| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第1章 文献综述 | 第13-15页 |
| 1.1 前言 | 第13-14页 |
| 1.2 Rab11的研究进展 | 第14-15页 |
| 第2章 家蝇Rab11基因的克隆与序列分析 | 第15-25页 |
| 2.1 主要实验材料 | 第15页 |
| 2.1.1 实验仪器与试剂 | 第15页 |
| 2.1.2 实验昆虫 | 第15页 |
| 2.1.3 载体和菌种 | 第15页 |
| 2.2 实验方法 | 第15-19页 |
| 2.2.1 家蝇总RNA的提取 | 第15-16页 |
| 2.2.2 反转录 | 第16-17页 |
| 2.2.3 家蝇Rab11基因cDNA克隆 | 第17-19页 |
| 2.2.3.1 家蝇Rab11基因cDNA序列保守区的扩增 | 第17页 |
| 2.2.3.2 PCR产物的回收纯化 | 第17-18页 |
| 2.2.3.3 PCR纯化产物的克隆测序 | 第18-19页 |
| 2.2.4 序列分析 | 第19页 |
| 2.3 结果 | 第19-24页 |
| 2.3.1 Rab11基因cDNA的克隆和序列分析 | 第19-21页 |
| 2.3.2 蛋白功能结构域分析 | 第21-22页 |
| 2.3.3 蛋白质二级结构分析 | 第22页 |
| 2.3.4 蛋白质三级结构分析 | 第22-24页 |
| 2.4 讨论 | 第24-25页 |
| 第3章 家蝇-actin基因cDNA克隆及表达量检测 | 第25-31页 |
| 3.1 研究材料 | 第25页 |
| 3.2 实验方法 | 第25-26页 |
| 3.2.1 总RNA提取和反转录 | 第25页 |
| 3.2.2 家蝇-actin基因的克隆 | 第25页 |
| 3.2.3 家蝇-actin基因序列分析 | 第25-26页 |
| 3.3 家蝇-actin基因经大肠杆菌和金黄色葡萄球菌胁迫后表达水平分析 | 第26页 |
| 3.3.1 细菌刺激实验及家蝇幼虫各组织总RNA的提取 | 第26页 |
| 3.3.2 家蝇-actin基因的荧光定量分析 | 第26页 |
| 3.4 结果 | 第26-29页 |
| 3.4.1 家蝇-actin基因cDNA的克隆和序列分析 | 第26-28页 |
| 3.4.2 家蝇-actin基因经菌胁迫后不同时间的表达量分析 | 第28-29页 |
| 3.5 讨论 | 第29-31页 |
| 第4章 家蝇Rab11基因的表达水平与功能分析 | 第31-35页 |
| 4.1 实验方法 | 第31-32页 |
| 4.1.1 细菌胁迫实验及家蝇幼虫各组织总RNA的提取 | 第31页 |
| 4.1.2 家蝇Rab11基因的荧光定量分析 | 第31-32页 |
| 4.2 实验结果 | 第32-33页 |
| 4.2.1 不同组织Rab11的表达分析 | 第32页 |
| 4.2.2 家蝇Rab11基因经菌刺激后表达水平分析 | 第32-33页 |
| 4.3 讨论 | 第33-35页 |
| 第5章 家蝇Rab11基因的重组表达及抗体制备 | 第35-42页 |
| 5.1 实验仪器、试剂及菌种 | 第35页 |
| 5.2 实验方法 | 第35-38页 |
| 5.2.1 Rab11片断的克隆 | 第35页 |
| 5.2.2 pET-DsbA质粒的提取及载体的构建 | 第35-36页 |
| 5.2.3 家蝇Rab11重组蛋白的诱导表达 | 第36页 |
| 5.2.4 重组蛋白的纯化 | 第36-37页 |
| 5.2.5 家蝇Rab11抗体的制备 | 第37页 |
| 5.2.6 Western Blot鉴定 | 第37-38页 |
| 5.2.6.1 家蝇总蛋白提取 | 第37页 |
| 5.2.6.2 Western Blot步骤 | 第37-38页 |
| 5.3 实验结果 | 第38-40页 |
| 5.3.1 家蝇Rab11 cDNA片段的克隆 | 第38页 |
| 5.3.2 重组质粒鉴定 | 第38-39页 |
| 5.3.3 Rab11融合蛋白表达 | 第39-40页 |
| 5.3.4 Western Blot鉴定 | 第40页 |
| 5.4 讨论 | 第40-42页 |
| 第6章 家蝇Rab11基因干扰与功能研究 | 第42-46页 |
| 6.1 实验材料 | 第42页 |
| 6.2 实验方法 | 第42-43页 |
| 6.2.1 基因克隆与干扰载体构建 | 第42页 |
| 6.2.2 dsRNA饲喂 | 第42-43页 |
| 6.2.3 饲喂后的细菌刺激试验 | 第43页 |
| 6.3 实验结果 | 第43-44页 |
| 6.4 讨论 | 第44-46页 |
| 第7章 Rab11在SF-9细胞中的定位 | 第46-49页 |
| 7.1 实验材料 | 第46页 |
| 7.2 实验方法 | 第46-47页 |
| 7.2.1 草地夜蛾SF-9细胞的培养 | 第46页 |
| 7.2.2 构建细胞荧光载体 | 第46-47页 |
| 7.2.3 细胞瞬时转染及荧光观察 | 第47页 |
| 7.3 实验结果 | 第47页 |
| 7.4 讨论 | 第47-49页 |
| 总结 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第56页 |
