缩略语表 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
前言 | 第11-12页 |
文献回顾 | 第12-21页 |
实验一 力学刺激对成骨细胞生物学特性的影响 | 第21-27页 |
1 材料 | 第21-22页 |
1.1 主要仪器 | 第21页 |
1.2 主要试剂 | 第21-22页 |
1.3 细胞系 | 第22页 |
2 方法 | 第22-24页 |
2.1 细胞培养 | 第22页 |
2.2 细胞加压 | 第22页 |
2.3 细胞形态学分析 | 第22页 |
2.4 总 RNA 提取 | 第22-23页 |
2.5 反转录 | 第23页 |
2.6 实时定量 PCR 分析 | 第23-24页 |
3 结果 | 第24-26页 |
3.1 压力刺激对细胞形态的影响 | 第24页 |
3.2 压力刺激对细胞成骨相关因子 mRNA 表达的影响 | 第24-26页 |
4 讨论 | 第26-27页 |
实验二 力学刺激对成骨细胞信号转导通路的影响 | 第27-32页 |
1 材料 | 第27-28页 |
1.1 主要仪器 | 第27页 |
1.2 主要试剂 | 第27页 |
1.3 细胞系 | 第27-28页 |
2 方法 | 第28-30页 |
2.1 细胞培养 | 第28页 |
2.2 总 RNA 提取 | 第28页 |
2.3 反转录 | 第28-29页 |
2.4 实时定量 PCR 分析 | 第29-30页 |
3 结果 | 第30页 |
4 讨论 | 第30-32页 |
实验三 力学刺激对成骨细胞 ClC-3 及相关分子表达的影响 | 第32-45页 |
1 材料 | 第32-33页 |
1.1 主要仪器 | 第32页 |
1.2 主要材料 | 第32-33页 |
2 方法 | 第33-38页 |
2.1 细胞培养 | 第33页 |
2.2 siRNA 干扰 ClC-3 氯通道基因表达 | 第33-34页 |
2.3 过表达 ClC-3 氯通道基因 | 第34页 |
2.4 免疫荧光染色 | 第34页 |
2.5 总 RNA 提取方法如实验一 | 第34页 |
2.6 反转录 | 第34-35页 |
2.7 Western Blot 法 | 第35-37页 |
2.8 实时定量 PCR 分析 | 第37-38页 |
3 结果 | 第38-43页 |
3.1 持续性静压力刺激后 ClC-3 氯通道变化 | 第38页 |
3.2 siRNA 干扰 ClC-3 氯通道基因效率的测定 | 第38-39页 |
3.3 siRNA 干扰 ClC-3 氯通道基因并加压后相关信号分子表达变化 | 第39-40页 |
3.4 siRNA 干扰 ClC-3 氯通道基因并加压后免疫荧光结果 | 第40-41页 |
3.5 siRNA 干扰 ClC-3 氯通道基因并加压后 WB 结果 | 第41页 |
3.6 过表达 ClC-3 氯通道基因效率的测定 | 第41-42页 |
3.7 过表达 ClC-3 氯通道基因并加压后相关信号分子表达变化 | 第42-43页 |
4 讨论 | 第43-45页 |
小结 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-54页 |
附录 | 第54-59页 |
个人简历和研究成果 | 第59-60页 |
致谢 | 第60页 |