页
    2 方法第36-43页
        2.1 胡萝卜愈伤组织的诱导第36页
            2.1.1 以胡萝卜子叶和下胚轴为外植体诱导第36页
            2.1.2 以胡萝卜直根形成层为外植体诱导第36页
        2.2 胡萝卜细胞悬浮系建立第36页
        2.3 原生质体分离与纯化第36-37页
        2.4 X-射线辐射第37页
        2.5 紫外线(UV)辐射第37-38页
        2.6 碘乙酰胺(IOA)处理第38页
        2.7 原生质体活力测定第38页
        2.8 原生质体融合第38页
        2.9 原生质体培养第38-39页
        2.10 再生植株移栽成活第39页
        2.11 染色体数目检查第39页
        2.12 总DNA的提取第39-40页
        2.13 STS_4(Sequence Tagged Site)引物检测胞质基因型第40-41页
        2.14 RAPD引物检测核基因型第41-42页
        2.15 形态学鉴定第42页
        2.16 胡萝卜直根的人工春化第42-43页
结果与分析第43-103页
    1 胡萝卜原生质体非对称融合基础体系的研究第43-67页
        1.1 外植体对胡萝卜愈伤组织诱导的影响第43页
        1.2 继代培养中愈伤组织的状态及其与基因型的关系第43-44页
        1.3 接种愈伤组织状态与细胞悬浮系培养的关系第44-47页
        1.4 麦芽提取物和谷氨酰胺对胡萝卜细胞悬浮培养的影响第47-49页
        1.5 不同酶液配方原生质体分离产量的比较第49-50页
        1.6 不同酶液配方和酶解时间对原生质体活力的影响第50-51页
        1.7 细胞悬浮系继代不同时期原生质体产量的变化第51页
        1.8 2,4-D对胡萝卜细胞悬浮系状态的调节作用第51-52页
        1.9 分离原生质体的材料对原生质体分离的影响第52-54页
        1.10 细胞悬浮系状态与原生质体再生的关系第54页
        1.11 胡萝卜原生质体培养胚胎和愈伤发生过程的观察第54-55页
        1.12 UV对原生质体活力和再生的影响第55-57页
            1.12.1 UV对原生质体再生的影响第56页
            1.12.2 原生质体UV辐射后再生愈伤组织的生长与植株再生第56-57页
        1.13 UV辐射对愈伤组织生长的影响第57页
        1.14 X-射线对胡萝卜原生质体活力和再生的影响第57-59页
            1.14.1 X-射线对胡萝卜原生质体活力的影响第57-58页
            1.14.2 X-射线对原生质体再生的影响第58-59页
        1.15 IOA对原生质体生长的影响第59页
        1.16 胡萝卜电融合过程的描述第59-60页
        1.17 Ca~(2+)离子浓度对电融合的影响第60-61页
        1.18 融合参数的优化第61页
        1.19 STS_4标记与胡萝卜“瓣化型”不育性相关性研究第61-62页
        1.20 小结第62-67页
    2 胡萝卜原生质体非对称融合与再生第67-78页
        2.1 胡萝卜原生质体非对称融合愈伤和胚状体再生状况第67-70页
        2.2 操作环境温度和基因型对愈伤和胚状体再生的影响第70-71页
        2.3 胡萝卜融合原生质体培养胚胎发生过程的观察第71页
        2.4 胡萝卜融合体的愈伤增殖和植株再生第71-73页
        2.5 再生植株的移栽成活第73-74页
        2.6 小结第74-78页
    3 融合杂种植株的鉴定第78-103页
        3.1 7-0-8-4+66-3组合再生植株的鉴定第78-80页
            3.1.1 再生植株营养生长期形态学鉴定第78页
            3.1.2 再生植株的染色体数目鉴定第78页
            3.1.3 RAPD标记鉴定核基因型第78页
            3.1.4 mtDNA的STS_4标记鉴定第78-80页
            3.1.5 融合植株的花期形态学鉴定第80页
        3.2 7-0-8-2+305-1组合再生植株的鉴定第80-83页
            3.2.1 再生植株的营养生长期鉴定第80-81页
            3.2.2 再生植株及双亲的染色体数目鉴定第81页
            3.2.3 RAPD标记鉴定核基因型第81-82页
            3.2.4 mtDNA的STS_4标记鉴定第82-83页
            3.2.5 融合植株的花期形态学和细胞学鉴定第83页
        3.3 9714f8X1+66-3组合鉴定第83-86页
            3.3.1 再生植株的营养生长期鉴定第83页
            3.3.2 再生植株的染色体数目鉴定第83-84页
            3.3.3 RAPD标记鉴定核基因型第84页
            3.3.4 mtDNA的STS_4标记鉴定第84-85页
            3.3.5 融合再生植株的花期形态学鉴定第85-86页
        3.4 9714f8-1+17-3组合的鉴定第86-88页
            3.4.1 营养生长期的形态学鉴定第86页
            3.4.2 再生植株的染色体数目检查第86页
            3.4.3 再生植株的RAPD鉴定第86-87页
            3.4.4 再生植株mtDNA的STS_4标记鉴定第87-88页
            3.4.5 再生植株花期形态学鉴定第88页
        3.5 组合9714f8-1+169—1和组合9714f8-1+7-z-4-6的鉴定第88-89页
        3.6 小结第89-103页
讨论第103-114页
    1. 基因型对胡萝卜原生质体非对称融合的影响第103页
    2. 激素对胡萝卜原生质体非对称融合的影响第103-104页
    3. 射线和化学处理的后效应作用第104页
    4. UV射线处理和X-处理效果比较第104-105页
    5. 原生质体材料来源与变异第105-106页
    6. CA~(2+)离子浓度对电融合的影响第106页
    7. 胡萝卜再生植株的移栽成活第106-107页
    8. 原生质体非对称融合转育胡萝卜雄性不育性的可行性第107-108页
    9. 胡萝卜“瓣化型”胞质不育性在再生中的遗传第108-109页
    10. 融合双亲染色体数目差异对融合杂种性质的影响第109页
    11. STS_4标记与胡萝卜瓣化型不育性的相关性第109-110页
    12. 胡萝卜组培中的先期抽薹与人工春化第110-111页
    13. 本研究存在的问题及改进方案第111-112页
        13.1 存在问题第111页
        13.2 改进方案第111-112页
    14. 胡萝卜原生质体非对称融合与胡萝卜资源创新第112-114页
参考文献第114-127页
致谢第127页

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