| 摘要 | 第4-11页 |
| ABSTRACT | 第11-19页 |
| 目录 | 第20-23页 |
| 第一章 前言 | 第23-30页 |
| 第二章 建立人支气管上皮细胞株16HBECs RSV长期感染模型 | 第30-43页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第31-32页 |
| 2.1.1 材料 | 第31页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第31页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第31-32页 |
| 2.2 方法 | 第32-34页 |
| 2.2.1 RSV病毒悬液的制备 | 第32页 |
| 2.2.2 半数组织培养感染剂量(median tissue culture infective dose,TCIDso)测定RSV病毒悬液的毒力 | 第32页 |
| 2.2.3 Real-time PCR检测RSV病毒RNA | 第32-33页 |
| 2.2.4 16HBECs的培养 | 第33页 |
| 2.2.5 RSV长期感染16HBECs | 第33-34页 |
| 2.2.6 光镜下观察RSV感染后传代过程中16HBECs形态学变化 | 第34页 |
| 2.2.7 Real-time PCR检测RSV感染后传代过程中病毒在16HBECs中的复制情况 | 第34页 |
| 2.2.8 统计学方法 | 第34页 |
| 2.3 结果 | 第34-38页 |
| 2.3.1 TCID_(50)与C_T值之间的关系 | 第34-35页 |
| 2.3.2 光镜下感染RSV后传代过程中16HBECs细胞病变的情况 | 第35-36页 |
| 2.3.3 感染RSV后传代过程中病毒在16HBECs中的复制情况 | 第36-38页 |
| 2.4 讨论 | 第38-43页 |
| 第三章 RSV感染后16HBECs炎症粘附和基质粘附功能的动态变化 | 第43-58页 |
| 3.1 材料与试剂 | 第44-45页 |
| 3.1.1 材料 | 第44页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第44页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第44-45页 |
| 3.2 方法 | 第45-48页 |
| 3.2.1 RSV感染16HBECs持续4代模型的建立 | 第45页 |
| 3.2.2 酶联免疫吸附法检测RSV感染后16HBECs细胞因子和趋化因子分泌水平的动态变化 | 第45-46页 |
| 3.2.3 人外周血白细胞的分离 | 第46页 |
| 3.2.4 细胞计数法检测16HBECs与白细胞的粘附情况 | 第46页 |
| 3.2.5 流式细胞仪检测16HBECs与白细胞的粘附情况 | 第46-47页 |
| 3.2.6 细胞计数法检测16HBECs与基质的粘附情况 | 第47页 |
| 3.2.7 结晶紫染色法检测16HBECs与基质的粘附情况 | 第47-48页 |
| 3.2.8 统计学方法 | 第48页 |
| 3.3 结果 | 第48-53页 |
| 3.3.1 RSV感染后传代过程中16HBECs细胞因子和趋化因子分泌水平的动态变化 | 第48-50页 |
| 3.3.2 RSV感染后传代过程中16HBECs与白细胞粘附水平的动态变化 | 第50-52页 |
| 3.3.3 RSV感染后传代过程中16HBECs与基质粘附水平的动态变化 | 第52-53页 |
| 3.4 讨论 | 第53-58页 |
| 第四章 细胞间粘附分子-1(ICAM-1)和E-cadherin对RSV感染后16HBECs粘附功能的影响 | 第58-82页 |
| 4.1 材料与试剂 | 第58-60页 |
| 4.1.1 材料 | 第58-59页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第59-60页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第60页 |
| 4.2 方法 | 第60-67页 |
| 4.2.1 RSV感染16HBECs持续4代模型的建立 | 第60-61页 |
| 4.2.2 Real-Time PCR检测RSV感染后传代过程中16HBECs粘附分子基因表达水平的动态变化 | 第61-63页 |
| 4.2.3 Western bloting检测RSV感染后传代过程中16HBECs粘附分子蛋白表达水平的动态变化 | 第63-64页 |
| 4.2.4 半定量全细胞酶联免疫吸附法检测RSV感染后传代过程中16HBECs ICAM-1表达水平的动态变化 | 第64-65页 |
| 4.2.5 酶联免疫吸附法检测RSV感染后传代过程中16HBECs sICAM-1分泌水平的动态变化 | 第65页 |
| 4.2.6 抗体阻断实验观察粘附分子对16HBECs分泌细胞因子和趋化因子的影响 | 第65页 |
| 4.2.7 抗体阻断实验观察粘附分子对16HBECs炎症粘附功能的影响 | 第65-66页 |
| 4.2.8 抗体阻断实验观察粘附分子对16HBECs基质粘附功能的影响 | 第66-67页 |
| 4.2.9 统计学方法 | 第67页 |
| 4.3 结果 | 第67-77页 |
| 4.3.1 RSV感染后传代过程中16HBECs ICAM-1基因和蛋白表达水平的动态变化 | 第67-70页 |
| 4.3.2 RSV感染后传代过程中16HBECs sICAM-1分泌水平的动态变化 | 第70-71页 |
| 4.3.3 RSV感染后传代过程中16HBECs E-cadherin基因和蛋白表达水平的动态变化 | 第71-73页 |
| 4.3.4 粘附分子对RSV感染后16HBECs分泌细胞因子和趋化因子的影响 | 第73-74页 |
| 4.3.5 粘附分子对RSV感染后16HBECs炎症粘附功能的影响 | 第74-76页 |
| 4.3.6 粘附分子对RSV感染后16HBECs基质粘附功能的影响 | 第76-77页 |
| 4.4 讨论 | 第77-82页 |
| 第五章 结论 | 第82-83页 |
| 综述 | 第83-95页 |
| 参考文献 | 第95-118页 |
| 在读期间主要的研究成果 | 第118-119页 |
| 致谢 | 第119-120页 |
