| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第10-23页 |
| 1.1 离子通道概述 | 第10-11页 |
| 1.2 钙激活氯通道 | 第11-15页 |
| 1.2.1 CaCCs 的分子基础 | 第12-13页 |
| 1.2.2 TMEM16A 和 TMEM16B 被确认为钙激活的氯离子通道 | 第13-15页 |
| 1.3 离子通道的药理研究 | 第15-18页 |
| 1.3.1 药物的作用靶点 | 第15页 |
| 1.3.2 药物筛选实验方法简介 | 第15-16页 |
| 1.3.3 CaCCs 的调节剂 | 第16-18页 |
| 1.4 膜片钳技术 | 第18-20页 |
| 1.4.1 膜片钳的发展及其应用 | 第18-19页 |
| 1.4.2 膜片钳基本记录模式 | 第19-20页 |
| 1.5 共聚焦荧光显微镜技术 | 第20-21页 |
| 1.5.1 共聚焦荧光显微镜的发展 | 第20页 |
| 1.5.2 荧光的产生 | 第20页 |
| 1.5.3 荧光的淬灭 | 第20-21页 |
| 1.5.4 激光扫描共聚焦显微镜在医学及生物学研究中的应用 | 第21页 |
| 1.6 论文研究的目的、内容和意义 | 第21-23页 |
| 1.6.1 研究目的 | 第21页 |
| 1.6.2 研究意义及内容 | 第21-23页 |
| 第二章 实验材料与研究方法 | 第23-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第23页 |
| 2.1.2 实验所需试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.3 实验采用的细胞、质粒以及用于扩增质粒的菌种 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-29页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第25页 |
| 2.2.2 质粒扩增与提取 | 第25-26页 |
| 2.2.3 瞬时转染 | 第26-27页 |
| 2.2.4 电生理实验方法 | 第27-28页 |
| 2.2.5 共聚焦荧光显微镜观察并记录实验结果 | 第28-29页 |
| 2.3 数据采集、分析及图像处理 | 第29-30页 |
| 第三章 TMEM16B 电生理特性的研究 | 第30-37页 |
| 3.1 实验方法以及溶液配制 | 第30-31页 |
| 3.2 实验结果 | 第31-36页 |
| 3.2.1 TMEM16B 表现出钙激活氯离子电流的典型特征 | 第31-33页 |
| 3.2.2 TMEM16B 具有钙离子敏感性和电压依赖性 | 第33页 |
| 3.2.3 TMEM16B 具有阴离子选择性 | 第33-34页 |
| 3.2.4 ATP 不能使转有 YFP 和 TMEM16B 质粒的 HEK 293T 荧光淬灭 | 第34-36页 |
| 3.3 讨论 | 第36-37页 |
| 第四章 壳寡糖对 TMEM16B 的激活作用及其激活机制的研究 | 第37-42页 |
| 4.1 实验方法以及溶液配制 | 第37-38页 |
| 4.2 实验结果 | 第38-40页 |
| 4.2.1 TMEM16B 能被壳寡糖激活 | 第38页 |
| 4.2.2 TMEM16B 对壳寡糖的敏感性以及电压敏感性 | 第38-39页 |
| 4.2.3 壳寡糖不引起胞内 Ca2+浓度升高 | 第39-40页 |
| 4.3 讨论 | 第40-42页 |
| 第五章 壳寡糖进入细胞的机制探究 | 第42-48页 |
| 5.1 实验方法 | 第43-44页 |
| 5.1.1 壳寡糖的荧光标记方法 | 第43页 |
| 5.1.2 FITC-COS 进入细胞的相对数量与温度关系的实验 | 第43页 |
| 5.1.3 DiI 上膜标记方法 | 第43-44页 |
| 5.1.4 细胞膜上磷脂酰丝氨酸检测 | 第44页 |
| 5.2 实验结果 | 第44-47页 |
| 5.2.1 FITC-COS 进入细胞具有温度依赖性 | 第44-45页 |
| 5.2.3 壳寡糖入胞过程依赖于细胞膜的流动 | 第45-47页 |
| 5.3 讨论 | 第47-48页 |
| 第六章 结论与展望 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
